流式细胞计数论文_王文第,毛宝宏,王晶晶,刘月芬,王剑

导读:本文包含了流式细胞计数论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:细胞,流式,芽孢,乳酸菌,淋巴细胞,血小板,荧光。

流式细胞计数论文文献综述

王文第,毛宝宏,王晶晶,刘月芬,王剑[1](2019)在《流式细胞术建立甘肃地区学龄前汉族儿童外周血淋巴细胞亚群相对计数的正常参考值范围》一文中研究指出目的建立甘肃地区学龄前汉族儿童外周血淋巴细胞亚群相对计数的正常参考值范围。方法纳入2018年1月31日至2019年1月30日在甘肃省妇幼保健院(我院)行鞘膜积液、疝、血管瘤等手术或常规体检的0~7岁汉族健康儿童,排除患心脑血管疾病、血常规或肝肾功能异常、行淋巴细胞亚群检测前3周内存在感染、有先天性免疫缺陷疾病者。分为新生儿组、婴儿组、幼儿组和学龄前组。均采集静脉血2 mL(EDTA抗凝),于24 h内用四色荧光标记流式细胞术完成淋巴细胞亚群检测,以(P_(2.5),P_(97.5))作为各指标的正常参考值范围。结果①共792名儿童进入本文分析,男472名,女320名,新生儿组174名、婴儿组216名、幼儿组170名、学龄前组232名。②不同性别之间比较,新生儿组CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、B细胞、NK细胞百分比和CD4~+/CD8~+比值差异有统计学意义,婴儿组CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、B细胞百分比和CD4~+/CD8~+比值差异有统计学意义,学龄前组T细胞、CD4~+T细胞、B细胞、NK细胞百分比差异有统计学意义。③男、女各年龄组组间整体比较,淋巴细胞亚群百分比差异均有统计学意义。T细胞、CD4~+T细胞百分比随年龄增长呈降低趋势,男女童降低趋势相近;CD8~+T细胞百分比随年龄增长呈升高趋势,女童增高趋势更明显;B细胞百分比在1岁前呈上升趋势,后呈降低趋势,女童的变化趋势较为缓和;NK细胞的变化与B细胞相反,在1岁内降低,而后升高,男童变化趋势更明显。结论健康儿童淋巴细胞亚群的分布与地域、年龄段和性别有关。(本文来源于《中国循证儿科杂志》期刊2019年03期)

黎庆梅,梁彩云,江雪霞,高凯,麦惠霞[2](2019)在《应用流式细胞术进行血小板计数的探讨》一文中研究指出目的探讨流式细胞术(FCM)计数血小板的应用价值。方法用流式细胞术与电阻抗法计数血小板并与(参考方法)手工法进行比较。结果 3种方法计数血小板均有相关性(P<0.01),血小板计数在(1~300)×10~9/L相关系数>0.97,血小板计数在(1~100)×10~9/L较低范围时,相关系数(r)>0.95。与参考方法比较,血小板计数>100×10~9/L时2种方法的相关系数分别为0.98、0.97,血小板<100×10~9/L时,相关系数为0.95、0.86。结论 FCM计数血小板优于电阻抗法,特别对血小板减少症的患者。(本文来源于《实用医技杂志》期刊2019年04期)

