导读:本文包含了扣除杂交论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,抑制,差异,侧根,链式反应,藏红花,基因工程。
扣除杂交论文文献综述
马梦婷,王珊珊,陈晓莉,依斯拉穆,高庆华[1]（2015）在《固相磁珠扣除杂交法筛选奶牛Y-X精子差异表达基因》一文中研究指出【目的】筛选出奶牛Y-X精子差异表达基因。【方法】利用固相磁珠扣除杂交技术分选高纯度奶牛Y精子对X精子的表达基因,获得的差异片段经SMART扩增后构建Y精子对X精子消减杂交c DNA质粒库,克隆测序,在线进行序列同源性分析。【结果】筛选出的4条候选基因均与牛EST数据库中的序列高度同源,其中之一确认为牛Sry基因,其余3条牛未知功能基因。【结论】基于磁珠上的固相扣除杂交技术有利于简单快速的富集差异表达基因,可用于筛选奶牛Y-X精子候选差异表达基因。(本文来源于《新疆农业科学》期刊2015年04期）
刘美芹,沈昕,卢存福,尹伟伦[2]（2007）在《一种改进的固相扣除杂交法直接克隆全长差异表达基因》一文中研究指出该文集多种分离差异表达基因方法的优点于一体,自行优化了一种基于固相扣除杂交和聚合酶链式反应(PCR)技术直接克隆全长差异表达基因的策略.该策略中的所有操作步骤,包括poly(A)+mRNA的分离,cDNA的合成和扣除杂交都是在磁珠上进行的,操作简单易行.扣除杂交是用结合在磁珠上的以oligo(dT)为引物合成的对照材料(Driver)的cDNA第一链,直接扣除加有接头的处理材料(Tester)cDNA第二链中的共有序列.多次反复使用Driver一链与Tester二链进行杂交,能有效去除Tester二链中的共有序列.磁珠的分离能最小限度地减少每次杂交造成的损失.最后一轮扣除后的Tester二链中,含有大量差异表达序列,用Tester二链特有的接头引物进行扩增,能进一步提高扣除效率.该文选用此扣除方法,成功分离到了低温驯化沙冬青幼苗和对照苗2个群体的18个差异表达克隆,其中有4个克隆是全长cDNA序列.经序列分析发现,这些基因都与低温相关,进一步说明,该方法可用于克隆未知差异表达基因.(本文来源于《北京林业大学学报》期刊2007年05期）
佘卫炜,郭志刚,刘瑞芝[3]（2004）在《用扣除杂交法分离藏红花苷合成相关基因的克隆》一文中研究指出对藏红花苷合成的相关基因进行了初步分离与克隆实验研究,旨在分离与藏红花苷合成相关的特异性表达的cDNA克隆,为进一步从分子水平上研究藏红花素的合成机理奠定基础。实验采用经添加诱导子和合成前体、处于藏红花苷合成状态下的藏红花细胞和未添加诱导子和合成前体、处于生长状态的对照藏红花细胞为材料,采用扣除杂交法成功地分离到6条与藏红花苷合成相关的特异性表达的cDNA克隆。结果表明:其中一条与胡杨中由高盐环境引起的差异表达的一条mRNA的序列有较高的同源性。(本文来源于《清华大学学报(自然科学版)》期刊2004年12期）
夏铭,王首锋,王小兵,李海波,吴平[4]（2003）在《利用抑制性扣除杂交技术克隆水稻磷饥饿诱导基因(英文)》一文中研究指出磷素是植物生长所必需的重要元素。在缺磷环境中 ,植物能够调节自身的形态、生理生化和基因表达水平来适应环境的变化。为研究水稻 (OryzasativaL .)耐低磷胁迫的分子机理 ,采用抑制性扣除杂交技术 (SSH)构建磷饥饿诱导的水稻根系扣除cDNA文库。通过文库筛选和测序获得 18个已知基因和 4 7个功能未知基因。这些基因参与了不同的代谢过程 ,包括磷吸收和转运、信号传导、蛋白质合成和降解、碳水化合物代谢和胁迫反应。Northern杂交结果表明 ,在磷饥饿胁迫下这些基因呈现不同的表达模式 ,并且不同代谢过程中的基因对磷饥饿有着不同的反应(本文来源于《Acta Botanica Sinica》期刊2003年06期）
