亮细胞论文_曾小芳,安靓

导读:本文包含了亮细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:乳腺,干细胞,细胞,形态学,免疫,大鼠,化学。

亮细胞论文文献综述

曾小芳,安靓^[1]（2008）在《成年大鼠不同发育时期乳腺上皮小亮细胞CD24的免疫组化研究》一文中研究指出目的观察成年大鼠乳腺不同发育时期CD24阳性表达的乳腺上皮小亮细胞部位、数量的变化。方法制备成年大鼠乳腺不同发育时期(选取静止期、孕期、哺乳期、退化期)组织标本,采用免疫组织化学和光镜技术检测CD24的表达。结果CD24在导管小亮细胞中的染色程度普遍高于腺泡;相比于静止期和退化期,CD24更多地表达于孕期和哺乳期的小亮细胞;静止期和退化期表达无显着性差异(P>0.05);孕期和哺乳期表达也无显着性差异(P>0.05)。结论CD24蛋白参与了正常成年大鼠乳腺组织的发育过程,且可能是鉴定乳腺干细胞(MaSCs)及观察MaSCs发育与分化过程的重要分子。(本文来源于《热带医学杂志》期刊2008年09期）

曾小芳^[2]（2008）在《成年大鼠乳腺不同发育时期乳腺上皮小亮细胞CD24的免疫组化研究》一文中研究指出啮齿动物的乳腺上皮首先出现于乳腺带,一种可以形成未来腺管系统的上皮性芽胚。3周后,受性激素的刺激,腺管系统进入脂肪垫并形成分支,称为终末芽胚,为乳腺导管生长的起始点,是一层由杯状细胞包绕的体细胞团。随着导管伸展和终末芽胚的发育,体细胞形成导管内部腔上皮层,而杯状细胞形成外部的肌上皮层。形成导管腔的过程中,体细胞通常会发生凋亡,而杯状细胞也会进入体细胞层,因此认为杯状细胞是干细胞的来源。成熟乳腺也可能存在具有干细胞功能的细胞。在啮齿动物,妊娠中会出现细胞迅速增殖,导致大量像葡萄串一样的分支和分泌泡形成。在分泌泡中,腔上皮产生乳汁,而肌上皮通过收缩将乳汁从分泌泡挤入导管。一旦断乳,这些结构通过凋亡而消失,像未妊娠一样,脂肪垫中的导管结构也变得相当稀疏。此循环在动物一生中经历多次。仅仅干细胞的增殖潜能可以维持上述过程;因此提示存在暂时性干细胞,受到性刺激之前,这些细胞处于静止状态。而且不完整的过程也见于动情周期中。相同的循环也见于人类的妊娠和月经周期中,但在增殖程度上存在一定差异。此外,乳腺日常的细胞更新过程中,成熟的乳腺干细胞(mammary stemcells,MaSCs)也可能发挥一定作用。因为在哺乳过程中,乳汁中存在脱落的上皮细胞。脱落进入导管系统的细胞必须以一些方式进行补充,否则上皮细胞的数目不能维持整体性;具有这种功能的细胞可能为具有持续活性干细胞。所以对成熟的乳腺上皮,干细胞至少具有明显不同的两种功能,即暂时性或持续性干细胞。虽然乳腺组织中存在干细胞,但目前尚缺乏特异性的乳腺干细胞标记物,许多学者应用了包括乳腺球培养、5-溴基-2-脱氧-尿苷(BrdU)标记法、细胞表面标记如干细胞抗原1(Sca-1)和CD49f、Hoechst染色等一系列方法来鉴定乳腺干细胞。特别是基于表面抗原的MaSCs的表型分析是研究干细胞生物学特点和有效选择MaSCs进行临床移植治疗的一个关键技术,目前MaSCs表面抗原的分析技术己广泛用于细胞亚群的分离,其中Sca-1分子是最常应用的MaSCs筛选标记。但是近几年来已有资料证实了Sca-1~--MaSCs的存在,Stingl等利用流式细胞术分选出的CD49f~+/Sca-1~(hi)乳腺上皮细胞在移植实验中并不会形成聚落,而CD49f~+/Sca-1~(low)在清洁脂肪垫中却有很强的重建能力,且具CD49f~+表型的乳腺上皮细胞,经培养后最终都会表达Sca-1,说明Scal~--MaSCs可能比Scal~+-MaSCs更为原始。