Cry1Ia蛋白的表达与纯化

论文摘要

苏云金芽孢杆菌表达的Cry1Ia蛋白对鳞翅目和鞘翅目昆虫具有较好的杀虫活性。为便于后期评价不同的Cry1Ia蛋白,建立了Cry1Ia蛋白的表达与纯化体系。将一个cry1Ia基因的编码基因接入pET28aDel表达载体,并将其转化大肠杆菌BL21(DE3)star菌株。在大肠杆菌中诱导Cry1Ia蛋白的表达,并与Bt中的表达产物进行比较。最后,利用Cry1Ia蛋白C端包含的组氨酸标签,对大肠杆菌表达的Cry1Ia蛋白进行纯化。结果显示,大肠杆菌中Cry1Ia蛋白随着表达时间的延长,产物积累显著,并且其表达量高于Bt菌株,因此,其更适宜生产完整的Cry1Ia蛋白。对大肠杆菌表达的Cry1Ia进行纯化,获得了理想的结果。研究构建了Cry1Ia蛋白的大肠杆菌表达体系,并成功对其进行纯化,可为进一步研究此类蛋白的杀虫活性和机制奠定基础。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 试验材料
•   1.2 试验方法
•     1.2.1 表达载体的构建
•     1.2.2 Cry1Ia蛋白的表达与SDS-PAGE分析
• 2 结果与分析
•   2.1 cry1Ia基因的表达载体构建
•   2.2 Cry1Ia蛋白的表达
•   2.3 Cry1Ia蛋白的纯化
• 3 结论与讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 郭小琴,钱红梅,郭星,高佳丽,张义茹,高建华,王兴春

关键词: 苏云金芽孢杆菌,大肠杆菌,蛋白表达,蛋白纯化

来源: 山西农业科学 2019年05期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学,有机化工,植物保护

单位: 山西农业大学生命科学学院,山西农业大学农业生物工程研究所

基金: 国家自然科学基金项目(31601690),山西省研究生教育创新项目(2018BY066)

分类号: TQ453;Q78

页码: 748-750+769

总页数: 4

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