矿区废弃地植物重金属抗性内生真菌的筛选及ITS序列分析

矿区废弃地植物重金属抗性内生真菌的筛选及ITS序列分析

论文摘要

采集粤北凡口铅锌矿废弃地的优势植物醉鱼草(Buddleia lindleyana)、青葙(Celosia argentea)、苎麻(Boehmeria nivea)、艾草(Artemisia vulgaris)、苦楝(Melia azedarach)、类芦(Neyraudia reynaudiana),分别从其根部组织分离得到内生真菌92株.将这些菌株分别接种到Pb2+和Zn2+浓度为750 mg/L的马铃薯葡萄糖液体培养基(PDB)中进行摇瓶培养,通过称量培养得到的菌丝的干重来计算重金属耐受指数(TI),再比较各菌株的重金属耐受指数,筛选出19株具有抗性的菌株(TI≥50%),并对这些菌株进行形态鉴定和ITS序列分析,再构建它们的系统发育树进行分析.结果表明,这些重金属抗性菌株分属于曲霉属(Aspergillus)、镰刀霉属(Fusarium)、篮状菌属(Talaromyces)、微皮伞属(Marasmiellus)和木霉属(Trichoderma)共5个属.实验研究结果为探索内生真菌对矿区废弃地宿主植物的重金属耐受性提高和植被恢复及宿主植物的促生作用机理研究奠定一定的基础.

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 植物材料
  •     1.1.2 培养基
  •     1.1.3 药品及试剂
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 植物内生真菌的分离
  •     1.2.2 重金属抗性菌株筛选
  •     1.2.3 重金属抗性菌株的形态学鉴定
  •     1.2.4 重金属抗性菌株的ITS序列分析
  •       (1) 内生真菌基因组的提取
  •       (2) ITS序列PCR扩增
  •       (3) PCR回收纯化产物3’末端加碱基A
  •       (4) ITS序列体外重组及转化
  •       (5) 阳性克隆的筛选
  •       (6) 序列测定和系统发育树的构建
  • 2 结果与分析
  •   2.1 内生真菌的分离
  •   2.2 抗重金属内生真菌的筛选结果
  •   2.3 重金属抗性菌株的鉴定结果
  •     2.3.1 重金属抗性菌株的形态学鉴定
  •     2.3.2 重金属抗性菌株的分子生物学鉴定
  •   2.4 抗性菌株的ITS测序结果和构建系统发育树
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 曾松荣,吴景婷,张翠琼,柯野,郑秋桦

    关键词: 凡口铅锌矿废弃地,内生真菌,重金属抗性,序列分析

    来源: 韶关学院学报 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 社会科学Ⅱ辑,基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学,环境科学与资源利用

    单位: 韶关学院英东生命科学学院

    基金: 广东省自然科学基金项目(2016A030307047),韶关学院大学生创新创业训练计划省级项目(201710576030),韶关市科技创新资金项目(2014CX,K311)

    分类号: X172

    页码: 47-53

    总页数: 7

    文件大小: 1220K

    下载量: 127

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