导读:本文包含了宫内基因治疗论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因治疗,小鼠,宫内,干细胞,小家鼠,基因,疗法。
宫内基因治疗论文文献综述
方群,罗艳敏[1]（2011）在《宫内造血干细胞移植和基因治疗的现状和展望》一文中研究指出宫内造血干细胞移植(IUHCT)和宫内基因治疗(IUGT)对一些在胎儿期或出生后早期已造成不可逆损害的单基因遗传病显示了潜在的治疗前景,但仍存在很多问题。IUHCT后宿主造血区的容受性、宿主造血细胞的竞争、植入移植物的免疫屏障是有待解决的难题。通过IUHCT诱导供体特异性的移植物免疫耐受,出生后进行无毒性(或低毒性)的骨髓移植,是目前有临床前景的治疗策略。IUGT仍处于早期研究阶段,有关基因插入突变、影响器官发育、低水平的生殖细胞传递等安全性问题仍然需要深入研究。此外,必须考虑到IUGT的伦理学和潜在改变人类基因组的问题。(本文来源于《中国实用妇科与产科杂志》期刊2011年04期）
张喜君,李开艳[2]（2010）在《应用超声造影剂介导体内基因治疗》一文中研究指出超声结合微泡可以促进质粒向目标组织转移和释放,达到基因治疗的目的。基因治疗可用于治疗多种疾病,如癌症、遗传性疾病、心血管疾病、中枢神经系统疾病等。本文就超声波结合微泡造影剂介导基因在心血管系统疾病及其他体内疾病中治疗进展及应用进行综述。(本文来源于《中国医学影像技术》期刊2010年05期）
董京艳,莫晓芬[3]（2009）在《电穿孔技术辅助眼内基因治疗》一文中研究指出电穿孔法可将外源基因有效导入靶组织或器官,简单经济,可应用于多种组织器官上,近年来已成为一种新颖的非病毒基因转染体系,应用于眼内疾病基因治疗的研究屡见报道。本文对电穿孔技术辅助基因转染在眼内疾病治疗中的研究进展做一综述。(本文来源于《中国眼耳鼻喉科杂志》期刊2009年01期）
李佳,陈必良[4]（2008）在《干细胞宫内基因治疗的研究进展》一文中研究指出遗传病学、分子生物学研究的深入以及产前诊断技术的发展和应用,为妊娠早期诊断胎儿遗传性疾病创造了重要的条件,宫内基因治疗成为妊娠早期预防和治疗该类疾病的有效途径。由于干细胞具有多能性或全能性、自我更新能力和高度增殖能力等特性,使得其在宫内基因治疗方面具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值。该文就目前国内、外对干细胞应用于宫内基因治疗的最新研究成果及有待解决的问题作以综述。(本文来源于《中国妇幼健康研究》期刊2008年06期）
梁兵,彭英[5]（2008）在《靶向FA-PEG-PEI为传输载体的恶性胶质瘤体内基因治疗实验研究》一文中研究指出目的观察靶向纳米材料FA-PEG-PEI介导的联合基因pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD在体外对C6胶质瘤细胞的杀伤作用以及在大鼠体内对C6胶质瘤基因治疗的疗效。方法应用立体定向仪和微量注射器建立大鼠C6胶质瘤脑内肿瘤模型,脑内接种后第叁天根据分组原位注入FA-PEG-PEI与pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD形成的复合物或生理盐水。各组动物治疗后动物行为及荷瘤鼠(本文来源于《第十一届全国神经病学学术会议论文汇编》期刊2008-08-01）
