导读:本文包含了体外钙化模型论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,平滑肌,主动脉,体外,动脉,血管,表型。
体外钙化模型论文文献综述
何虎强,何延政,刘勇[1]（2016）在《人股动脉平滑肌细胞体外培养及钙化模型的建立》一文中研究指出目的:建立人股动脉平滑肌细胞体外培养及血管钙化模型。方法:运用组织块贴壁法进行人股动脉平滑肌细胞体外原代和传代培养,倒置相差显微镜和免疫荧光染色方法对培养细胞进行鉴定,并建立血管钙化模型。结果:原代和传代培养的细胞生长良好。光镜下细胞呈长梭形"峰-谷"样生长,具有典型的平滑肌细胞特征。经传代培养至第8代,细胞生长特性未见异常改变,免疫荧光染色证实为平滑肌细胞。通过钙化培养后,VON KOSSA染色进一步验证平滑肌细胞钙化。结论:组织块贴壁法可成功进行人股动脉血管平滑肌细胞的体外培养,传代后细胞生物学特征稳定,钙化培养后可建立良好的平滑肌细胞钙化模型,为心血管疾病动脉粥样硬化的机制研究奠定了实验基础。(本文来源于《中日友好医院学报》期刊2016年01期）
徐丽华,严金川,伍超,逯朝阳,王中群[2]（2014）在《小鼠血管平滑肌细胞原代培养及体外钙化模型的制备》一文中研究指出目的:建立一种简单、高效的小鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)原代培养方法及体外钙化模型。方法:采用改良的组织贴块法培养小鼠VSMCs,经免疫荧光染色法鉴定后,将细胞随机分为对照组和钙化组。采用von kossa染色及比色法检测两组细胞内钙含量。结果:培养3~5 d时,可见细胞从组织块边缘爬出,7~10 d后细胞融合成片;免疫荧光染色显示胞质表达特异性α-肌动蛋白;VSMCs培养至第2代细胞纯度达95%;与对照组相比,钙化组细胞的钙含量、碱性磷酸酶(ALP)活性明显增加(P均<0.05)。结论:改良的组织贴块法可获得高纯度的小鼠VSMCs;β-甘油磷酸钠在体外可有效诱导其钙化。(本文来源于《江苏大学学报(医学版)》期刊2014年02期）
张米,刘晓红,张伯尧,韩林,陆方林[3]（2013）在《人主动脉瓣间质细胞原代培养及体外钙化模型的建立》一文中研究指出目的原代培养人主动脉瓣间质细胞并建立体外瓣膜细胞钙化模型,诱导人主动脉瓣间质细胞向成骨细胞分化,并观察其表型变化。方法采用胶原酶两次消化法原代培养人主动脉瓣间质细胞,取传代3～7代间质细胞,随机分为2组,实验组以钙化诱导培养基培养,对照组以标准培养基培养。1周后,行von Kossa染色观察钙化结节形成情况,分光光度计测定碱性磷酸酶活性,免疫荧光染色检测瓣膜间质细胞表型蛋白,real-time PCR及蛋白质印迹分析检测成骨相关因子的表达,评价模型建立情况。结果培养1周后实验组出现钙化结节,每孔钙化结节数量[(51.20±14.31)个]高于对照组[(3.60±1.82)个],差异有统计学意义(P<0.05),同时实验组碱性磷酸酶活性较对照组升高(约上升4倍,P<0.05),细胞收缩表型平滑肌肌动蛋白(α-SMA)增高。Real-time PCR及蛋白质印迹分析提示,实验组中成骨相关因子Runx2、osteocalcin及osteopontin在mRNA及蛋白水平均较对照组升高,磷酸化Smad1/5/8蛋白表达也同时升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功建立了人主动脉瓣间质细胞体外诱导钙化模型,诱导后间质细胞呈现相对激活状态,表型向收缩表型和成骨表型转化,为今后实验提供了可靠的细胞模型。(本文来源于《第二军医大学学报》期刊2013年05期）
陈思,董念国,史嘉玮[4]（2010）在《主动脉瓣体外钙化模型的建立》一文中研究指出目的:探讨一种体外分离、扩增瓣膜间质细胞并诱导钙化的方法,建立体外瓣膜细胞钙化模型。方法:采用胶原酶消化法从新鲜猪主动脉瓣膜上分离并体外扩增瓣膜间质细胞,免疫荧光染色行细胞鉴定。4～8代间质细胞以含β-甘油磷酸的钙化培养基钙化诱导培养2周。钙化结节计数,茜素红S染色观察并检测钙沉积。实时定量逆转录聚合酶链反应(Real Time rt-PCR)检测α-平滑肌波动蛋白(α-SMA)及钙化相关因子骨钙素、骨桥蛋白、核心结合因子a1(Cbfa1)表达。结果:胶原酶消化法可从猪主动脉瓣膜上成功分离并体外扩增瓣膜间质细胞,α-SMA和波形蛋白(Vimentin)免疫荧光染色阳性,血管性血友病因子(vWF)染色阴性。钙化培养基体外钙化诱导培养1～2周可成功诱导钙化,间质细胞自发形成钙化结节,茜素红S染色阳性,钙沉积明显增加(P<0.05)。实时定量逆转录PCR提示钙化间质细胞α-SMA表达上调,并相对高表达钙化相关因子(P<0.05)。结论:胶原酶法联合钙化培养基可成功体外构建主动脉瓣膜细胞钙化模型。(本文来源于《临床心血管病杂志》期刊2010年09期）
