鸡毒支原体与鸡滑液囊支原体双重PCR检测方法的建立

论文摘要

为建立能同时检测鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum, MG）和鸡滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae,MS）的双重PCR诊断方法,该研究根据GenBank中登录的MG gapA基因序列和MS heat shock ATP-dependent protease基因序列,设计2对特异性引物,通过对PCR扩增条件的优化,建立了能够同时检测MG和MS的双重PCR诊断方法。特异性检测结果显示,该方法能够扩增出729 bp的MG和309 bp的MS特异性片段,对禽巴氏杆菌、大肠杆菌、鸡白痢沙门菌、副鸡禽杆菌核酸扩增均为阴性;敏感性检测结果显示,对MG和MS DNA的最低检出量均为5×10-2ng/μL;临床样品的检测结果显示,所建立的双重PCR方法可同时有效地检测出MG、MS混合感染和单独感染。该研究建立的鸡毒支原体与鸡滑液囊支原体双重PCR方法具有良好的特异性、敏感性、重复性,为快速、高效检测MG和MS提供了技术支持。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 菌种及DNA
•   1.2 主要试剂
•   1.3 引物设计与合成
•   1.4 细菌DNA的提取
•   1.5 单重PCR反应体系
•   1.6 双重PCR扩增条件的优化
•   1.7 双重PCR的特异性试验
•   1.8 双重PCR的敏感性试验
•   1.9 临床样品的检测
• 2 结果
•   2.1 单重PCR扩增结果
•   2.2 双重PCR反应条件的优化结果
•   2.3 双重PCR特异性试验结果
•   2.4 双重PCR灵敏性试验结果
•   2.5 临床样本检测
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨斌,朝洛门,陈志鹏,苏日娜,张月梅,宋越,萨娜,萨日盖,萨茹丽,赵世华

关键词: 鸡毒支原体,鸡滑液囊支原体,双重

来源: 畜牧与饲料科学 2019年02期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 内蒙古自治区农牧业科学院兽医研究所,内蒙古农业大学动物科学学院

基金: 国家重点研发计划项目(2016YFD0500800),内蒙古自治区自然科学基金项目[2016BS(LH)0301]

分类号: S852.62

DOI: 10.16003/j.cnki.issn1672-5190.2019.02.004

页码: 12-15

总页数: 4

文件大小: 355K

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