李亚琴,韩树萍,王玢,郭锡熔[6]（2008）在《TrkB基因在脑源性神经营养因子治疗宫内缺氧缺血性脑损伤中的表达变化》一文中研究指出目的:探讨酪氨酸激酶(TrkB)基因在尾静脉注射脑源性神经营养因子(BDNF)治疗宫内缺血缺氧脑损伤中的表达变化。方法:钳夹孕鼠子宫动脉30min后,尾静脉注射BDNF 1μg或2μg,持续5天,同时设立假手术组和生理盐水组为对照,RT-PCR和Western blot方法检测胎鼠TrkB mRNA和蛋白的表达变化。结果:孕鼠子宫动脉钳夹30min后,可造成胎鼠TrkB的表达增高,并且进行尾静脉注射外源性BDNF可使TrkB表达增高更为明显。结论:通过尾静脉注射BDNF可明显上调胎鼠脑内TrkB的核酸和蛋白表达,加强BDNF对脑神经元的保护和修复作用。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2008年07期）
[7]（2008）在《鼻内基因送递可以治疗胶原诱导的小鼠关节炎》一文中研究指出英国和美国研究者报告,对小鼠的研究结果显示,鼻内白介素10(IL-10)基因送递可延缓小鼠关节炎发生和减轻已有关节炎的小鼠的症状严重性。研究负责人、伦敦King学院的Linda S.Klavinskis博士说,这种给药方式似乎可避免将IL-10注射入关节(本文来源于《透析与人工器官》期刊2008年01期）
程苾恒[8]（2007）在《巨细胞病毒感染导致听力损失的发病机制及宫内基因治疗的初步探索》一文中研究指出第一部分MCMV感染导致听力损失的发病机制研究【目的】建立小鼠巨细胞病毒（MCMV）感染导致听力损失的小鼠动物模型，研究高迁移率族蛋白B1（HMGB-1）细胞信号通路在其发病机制中的作用。【方法】体外细胞培养法制备MCMV Smith株，细胞病变法（CPE）测定病毒致半数细胞感染量（TCID50）。ELISA法筛选MCMV IgM、IgG均阴性的BALB/c小鼠，雌雄小鼠交配受孕，待分娩后随机选择乳鼠分为病毒感染组和实验对照组，于生后24h内颅内注射病毒悬液100TCID50/10μL和等量无菌生理盐水。观察各组幼鼠的生存发育情况；测定2周龄幼鼠的听性脑干反应（ABR）；取幼鼠内耳组织分别采用RT-PCR和Western Blot法检测MCMV和HMGB-1 mRNA、糖基化终产物受体（RAGE）和NF-κB抑制物（IκBα）蛋白的表达。【结果】MCMV TCID_(50)为10~(5.22)/0.1mL。病毒感染组幼鼠存活44/121只，存在明显生长发育异常；实验对照组幼鼠存活47/47只，无显着异常。ABR测定听阈显示病毒感染组为28.42±3.03 dB，实验对照组为15.66±0.38 dB，差异有非常显着意义（P<0.01）。病毒感染组MCMV mRNA检测阳性，实验对照组阴性；HMGB-1 mRNA病毒感染组显着高于实验对照组（P<0.05）；病毒感染组RAGE蛋白表达较实验对照组明显升高，而IκBα明显降低，差异均有非常显著意义（P<0.01）。【结论】成功建立了MCMV感染导致听力损失的动物模型；HMGB-1/RAGE/NF-κB通路可能在CMV感染导致的听力障碍发病机制中占据重要地位。第二部分pshHMGB-1-EGFP双基因载体的构建和体外表达【目的】构建HMGB-1短发夹状RNA（shRNA）和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的双基因真核表达载体，并转染NIH/3T3细胞，以筛选出最有效的干扰质粒用于宫内基因治疗（IUGT）活体实验。【方法】设计并合成5种DNA寡核苷酸双链，分别含有被9bp茎环（loop）序列间隔的4个HMGB-1基因片段的反向重复序列以及阴性对照序列NC，与携带EGFP基因的pGenesil-1质粒载体连接，构建重组质粒pshHMGB-1-EGFP a、b、c、d和阴性对照质粒pNC-EGFP。对重组质粒酶切鉴定和测序后采用脂质体转染法转染NIH/3T3细胞，采用荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效率，RT-PCR和Western Blot测定HMGB-1mRNA和蛋白水平。