伯氏疟原虫推测分泌动合子蛋白7截短片段传播阻断功能的研究

伯氏疟原虫推测分泌动合子蛋白7截短片段传播阻断功能的研究

论文摘要

目的通过体外阻断实验与蚊虫直接喂养实验对截短的重组伯氏疟原虫推测分泌动合子蛋白7(r Pb PSOP7) 31~210氨基酸(aa)片段的传播阻断能力进行研究。方法体外阻断实验,雌性BALB/c小鼠经腹腔注射5×10~6伯氏疟原虫感染红细胞(Pb RBC),感染后第3天,尾静脉收集血液,与r Pb PSOP7免疫小鼠血清(大肠埃希菌表达并纯化,与弗氏佐剂混合后免疫BALB/c小鼠)进行混合培养,观察不同稀释倍数(1∶5、 1∶10、1∶50)免疫血清培养15 min后疟原虫配子体出丝数及培养24 h后动合子形成数的变化,以同样稀释倍数的His标签蛋白免疫血清为对照。蚊虫直接喂养实验,r Pb PSOP7 (实验组)或His标签蛋白(对照组)与弗氏佐剂混合后各免疫5只雌性BALB/c小鼠,于末次免疫后第10天,用苯肼处理并经腹腔注射5×10~6Pb RBC,感染后第3天,每组小鼠用至少50只雌性按蚊直接吸食小鼠血液,吸血后第10天解剖按蚊,计数蚊胃壁上的囊合子数,计算蚊虫感染率。实验重复3次。结果体外阻断实验中,与His标签蛋白免疫血清对照组相比,r Pb PSOP7免疫血清1∶5、 1∶10和1∶50稀释培养的配子体出丝数分别减少了22.0%、 8.0%和2.0%,差异无统计学意义(P> 0.05);与对照组相比,培养24 h后,1∶5、 1∶10与1∶50稀释培养的动合子形成数分别减少了69.2%、 56.4%和48.6%(P <0.01),呈抗体剂量依赖关系。3次独立的蚊虫直接喂养实验结果显示,实验组每只蚊胃壁上的平均囊合子数分别为(31.1±34.9)、(30.2±32.3)和(29.1±35.1)个,较对照组的(87.1±69.3)、(96.4±82.9)和(85.3±69.1)个分别减少了64.2%、 68.6%和65.8%(P <0.01)。按蚊感染率由对照组的96.4%(27/28)、 89.3%(25/28)和89.3%(25/28),降至实验组的78.6%(22/28)、 78.6%(22/28)和75%(21/28),分别降低了17.8%、 10.7%与14.3%(P>0.05)。结论 r Pb PSOP7免疫血清可明显减少动合子及囊合子的形成,抗r Pb PSOP7血清具有一定的传播阻断能力。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验动物及疟原虫虫株
  •   1.2 主要试剂
  •   1.3 r Pb PSOP7重组蛋白的表达与纯化
  •   1.4 实验动物免疫及血清采集
  •   1.5 体外疟原虫配子体出丝数检测
  •   1.6 体外动合子形成数检测
  •   1.7 按蚊体内囊合子形成数及蚊虫感染率检测
  •   1.8 统计学分析
  •   1.9 伦理批准和患者知情同意
  • 2 结果
  •   2.1 r Pb PSOP7免疫血清对配子体出丝的影响
  •   2.2 r Pb PSOP7免疫血清对动合子形成的影响
  •   2.3 r Pb PSOP7免疫血清对囊合子形成的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 郑文琪,王俊瑞,王华,刘飞,罗恩杰,曹雅明,韩艳秋

    关键词: 伯氏疟原虫,传播阻断疫苗,候选抗原,推测分泌动合子蛋白

    来源: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 基础医学

    单位: 内蒙古医科大学附属医院临床检验中心,内蒙古医科大学基础医学院寄生虫学教研室,中国医科大学基础医学院免疫学教研室,中国医科大学基础医学院病原生物学教研室

    基金: 国家自然科学基金(No.81760367),内蒙古自治区卫生和计划生育委员会科研计划项目(No.201703106),内蒙古医科大学附属医院博士启动基金(No.NYFYBS2018)~~

    分类号: R382.31

    页码: 520-524+531

    总页数: 6

    文件大小: 2444K

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