黄升谋[5]（2002）在《抑制性扣除杂交(SSH)技术原理及在水稻基因表达差异分析中的应用》一文中研究指出抑制性扣除杂交法运用了杂交二极动力学和链内退火优先于链间的原理 ,使原丰度有差别的单链cDNA相对含量基本一致 ,使非目的片段两端反向重复序列退火时产生“发卡”结构 ,不能与引物配对 ,从而选择性地抑制了非目的片段扩增。该方法假阳性率低 ,灵敏度高 ,在水稻基因表达差异分析中有着广泛的应用(本文来源于《孝感学院学报》期刊2002年03期）
王文兵,BING,Sebastian,周小琴,季平,董英[6]（2002）在《扣除杂交法筛选与非小细胞性肺癌转移相关的基因(英文)》一文中研究指出非小细胞性肺癌病人的术后死亡率很高 ,其原因是该病易发生转移。收集了肺癌早期患者的样品 ,并根据患者资料分成转移型 (n =4)和非转移型 (n =5 ) ,采用扣除杂交法筛选与非小细胞性肺癌转移相关的基因。扣除后的cDNA文库中得到了 2 2 5个有效克隆。对这些克隆进行了测序 ,在基因文库中比较了核苷酸同源性 ,初步确定了这些克隆对应的基因 ,并根据基因可能涉及的功能加以分类。通过实时 (realtime)RT PCR鉴定 ,发现 10种基因在用于扣除试验的转移病人样品中的平均表达量比非转移病人高。进一步对 70位患非小细胞性肺癌病人 (I至IIIA期 )的样品进行了检测。根据统计分析 ,在I和II期病人中 ,2种基因MALA1和EIF4A1在发生转移的病人样品中的表达与在非转移的病人中有显着差异性。这些结果将有助于分析非小细胞性肺癌病变发生转移的可能性(本文来源于《生物化学与生物物理学报》期刊2002年03期）
王小兵[7]（2002）在《利用抑制性扣除杂交（SSH）技术克隆水稻根系硝态氮诱导基因及诱导基因表达谱的研究》一文中研究指出侧根是植物吸收利用土壤养分的重要器官。为研究旱种条件下NO3~-对水稻侧根发育及其氮(N)吸收的影响，本研究设置了3个蛭石培养实验：分根处理、全株缺氮、全株供氮处理。分根处理(一半根系供应3 mmol／LKNO_3，另一半根系供应3mmol／LKCl)结果表明：局部供应NO_3~-能够促进水稻侧根生长。而在全株处理下，N饥饿诱导了侧根的伸长。水稻根系对NO_3~-的这两种反应都存在着显着的基因型差异。对地上部N浓度、可溶性总糖含量及N含量分析表明，这些生理指标在分根处理与全株加N处理中的差异均不显着，表明分根处理也能基本满足水稻苗期正常生长对N的需求。在分根处理中，水稻的N含量与分根处理中供N一侧的平均侧根长度存在显着正相关，表明在养分不均一的介质中，侧根长度对水稻N素吸收具有十分重要的作用。而在N素充足的条件下，两者之间的相关性并不显着，这表明在养分充足的环境下，侧根长度可能并不是决定根系吸收N素的主要因素。 局部供应NO_3~-可以诱导水稻侧根加速生长从而提高水稻根系的氮吸收效率。为了研究局部供应NO_3~-诱导侧根生长的分子背景，本研究通过分根处理和抑制性扣除杂交(SSH)方法建立了水稻根系的NO_3~-诱导扣除库。通过正向和反向杂交筛选，挑选阳性克隆，测序和网上序列分析，最后得到39个己知功能基因和55个功能未知基因。这些基因分别参与氮素吸收，蔗糖转运和有机酸代谢，信号转导，蛋白合成和降解，植物抗性，激素代谢和细胞分裂等途径。大多数基因在供氮一侧根系的表达丰度高于不供氮一侧，表明这些基因的表达可能受NO_3~-调控。表达谱分析还发现植物地上部和地下部间的N素循环非常迅速。研究表明NO_3~-诱导基因的表达在分根缺氮一侧较处理前也有不同程度的增加，表明这些基因的表达可能受NO_3~-和地上部下运的氮代谢物协同调节。分根供氮侧根部碳水化合物分配的加强，信号转导和表达调控类基因的增强表达，生长素转运和乙烯合成的加强，以及细胞周期蛋白激酶CDKs类基因表达的增强，可能共同参与了NO_3~-诱导水稻侧根生长的途径。(本文来源于《浙江大学》期刊2002-05-01）
黄升谋,邹应斌[8]（2002）在《差异显示反转录-PCR及抑制性扣除杂交在基因表达差异分析中的应用》一文中研究指出差异显示反转录 -PCR和抑制性扣除杂交是目前广泛应用于基因表达差异分析的方法 ,它们分别具有灵敏度高假阳性率低等特点 ,对其原理、技术、优缺点及在基因表达差异分析中的应用进行简要概述(本文来源于《江西农业大学学报(自然科学)》期刊2002年02期）