【结果】Sal I酶切鉴定和测序结果表明重组质粒构建正确；在荧光显微镜下可以观察到NIH/3T3细胞内的绿色荧光，流式细胞技术检测转染率达57.25％；分别转染重组质粒pshHMGB-1-EGFP a、b、d的3组细胞HMGB-1 mRNA水平均呈不同程度下降，以质粒d最为明显，与其余各组差异具有显着意义（P<0.05）；转染重组质粒pshHMGB-1-EGFP a、b、d的3组细胞HMGB-1蛋白水平均降低，以d最为明显，与转染阴性对照质粒NC组和空白细胞组的差异具有非常显着意义（P<0.01）。【结论】成功构建了pshHMGB-1-EGFP双基因真核表达载体；重组干扰质粒能有效转染NIH/3T3细胞，并产生RNAi效应抑制HMGB-1表达，为RNAi用于IUGT的动物实验奠定了基础。第叁部分pshHMGB-1-EGFP用于宫内基因治疗的初步研究【目的】观察pshHMGB-1-EGFP重组质粒通过胎盘转染胎儿的效率和胎儿体内的RNAi效应，探索RNAi联合IUGT治疗先天性疾病的可能性。【方法】将孕12.5d BALB/c小鼠随机分为4组：pshHMGB-1-EGFP＋脂质体组（1组），pNC-EGFP＋脂质体组（2组），pNC-EGFP组（3组），生理盐水组（4组）。分别经尾静脉注射DNA-脂质体复合物（或质粒DNA或无菌生理盐水）。72h后处死孕鼠，分离胎盘和胎鼠各脏器，荧光显微镜检测胎盘和胎鼠体内EGFP表达；RT-PCR检测胎鼠HMGB-1 mRNA水平；电泳迁移率改变分析（EMSA）测定胎鼠NF-κB活性。【结果】借助脂质体转染的1、2组孕鼠所有胎仔体内均可见绿色荧光，单纯质粒注射的3组孕鼠所产41只胎仔均未检出荧光。1、2组胎盘绒毛膜板和迷路区、胚胎肝、肾、脑组织局部尤其脑室、心肌纤维之间小血管、大血管壁、肺间质血管壁、脾皮质及髓质血窦均可见较强烈绿色荧光表达，3、4组相应区域荧光表达微弱或未见明显荧光。1组HMGB-1 mRNA较其余3组明显降低，差异有显着意义（P<0.05）；NF-κB活性较其余3组明显降低，差异有非常显着意义（P<0.01）。【结论】pshHMGB-1-EGFP能在脂质体辅助下通过胎盘转染胎仔，并在胎仔体内发挥RNAi效应抑制HMGB-1表达和NF-κB活性，为CMV宫内感染导致的先天性疾病提示了一条可能的治疗途径。(本文来源于《华中科技大学》期刊2007-05-01）
Brgel,K.,Pohlenz,J.,Holzgreve,W.,Bramswig,J.H.,张旸[9]（2006）在《甲状腺过氧化物酶基因的一种新复合杂合型突变(Y453D和C800R)男胎甲状腺肿和甲状腺功能减退的宫内治疗:一项长期随访研究》一文中研究指出We report the results of intrauterine L- thyroxine therapy, and the long-term follow-up in a fetus who presented at 32 weeks' gestation with goitrous hypothyroidism, hyperextension of the neck, and polyhydramnios. Spontaneous delivery was possible and hypothyroidism improved. Molecular analysis revealed a new compound heterozygous mutation (Y453D/C800R) in the TPO gene.(本文来源于《世界核心医学期刊文摘(妇产科学分册)》期刊2006年01期）