刘立新,王士雯,丁秀云,王宇玫,赵玉生[5]（2006）在《牛主动脉平滑肌细胞体外钙化模型的制备》一文中研究指出目的利用β-甘油磷酸盐处理牛主动脉平滑肌细胞(BASMC)制备体外血管钙化模型。方法移植块法原代培养牛主动脉中膜平滑肌细胞,8代内的传代细胞添加10 mmol/Lβ-甘油磷酸盐培养10 d,Von Kossa染色、茜素红S染色和电镜检查鉴定钙化,同时测量细胞层钙沉积、碱性磷酸酶活性及培养上清的骨钙素含量。结果10 d后细胞层出现大量钙盐沉积,并且β-甘油磷酸盐时间依赖性增加钙沉积,碱性磷酸酶活性及骨钙素含量各时间点均较正常培养细胞显着增加(P<0.01)。结论甘油磷酸盐能在短期内诱导出BASMC广泛钙化,用此方法制备的BASMC是一种良好的研究血管钙化的体外模型。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2006年10期）
崔晓暄,王士雯,齐鹏[6]（2001）在《体外血管钙化模型中骨钙素的分泌和X型胶原的表达》一文中研究指出目的 :研究 2 5 羟基胆固醇对体外培养的主动脉中膜细胞钙化的促进作用 ,以及在此过程中骨钙素的分泌和X型胶原mRNA的表达与钙化的关系 ,初步探讨主动脉钙化的机制。方法 :采用外殖块法分离培养家兔主动脉中膜细胞 ,进行vonkossa染色以显示钙化 ,显微分光光度法检测细胞内外不溶性钙。平衡法1 2 5 I放免测定培养上清骨钙素的含量。RT PCR方法检测X型胶原mRNA的表达。结果 :2 5 羟基胆固醇 (实验组 )培养的传代细胞可见多个细胞结节 ,且细胞结节vonkossa染色阳性 ;而对照组无细胞结节形成 ,vonkossa染色阴性。前者每孔不溶性钙沉积量 ,以及培养上清中骨钙素含量明显高于后者。且实验组X型胶原mRNA的表达为阳性 ,而对照组为阴性。结论 :2 5 羟基胆固醇可促进主动脉中膜细胞发生钙化。主动脉中膜在体外钙化过程中与成骨细胞相似 ,骨钙素分泌增多且有X型胶原mRNA的表达 ,表明二者具有某些共同的发生机制(本文来源于《心肺血管病杂志》期刊2001年03期）
体外钙化模型论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:建立一种简单、高效的小鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)原代培养方法及体外钙化模型。方法:采用改良的组织贴块法培养小鼠VSMCs,经免疫荧光染色法鉴定后,将细胞随机分为对照组和钙化组。采用von kossa染色及比色法检测两组细胞内钙含量。结果:培养3~5 d时,可见细胞从组织块边缘爬出,7~10 d后细胞融合成片;免疫荧光染色显示胞质表达特异性α-肌动蛋白;VSMCs培养至第2代细胞纯度达95%;与对照组相比,钙化组细胞的钙含量、碱性磷酸酶(ALP)活性明显增加(P均<0.05)。结论:改良的组织贴块法可获得高纯度的小鼠VSMCs;β-甘油磷酸钠在体外可有效诱导其钙化。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
体外钙化模型论文参考文献
[1].何虎强,何延政,刘勇.人股动脉平滑肌细胞体外培养及钙化模型的建立[J].中日友好医院学报.2016
[2].徐丽华,严金川,伍超,逯朝阳,王中群.小鼠血管平滑肌细胞原代培养及体外钙化模型的制备[J].江苏大学学报(医学版).2014
[3].张米,刘晓红,张伯尧,韩林,陆方林.人主动脉瓣间质细胞原代培养及体外钙化模型的建立[J].第二军医大学学报.2013
[4].陈思,董念国,史嘉玮.主动脉瓣体外钙化模型的建立[J].临床心血管病杂志.2010
[5].刘立新,王士雯,丁秀云,王宇玫,赵玉生.牛主动脉平滑肌细胞体外钙化模型的制备[J].基础医学与临床.2006
[6].崔晓暄,王士雯,齐鹏.体外血管钙化模型中骨钙素的分泌和X型胶原的表达[J].心肺血管病杂志.2001
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