波形蛋白过表达质粒pcDNA3.1b-Vim的构建及鉴定

论文摘要

目的以波形蛋白（vimentin）基因为靶基因,构建波形蛋白过表达质粒pc DNA3.1b-Vim。方法在PC12H细胞中抽提RNA,进行逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）,得到c DNA,设计引物将目的基因扩增并进行胶回收,将空载质粒pc DNA3.1b与目的基因片段进行双酶切（分别为EcoRI/Xba I）、连接,构建重组过表达质粒,转化到Top10感受态细胞,经氨苄青霉素筛选挑取阳性克隆,扩大培养,提取质粒,凝胶电泳鉴定并进行测序分析。结果凝胶电泳鉴定及DNA测序分析显示重组质粒pc DNA3.1b-Vim构建成功。结论成功构建波形蛋白过表达质粒pc DNA3.1b-Vim,为研究波形蛋白的生物学功能打下基础。

论文目录

• 一、材料与方法
•   1. 材料:
•   2. 方法:
• 二、结果
•   1. PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳鉴定:
•   2. 目的基因片段通过PCR反应扩增并进行胶回收:
•   3. pcDNA3.
•   4. 重组质粒DNA测序鉴定:
• 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 邵晓婷,施倩雯,王凯旋

关键词: 波形蛋白,质粒

来源: 齐齐哈尔医学院学报 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 金华市中心医院小儿内科

基金: 浙江省科技计划项目(2015C37105)

分类号: Q78

页码: 1453-1455

总页数: 3

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