Alvi等在研究乳腺侧群细胞(用Hoechst染料和流式细胞术进行造血干/祖细胞分离时发现了一群特殊细胞称为侧群细胞,它具有类似干细胞的自我更新和多向分化潜能,被认为是一种普遍的干细胞表型。)时发现,SP和non-SP有相近的克隆形成能力,尽管其所含的Sca-1~+细胞的比例有显着差异(15.8%Sca-1 in SP and1.8%Sca-1 in non-SP cells)。因此,很有必要寻找新的特异性更强的干细胞表面标记。一个新的抗原CD24引起了人们的关注,最近,Shackleton等各乳腺组织制成单细胞悬液,经流式细胞仪筛选出具有特殊表面标志的细胞并注入LacZ转基因小鼠体内,结果发现所有接种Lin~-CD29~(hi)CD24~+细胞的小鼠在10周内均形成明显的克隆。虽然有关的研究尚不甚深入,但其应用前景诱人。在小鼠和大鼠乳腺导管和腺泡中,存在一种形态特别的上皮细胞。光镜下这种细胞胞体较小,呈圆形,胞核强嗜碱性,圆形居中,核质比大,胞质含细胞器少,胞质透明,清亮,被称作小亮细胞,类似的亮细胞也见于人类乳腺中。目前普遍认为,此小亮细胞可能代表了MaSCs。我们以成体大鼠为模型,运用组织学、免疫组织化学和光镜检测技术,研究了成体大鼠乳腺组织的发育规律,以及周围组织的发生演变;成体大鼠乳腺组织中CD24阳性小亮细胞表达量和表达部位的变化,行Kruskal-Wallis检验法作组间比较,Nemenyi法行组间两两比较,取检验水准α=0.05。各部分实验结果如下:第一部分:成体大鼠乳腺不同发育时期的形态学研究HE染色方法观察3月龄未孕、孕13天、产后7天、产后21天四个时期的大鼠乳腺组织。实验结果显示,未孕3月龄和产后21天乳腺组织大都为结缔组织和脂肪组织,上皮性导管和腺泡很少,孤立或成簇地散在于脂肪或结缔组织中。位于腺泡或导管内,有一种胞体较小的小亮细胞,它们分布于乳腺导管及腺泡的基底膜上或肌上皮与腺上皮细胞之间。它们与相邻细胞分界明显,未见其暴露于管腔或腺泡腔面。孕13天和产后7天的乳腺上皮细胞在乳导管基质中广泛增殖,腺泡发育数量增多,腺上皮细胞胞体变大,在乳腺导管及腺泡中,可以更方便地观察到小亮细胞,甚至可找到由1—3个小亮细胞组成的细胞团紧贴于基底膜。第二部分:成体大鼠乳腺不同发育时期小亮细胞CD24的免疫组化研究及统计学分析免疫组化观察显示,在选取的四个时期(未孕3月龄、孕13天、产后7天、产后21天,分别对应乳腺组织的静止期、孕期、哺乳期、退化期)的乳腺组织中,无论在导管或是腺泡上皮中,均可见CD24阳性的小亮细胞,且在导管中的染色程度普遍高于腺泡。统计分析结果(A:未孕3月龄,B:孕13天,C:产后7天,D:产后21天):①Kruskal-Wallis法,χ~2=21.36,P＜0.005;②Nemenyi法,X~2_(A,B)=12.02,P＜0.05;X~2_(A,C)=12.53,P＜0.05;X~2_(A,D)=0.15,P＞0.05;X~2_(B,C)=0.03,P＞0.05;X~2_(B,D)=8.79,P＜0.05;X~2_(C,D)=9.29,P＜0.05。说明相比于静止期和退化期,CD24更多地表达于孕期和哺乳期的小亮细胞;静止期和退化期表达无显着性差异(P＞0.05);孕期和哺乳期表达也无显着性差异(P＞0.05)。(本文来源于《南方医科大学》期刊2008-05-01）

