肝癌干细胞分泌外泌体对肝癌恶性生物学行为调控研究

论文摘要

目的探讨肝癌干细胞通过分泌外泌体对肝癌恶性生物学行为进行调控的潜在可能性。方法利用免疫磁珠分选技术,对HepG2肝癌细胞中的干性细胞亚群进行分选,富集CD133+肝癌细胞,将其分为对照组与实验组。分别应用CD133-HepG2细胞培养上清液、CD133+HepG2细胞培养上清液与正常培养基按照相同比例配置,培养肝癌HepG2细胞系。比较两组的细胞增殖、细胞侵袭能力。提取上清液中外泌体进一步分析其作为诱导作用介质的可能性。结果成功分离得到CD133+HepG2肝癌细胞,经Western-Blot及Real-time PCR鉴定结果显示,CD133蛋白显著高表达,CD133基因显著扩增,肝癌干细胞被显著富集。实验组应用含有CD133+HepG2肝癌细胞上清液培养肝癌细胞系HepG2,其细胞增殖、侵袭能力均显著增强（P<0.05）。本研究成功在CD133+HepG2肝癌细胞上清液中提取出外泌体。结论外泌体作为细胞间信息通讯的重要载体,参与了肝癌细胞信号传递过程,而肝癌干细胞所分泌的外泌体因其携带干性相关调控信号,其对周围肝癌细胞的发生、发展起到正向调控作用,促进肝癌细胞的恶性增殖能力。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 细胞系及细胞培养
•   1.2 研究方法
•     1.2.1 CD133+HepG2肝癌细胞免疫磁珠分选
•     1.2.2 干细胞表面标志物验证
•     1.2.3 细胞增殖实验
•     1.2.4 细胞侵袭实验
•     1.2.5 外泌体提取及鉴定
•   1.3 统计学方法
• 2 结果
•   2.1 免疫磁珠分选法筛选CD133+肝癌干细胞情况
•   2.2 CD133+HepG2肝癌细胞上清液对正常HepG2肝癌细胞增殖及侵袭能力影响
•   2.3 外泌体提取及鉴定情况
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张跃,韩涛,郑振东,韩磊

关键词: 肝癌,肝癌干细胞,外泌体

来源: 临床军医杂志 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 锦州医科大学北部战区总医院研究生培养基地,北部战区总医院肿瘤科,北部战区总医院肝胆外科

基金: 辽宁省自然科学基金计划重点项目(2018010153-301),辽宁省自然基金指导计划(2019-ZD-1072)

分类号: R735.7

DOI: 10.16680/j.1671-3826.2019.12.02

页码: 1284-1286

总页数: 3

文件大小: 1040K

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