于松[10]（2004）在《宫内基因治疗后小鼠体内人凝血因子Ⅸ基因的表达与免疫效果研究》一文中研究指出血友病B是一种遗传性出血性疾病，它是由于血液中凝血因子Ⅸ（clotting factorⅨ，FⅨ）缺乏而导致的严重凝血功能障碍。血友病B在男性中发病率为叁万分之一，表现为自发性出血性症状，严重者可因关节出血导致关节变形而残废。临床治疗血友病B主要靠蛋白替代治疗，即输血、凝血酶原复合物或补充FⅨ浓缩制剂。这样不仅价格昂贵，还可能引起严重输血反应；有一部分患者因反复输注而产生抗体，使再次接受含有FIX制品会极大降低其凝血功能和出现严重过敏反应,发生率可达50%；严重者还面临爱滋病及肝炎病毒感染的威胁。近年来开展的基因治疗技术有望成为一种根治血友病的有效手段。动物实验中显示了良好的前景，我国已开展了临床试验，均取得<WP=126>了良好疗效。基因治疗不同于传统的蛋白替代疗法，它试图给细胞提供一个健康的基因模板，以修补或替代功能缺陷的基因，从而使被遗传修饰的靶细胞成为特定的蛋白生产工厂，源源不断地为机体提供所需的蛋白，从根本上治愈疾病。由于FⅨ基因已经被克隆，且调控简单；基因转移的靶向性没有特殊要求，只要能通过血液循环到达全身即可；血友病B的基因治疗对蛋白的表达量没有严格要求，较低的表达水平就能够改善出血症状。当外源FⅨ的表达水平达到正常值的5%即有治疗效果，达到10%就能够消除血友病的症状。由于腺病毒(Adenovirus，Ad)载体在哺乳动物及其多种细胞上进行基因转移和蛋白表达的高效性，它具有①靶细胞种类多，导入效率高；②对增殖停止期细胞也有很高的导入效率，这是逆转录病毒载体所不具备的；③不整合到宿主基因组中，从而不会引起插入突变；④超离心可以制得高滴度1011PFU/ml以上病毒载体等诸多优点，因而在临床基因治疗领域也越来越受到重视。用于构建重组基因的腺病毒载体有两种：复制型和非复制型腺病毒。非复制型腺病毒确实了对于病毒复制所必需的病毒早期基因E1区，已知此区编码的多种蛋白（如E1A，E1B-19K和E1B-55K）与病毒的免疫逃逸机制有关。与复制型腺病毒相比，非复制型腺病毒更为安全。<WP=127>考虑到传统方法构建重组腺病毒是一个相当费时的过程，我们采用了生长周期短、便于操作的大肠杆菌细胞内进行腺病毒骨架与克隆有外源基因的穿梭载体同源重组的新策略，显着提高了获得重组病毒的效率。在这一过程中，包括叁个依次递进的步骤：将外源基因亚克隆于穿梭载体；重组穿梭载体与腺病毒骨架载体在大肠杆菌细胞内同源重组得到重组腺病毒DNA质粒；线性化重组腺病毒质粒转染293包装细胞得到重组腺病毒。通过这一路线，我们首次获得了人凝血因子Ⅸ基因非复制型重组腺病毒：AdEasyCMV-FⅨ。在用AdEasy系统构建重组腺病毒时，根据国内实验室的条件，我们对构建过程中的某些步骤进行了改进，使之更加简便、有效。①在转化及转染过程中，所用质粒均通过碱裂解法小量制备获得，这样就避免了使用CsCl超速离心、大提试剂盒或重组试剂盒等较为繁琐、费时、费资、且对实验设备有较高要求的制备及纯化质粒的方法，使重组腺病毒载体的构建工作在国内较普通的分子生物学实验室也能进行；②转化或转染前，对经碱裂解法小量制备的质粒在酶切消化后，借助常规的无水乙醇沉淀或透析袋电洗脱法回收、纯化，就完全可用于共转化或转染等操作步骤；③E.coli BJ5183为RecA +菌株，利于线性的穿梭质粒和环化的腺病毒骨架分子之间进行同源重组，从而获得重组腺病毒的质粒；但在E.coli BJ5183中质粒产量较低，难以获得高拷贝质粒进行转染操作。而用电穿孔转化法，可将重组腺病毒的<WP=128>质粒转化到能获得高拷贝的E.coli DH10B中，成功构建了pAdEasy-F.IX腺病毒重组质粒，经酶切和PCR鉴定正确,为细菌内同源重组的推广应用开避了另一途径。