罗文波,于淑娟,高大维[9]（2000）在《抑制性扣除杂交技术(SSH)及其研究进展》一文中研究指出一般认为,真核生物基因总数为100,000个左右。但在一定发育阶段,在某一类型的细胞当中,则只有15%左右的基因得以表达[1]。而生物体几乎所有的生命活动过程包括病理的变化,从本质上讲均是基因表达变化的结果。因此,关于真核生物发育过程中基因的表达与调控的(本文来源于《生物技术》期刊2000年03期）
李捷,印莉萍,刘维仲[10]（1999）在《示差扣除杂交法及其在分子生物学中的应用》一文中研究指出对示差扣除杂交方法中人们比较熟悉的示差筛选、扣除杂交和ＤＤＲＴ－ＰＣＲ法，以及近几年新提出的ＲＤＡ、ＳＳＨ和ＲＳＤＤ法等六种主要的差异基因筛选法，从其原理、在分子生物学中的应用、优缺点及其改进方法进行了简要概述。(本文来源于《生物技术通报》期刊1999年03期）
扣除杂交论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
该文集多种分离差异表达基因方法的优点于一体,自行优化了一种基于固相扣除杂交和聚合酶链式反应(PCR)技术直接克隆全长差异表达基因的策略.该策略中的所有操作步骤,包括poly(A)+mRNA的分离,cDNA的合成和扣除杂交都是在磁珠上进行的,操作简单易行.扣除杂交是用结合在磁珠上的以oligo(dT)为引物合成的对照材料(Driver)的cDNA第一链,直接扣除加有接头的处理材料(Tester)cDNA第二链中的共有序列.多次反复使用Driver一链与Tester二链进行杂交,能有效去除Tester二链中的共有序列.磁珠的分离能最小限度地减少每次杂交造成的损失.最后一轮扣除后的Tester二链中,含有大量差异表达序列,用Tester二链特有的接头引物进行扩增,能进一步提高扣除效率.该文选用此扣除方法,成功分离到了低温驯化沙冬青幼苗和对照苗2个群体的18个差异表达克隆,其中有4个克隆是全长cDNA序列.经序列分析发现,这些基因都与低温相关,进一步说明,该方法可用于克隆未知差异表达基因.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
扣除杂交论文参考文献
[1].马梦婷,王珊珊,陈晓莉,依斯拉穆,高庆华.固相磁珠扣除杂交法筛选奶牛Y-X精子差异表达基因[J].新疆农业科学.2015
[2].刘美芹,沈昕,卢存福,尹伟伦.一种改进的固相扣除杂交法直接克隆全长差异表达基因[J].北京林业大学学报.2007
[3].佘卫炜,郭志刚,刘瑞芝.用扣除杂交法分离藏红花苷合成相关基因的克隆[J].清华大学学报(自然科学版).2004
[4].夏铭,王首锋,王小兵,李海波,吴平.利用抑制性扣除杂交技术克隆水稻磷饥饿诱导基因(英文)[J].ActaBotanicaSinica.2003
[5].黄升谋.抑制性扣除杂交(SSH)技术原理及在水稻基因表达差异分析中的应用[J].孝感学院学报.2002
[6].王文兵,BING,Sebastian,周小琴,季平,董英.扣除杂交法筛选与非小细胞性肺癌转移相关的基因(英文)[J].生物化学与生物物理学报.2002
[7].王小兵.利用抑制性扣除杂交（SSH）技术克隆水稻根系硝态氮诱导基因及诱导基因表达谱的研究[D].浙江大学.2002
[8].黄升谋,邹应斌.差异显示反转录-PCR及抑制性扣除杂交在基因表达差异分析中的应用[J].江西农业大学学报(自然科学).2002
[9].罗文波,于淑娟,高大维.抑制性扣除杂交技术(SSH)及其研究进展[J].生物技术.2000
[10].李捷,印莉萍,刘维仲.示差扣除杂交法及其在分子生物学中的应用[J].生物技术通报.1999
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