崔爽[3](2019)在《用于循环肿瘤细胞分离分析与分型计数检测的光流控流式细胞术研究》一文中研究指出基于循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells,CTCs)的液体活检,因具有肿瘤分子信息全面、取样方便、侵入性小、无放射性污染、成本低等优势,而成为近年来肿瘤无创诊断和实时疗效监测研究的热点和前沿领域之一。CTCs是存在于外周血中各类肿瘤细胞的统称,循环肿瘤细胞通过血液循环到达其他器官和组织,它从肿瘤原始部位脱离、通过浸润周围组织而进入血液中,是肿瘤转移的重要途径。研究表明,在形成可见实体肿瘤之前CTCs就可能出现在血液中,循环肿瘤细胞的表型和数量与患者肿瘤的进展有密切的联系。因此,在癌症的不同阶段,对CTCs进行分型计数检测有助于癌症的分型诊断、预后评估和疗效监测。但是,由于CTCs在血液中的含量稀少,1 mL外周血中可能仅存在几至几十个CTC,却含有约10~7个白细胞和10~9个红细胞,使得许多传统的细胞分析手段显得不再适合。例如,流式细胞仪(FCM)检测一个样本需要耗时24小时,而自动数字显微镜(ADM)则难以对这类罕见细胞的有效数量进行筛查。目前,已发展的CTCs检测方法大多是利用偶联在磁珠或微流控芯片上的上皮细胞粘附分子(EpCAM)抗体捕获CTCs,然后用免疫荧光成像或逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对CTCs进行定性。有些方法根据肿瘤细胞与正常细胞在大小、密度等物理特性方面的差别,利用包括微孔过滤、密度梯度离心,以及基于微流控芯片的微结构过滤、惯性迁移、确定性侧向偏移等方法对CTCs进行分离,然后对收集的CTCs重新进行定性与计数。尽管这些方法代表了这一领域的重要进展,但对于极具生物和物理异质性的CTCs而言,其技术瓶颈依旧存在。首先,依赖于单一EpCAM抗体的捕获,造成EpCAM抗原缺失的CTCs不能被捕获,从而造成漏检。其次,尽管基于物理特性的分离方法具有操作相对简单、通量高、成本低、不依赖细胞表面标志物表达等优势,但受限于CTCs在物理特性上的异质性,这类方法往往会丢失尺寸小的CTCs,从而导致分离不完全且纯度不高。更为重要的是,目前这种分离和分析技术相互独立的CTCs检测方法,不仅自动化程度低、耗时长、步骤繁琐,而且在细胞转移、容器更换等环节极易造成样品的损失和污染,导致较大的系统误差。光流控(Optofluidics)作为一项将光学与微流控芯片相结合的新技术,可以将微流体/细胞操纵和光学检测等过程集合在一块芯片上完成,防止潜在的细胞污染,从而为未来的细胞分析提供一种多功能实验平台。迄今为止,光流控技术应用最广泛的领域是细胞捕获和分选。因此,发展灵敏、快速、并能提供CTCs分离分析与分型计数等功能的新型光流控检测技术,是当前CTCs液体活检研究的一个重要课题。本文将微流控、光学、电子和数据处理等技术相结合,发展了一种光流控流式细胞术,以自动、连续的方式实现了血液样品中CTCs的分离、3D聚焦、实时单细胞分析和分型计数等操作与敏感、高通量的检测。论文包括以下叁部分:第一章,绪论,首先介绍了循环肿瘤细胞检测的意义,然后介绍了循环肿瘤细胞检测以及光流控技术的研究进展,并提出了面临的关键科学问题与研究策略。第二章,针对目前缺乏灵敏、高通量的从外周血中分离分析与分型计数CTCs仪器的问题,搭建出一种集成多路注射泵、多级微流控芯片、多参数光学检测、数据处理与系统控制等模块的光流控流式细胞仪(Optofluidic Flow Cytometer,OFCM),并用数值模拟以及荧光微球混合液和添加到健康人血样中癌细胞的测试实验,考察了OFCM的性能。这为后续临床样本的应用研究打下了坚实的基础。第叁章,利用搭建的光流控流式细胞仪(OFCM),对15例Ⅳ期转移性乳腺癌患者和5例健康志愿者血液样品中的CTCs进行了分离分析与分型计数检测,并与CellSearch方法进行了比对。结果表明:基于OFCM的方法,具有灵敏、高通量等优点,可望为CTCs液体活检提供一种新装置与新方法。(本文来源于《山东师范大学》期刊2019-03-15)