亮细胞论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

啮齿动物的乳腺上皮首先出现于乳腺带,一种可以形成未来腺管系统的上皮性芽胚。3周后,受性激素的刺激,腺管系统进入脂肪垫并形成分支,称为终末芽胚,为乳腺导管生长的起始点,是一层由杯状细胞包绕的体细胞团。随着导管伸展和终末芽胚的发育,体细胞形成导管内部腔上皮层,而杯状细胞形成外部的肌上皮层。形成导管腔的过程中,体细胞通常会发生凋亡,而杯状细胞也会进入体细胞层,因此认为杯状细胞是干细胞的来源。成熟乳腺也可能存在具有干细胞功能的细胞。在啮齿动物,妊娠中会出现细胞迅速增殖,导致大量像葡萄串一样的分支和分泌泡形成。在分泌泡中,腔上皮产生乳汁,而肌上皮通过收缩将乳汁从分泌泡挤入导管。一旦断乳,这些结构通过凋亡而消失,像未妊娠一样,脂肪垫中的导管结构也变得相当稀疏。此循环在动物一生中经历多次。仅仅干细胞的增殖潜能可以维持上述过程;因此提示存在暂时性干细胞,受到性刺激之前,这些细胞处于静止状态。而且不完整的过程也见于动情周期中。相同的循环也见于人类的妊娠和月经周期中,但在增殖程度上存在一定差异。此外,乳腺日常的细胞更新过程中,成熟的乳腺干细胞(mammary stemcells,MaSCs)也可能发挥一定作用。因为在哺乳过程中,乳汁中存在脱落的上皮细胞。脱落进入导管系统的细胞必须以一些方式进行补充,否则上皮细胞的数目不能维持整体性;具有这种功能的细胞可能为具有持续活性干细胞。所以对成熟的乳腺上皮,干细胞至少具有明显不同的两种功能,即暂时性或持续性干细胞。虽然乳腺组织中存在干细胞,但目前尚缺乏特异性的乳腺干细胞标记物,许多学者应用了包括乳腺球培养、5-溴基-2-脱氧-尿苷(BrdU)标记法、细胞表面标记如干细胞抗原1(Sca-1)和CD49f、Hoechst染色等一系列方法来鉴定乳腺干细胞。特别是基于表面抗原的MaSCs的表型分析是研究干细胞生物学特点和有效选择MaSCs进行临床移植治疗的一个关键技术,目前MaSCs表面抗原的分析技术己广泛用于细胞亚群的分离,其中Sca-1分子是最常应用的MaSCs筛选标记。但是近几年来已有资料证实了Sca-1~--MaSCs的存在,Stingl等利用流式细胞术分选出的CD49f~+/Sca-1~(hi)乳腺上皮细胞在移植实验中并不会形成聚落,而CD49f~+/Sca-1~(low)在清洁脂肪垫中却有很强的重建能力,且具CD49f~+表型的乳腺上皮细胞,经培养后最终都会表达Sca-1,说明Scal~--MaSCs可能比Scal~+-MaSCs更为原始。Alvi等在研究乳腺侧群细胞(用Hoechst染料和流式细胞术进行造血干/祖细胞分离时发现了一群特殊细胞称为侧群细胞,它具有类似干细胞的自我更新和多向分化潜能,被认为是一种普遍的干细胞表型。)时发现,SP和non-SP有相近的克隆形成能力,尽管其所含的Sca-1~+细胞的比例有显着差异(15.8%Sca-1 in SP and1.8%Sca-1 in non-SP cells)。因此,很有必要寻找新的特异性更强的干细胞表面标记。一个新的抗原CD24引起了人们的关注,最近,Shackleton等各乳腺组织制成单细胞悬液,经流式细胞仪筛选出具有特殊表面标志的细胞并注入LacZ转基因小鼠体内,结果发现所有接种Lin~-CD29~(hi)CD24~+细胞的小鼠在10周内均形成明显的克隆。虽然有关的研究尚不甚深入,但其应用前景诱人。在小鼠和大鼠乳腺导管和腺泡中,存在一种形态特别的上皮细胞。光镜下这种细胞胞体较小,呈圆形,胞核强嗜碱性,圆形居中,核质比大,胞质含细胞器少,胞质透明,清亮,被称作小亮细胞,类似的亮细胞也见于人类乳腺中。目前普遍认为,此小亮细胞可能代表了MaSCs。我们以成体大鼠为模型,运用组织学、免疫组织化学和光镜检测技术,研究了成体大鼠乳腺组织的发育规律,以及周围组织的发生演变;成体大鼠乳腺组织中CD24阳性小亮细胞表达量和表达部位的变化,行Kruskal-Wallis检验法作组间比较,Nemenyi法行组间两两比较,取检验水准α=0.05。各部分实验结果如下:第一部分:成体大鼠乳腺不同发育时期的形态学研究HE染色方法观察3月龄未孕、孕13天、产后7天、产后21天四个时期的大鼠乳腺组织。实验结果显示,未孕3月龄和产后21天乳腺组织大都为结缔组织和脂肪组织,上皮性导管和腺泡很少,孤立或成簇地散在于脂肪或结缔组织中。位于腺泡或导管内,有一种胞体较小的小亮细胞,它们分布于乳腺导管及腺泡的基底膜上或肌上皮与腺上皮细胞之间。它们与相邻细胞分界明显,未见其暴露于管腔或腺泡腔面。孕13天和产后7天的乳腺上皮细胞在乳导管基质中广泛增殖,腺泡发育数量增多,腺上皮细胞胞体变大,在乳腺导管及腺泡中,可以更方便地观察到小亮细胞,甚至可找到由1—3个小亮细胞组成的细胞团紧贴于基底膜。第二部分:成体大鼠乳腺不同发育时期小亮细胞CD24的免疫组化研究及统计学分析免疫组化观察显示,在选取的四个时期(未孕3月龄、孕13天、产后7天、产后21天,分别对应乳腺组织的静止期、孕期、哺乳期、退化期)的乳腺组织中,无论在导管或是腺泡上皮中,均可见CD24阳性的小亮细胞,且在导管中的染色程度普遍高于腺泡。统计分析结果(A:未孕3月龄,B:孕13天,C:产后7天,D:产后21天):①Kruskal-Wallis法,χ~2=21.36,P＜0.005;②Nemenyi法,X~2_(A,B)=12.02,P＜0.05;X~2_(A,C)=12.53,P＜0.05;X~2_(A,D)=0.15,P＞0.05;X~2_(B,C)=0.03,P＞0.05;X~2_(B,D)=8.79,P＜0.05;X~2_(C,D)=9.29,P＜0.05。说明相比于静止期和退化期,CD24更多地表达于孕期和哺乳期的小亮细胞;静止期和退化期表达无显着性差异(P＞0.05);孕期和哺乳期表达也无显着性差异(P＞0.05)。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。