河北省秦皇岛地区狐源肺炎克雷伯菌毒力与耐药检测及分析

论文摘要

研究目的:了解秦皇岛地区狐源肺炎克雷伯菌的血清型及毒力基因分布,分析及研究其耐药性与耐药基因之间的关系。研究方法:鉴定狐源63株肺炎克雷伯菌的7种血清型,PCR方法检测19种毒力基因携带分布情况。通过K-B药敏纸片法检测了63株狐源肺炎克雷伯菌对23种抗生素药物耐药性。用PCR方法对63株肺炎克雷伯菌进行43种耐药基因的携带情况检测。内容与结果:1.血清型及毒力基因检测:血清型检测63株狐源肺炎克雷伯菌中有K2型23株,占36.51%;K20血清型7株,占11.11%;30株菌株被确定血清型。毒力基因中ybtA、fimH和wabG的检出率最高,分别为95.24%、92.06%和92.06%;同时含3种及3种毒力基因以上的菌株占总菌株的98.41%。2.耐药性检测:63株狐源肺炎克雷伯菌对23种抗生素均产生不同程度的耐药,耐药率最高为100%,最低为4.76%;其中对磺胺间甲氧嘧啶钠、磺胺二甲氧嘧啶、替米考星和头孢拉丁耐药率最高,耐药率均为100%,对阿米卡星耐药率最低为4.76%;63株肺炎克雷伯菌对23种抗生素呈现多重耐药,多重耐药数主要集中在12-22之间,占多重耐药率的85.7%（54/63）,其中19种抗生素的多重耐药率最高,为22.22%（14/63）。3.耐药基因检测:43种耐药基因检测,其中31种被检测到,总检测率为72.1%（31/43）。其中,oqxA、gyrA、gyrB和parC的检出率最高均为100%。63株肺炎克雷伯菌分离菌株均含有多重耐药基因,其中含有10种和12种耐药基因的肺炎克雷伯菌分离菌株均为1株（1.59%,1/63）,含有9种和21种耐药基因的菌株均为2株（3.17%,2/63）,含有13种和15种耐药基因的菌株均为4株（6.35%,4/63）,含有19种和20种耐药基因的菌株均为6株（9.52%,6/63）,含有14、16、17、18种耐药基因的菌株分别为7株（11.11%,7/63）、10株（15.87%,10/63）、8株（12.70%,8/63）、12株（19.05%,12/63）。结论:63株致病性肺炎克雷伯菌分离菌株中以K2和K20血清型为主,检出的以铁载体毒力基因ybtA、受体毒力基因fimh、内毒素毒力基因wabG为主,普遍含有多重毒力基因。对23种抗生素耐药严重,多重耐药率和多重耐药基因携带率很高,耐药基因检出与耐药表型基本一致。

论文目录

• 缩略词
• 摘要
• abstract
• 第一章 文献综述
•   1.1 肺炎克雷伯菌研究进展
•     1.1.1 肺炎克雷伯菌研究背景
•     1.1.2 克雷伯菌的生物学特性
•     1.1.3 克雷伯菌血清型
•     1.1.4 克雷伯菌的毒力因子
•     1.1.5 克雷伯菌的耐药性
•     1.1.6 克雷伯菌的耐药机制
•   1.2 研究意义
• 第二章 肺炎克雷伯菌血清型鉴定与毒力基因检测
•   2.1 试验材料
•     2.1.1 试验菌株
•     2.1.2 主要仪器设备
•     2.1.3 主要试剂
•     2.1.4 引物设计
•   2.2 试验方法
•     2.2.1 菌种复苏
•     2.2.2 DNA模板制备
•     2.2.3 PCR扩增体系及程序
•   2.3 血清型鉴定与毒力基因检测结果
•     2.3.1 血清型鉴定结果
•     2.3.2 克雷伯菌毒力基因检测结果
•     2.3.3 克雷伯菌多重毒力基因携带情况
•   2.4 讨论
•   2.5 小结
• 第三章 肺炎克雷伯菌耐药性及耐药基因检测
•   3.1 试验材料
•     3.1.1 试验菌株
•     3.1.2 试验用材
•     3.1.3 主要试剂
•     3.1.4 引物设计与合成
•   3.2 试验方法
•     3.2.1 分离菌株的药物敏感性检测方法
•     3.2.2 药物敏感性结果判定标准
•     3.2.3 耐药基因检测
•   3.3 耐药性及耐药基因检测结果
•     3.3.1 耐药表型检测结果
•     3.3.2 多重耐药携带与分布
•     3.3.3 耐药基因的检测结果
•     3.3.4 多重耐药基因携带情况
•   3.4 讨论
•     3.4.1 耐药性检测结果分析
•     3.4.2 耐药基因检测结果分析
•     3.4.3 肺炎克雷伯菌耐药表型与基因型相关性分析
•   3.5 小结
• 总结
• 参考文献
• 发表论文
• 致谢

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 张文举

导师: 张香斋,王夕国

关键词: 肺炎克雷伯菌,血清型,毒力基因,耐药表型,耐药基因型

来源: 河北科技师范学院

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 河北科技师范学院

分类号: S852.61

总页数: 57

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