④方法简便、快捷,实验周期短。重组腺病毒质粒的同源重组在细菌内完成，从质粒转化BJ5183到重组克隆的出现只需要12～20d，对细菌内质粒DNA的抽提、酶切、鉴定远较哺乳动物细胞内DNA的抽提、鉴定容易.在进行体内免疫之前，我们对所得到的重组腺病毒的生物学特性进行了较为全面的研究。（1）：透射电镜观察到所得到的重组病毒直径约为70nm，具有较为典型的腺病毒形态，无其它微生物存在；（2）PCR及Southern blot鉴定表明重组腺病毒中，稳定地整合有F.Ⅸ基因；（3）Western blot实验中，重组腺病毒表达的F.Ⅸ蛋白可被F.Ⅸ抗体所特异性识别，分子量与天然人F.Ⅸ分子量相仿。血友病基因治疗目的之一就是hFIX产生达到治疗剂量并能长期表达，同时机体免疫系统不产生任何排斥反应。因此，只有通过适当的动物体内免疫学实验研究，才能判定转入的目的基因是否能长期表达；另外，我们设计产前经卵黄囊静脉输入免疫系统尚未发育完善的胎鼠体内这一途径，以进一步观察重复给与hFIX注射后免疫系统对外源性和转基因产物是否产生免疫耐受。本实验分叁个阶段进行。第一阶段：产前基因治疗小鼠产后血清FIX及其抗体的表达；第二阶段： 产前<WP=129>基因治疗鼠对重复注射hFIX后免疫耐受情况观察；第叁阶段：产前基因治疗的小鼠重复给与含AdhFIX腺病毒载体血清hFIX及其抗体的表达。本试验应用MF1小鼠，是由于这种小鼠?(本文来源于《吉林大学》期刊2004-04-01）
宫内基因治疗论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
超声结合微泡可以促进质粒向目标组织转移和释放,达到基因治疗的目的。基因治疗可用于治疗多种疾病,如癌症、遗传性疾病、心血管疾病、中枢神经系统疾病等。本文就超声波结合微泡造影剂介导基因在心血管系统疾病及其他体内疾病中治疗进展及应用进行综述。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
宫内基因治疗论文参考文献
[1].方群,罗艳敏.宫内造血干细胞移植和基因治疗的现状和展望[J].中国实用妇科与产科杂志.2011
[2].张喜君,李开艳.应用超声造影剂介导体内基因治疗[J].中国医学影像技术.2010
[3].董京艳,莫晓芬.电穿孔技术辅助眼内基因治疗[J].中国眼耳鼻喉科杂志.2009
[4].李佳,陈必良.干细胞宫内基因治疗的研究进展[J].中国妇幼健康研究.2008
[5].梁兵,彭英.靶向FA-PEG-PEI为传输载体的恶性胶质瘤体内基因治疗实验研究[C].第十一届全国神经病学学术会议论文汇编.2008
[6].李亚琴,韩树萍,王玢,郭锡熔.TrkB基因在脑源性神经营养因子治疗宫内缺氧缺血性脑损伤中的表达变化[J].南京医科大学学报(自然科学版).2008
[7]..鼻内基因送递可以治疗胶原诱导的小鼠关节炎[J].透析与人工器官.2008
[8].程苾恒.巨细胞病毒感染导致听力损失的发病机制及宫内基因治疗的初步探索[D].华中科技大学.2007
[9].Brgel,K.,Pohlenz,J.,Holzgreve,W.,Bramswig,J.H.,张旸.甲状腺过氧化物酶基因的一种新复合杂合型突变(Y453D和C800R)男胎甲状腺肿和甲状腺功能减退的宫内治疗:一项长期随访研究[J].世界核心医学期刊文摘(妇产科学分册).2006
[10].于松.宫内基因治疗后小鼠体内人凝血因子Ⅸ基因的表达与免疫效果研究[D].吉林大学.2004
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