刘恋[4](2018)在《流式细胞术在CD4淋巴细胞计数、肿瘤标志物检验中的应用效果》一文中研究指出目的综合分析流式细胞术在CD4淋巴细胞计数、肿瘤标志物检验中的应用效果。方法选取本院(在2016年1月至2017年1月)收治的77例肿瘤患者(均为肺癌患者)作为实验组,再选取同一阶段我院搜集的77例健康体检者作为对照组,两组研究对象均应用流式细胞术。采用SPSS 20.0统计学软件进行统计学分析两组研究对象的CD4淋巴细胞计数、肿瘤标志物(血清淀粉样蛋白A、癌胚抗原)。结果实验组CD4淋巴细胞计数为(310.25±200.02),对照组CD4淋巴细胞计数为(723.52±205.20),实验组CD4淋巴细胞计数显着高于对照组(P<0.05);实验组血清淀粉样蛋白A水平、癌胚抗原水平显着高于对照组(P<0.05)。结论流式细胞术检测肿瘤患者的CD4淋巴细胞计数、肿瘤标志物表达显着增高。(本文来源于《世界最新医学信息文摘》期刊2018年62期)

刘洋,姜凯,赵渝[5](2018)在《基于流式细胞术的乳酸菌快速计数方法研究》一文中研究指出本文采用流式细胞术(Flow Cytometric, FCM),通过SYTO?24和碘化丙锭(propidium iodide,PI)两种荧光染料染色后对29批次发酵剂、23批次发酵乳饮料和52批次发酵乳产品进行了计数,并与现行国标方法进行了对比,得出R2=0.8685,显示了两种方法具有较好的相关性,且流式方法重现性好,稳定性高,单个样品的上机检测时间不超过10分钟,且能够同时得出活菌和非活性细菌的数量,较平板法有很大的优势。(本文来源于《益生菌:技术及产业化——第十叁届益生菌与健康国际研讨会摘要集》期刊2018-05-22)

井楠,刘海峰,刘伟[6](2018)在《流式细胞术检测初治活动性肺结核患者血清T淋巴细胞亚群计数分析》一文中研究指出目的分析流式细胞术检测初治活动性肺结核患者血清T淋巴细胞亚群计数。方法回顾性选取2013年5月至2015年5月收治的初治活动性肺结核患者40例,将这些患者作为研究组,另选取同期收治的40名健康体检人员为对照组。运用流式细胞术检测两组人员的血清T淋巴细胞亚群计数,然后记录两组人员的血清T淋巴细胞亚群计数,并对研究组不同年龄、结核菌性质、病变累及肺野数、病变累及范围患者血清T淋巴细胞亚群计数进行统计分析。结果研究组患者的CD8~+显着高于对照组(P<0.05),CD4~+/CD8~+显着低于对照组(P<0.05);老年患者的血清CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+均显着低于青年、中年患者(P<0.05);病变累及4、5肺野患者血清CD3~+均显着低于1、2、3、6肺野(P<0.05),病变累及>3肺野患者的血清CD3~+显着低于≤3肺野患者(P<0.05)。结论采用流式细胞术对初治活动性肺结核患者血清T淋巴细胞亚群进行检测能够帮助临床了解细胞免疫功能,指导临床抗结核治疗,有助于对患者预后进行评估和判断,值得临床充分重视。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2018年07期)

姜凯[7](2018)在《基于流式细胞术的乳酸菌快速计数方法研究和活性判定》一文中研究指出对于发酵乳产品,国家出台了GB 19302-2010《食品安全国家标准发酵乳》来控制其质量与安全,对乳酸菌数做了明确的限量,即乳酸菌数要≥10~6CFU/m L(g)。对于乳酸菌的计数主要采用现行国标:GB 4789.35-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》,该方法采用MRS琼脂平板计数法对于乳酸菌进行计数,由于采用的培养法,存在涂布不均匀,工作量大,培养时间长,计数结果不稳定且只能计算活菌的缺点,所以目前需要一种能够快速、准确地对发酵乳产品中益生菌计数的方式。本文采用流式细胞术,通过SYTO?24和碘化丙锭(propidium iodide,PI)两种荧光染料染色后对发酵剂、发酵乳饮料和发酵乳中活菌和死菌的数量进行计数。第一部分选取了保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus,LB.)和嗜热链球菌(Streptococcus thermophiles,S.)作为研究对象,测定生长曲线明确其迟滞期分别为5小时和6小时,远高于流式检测所需的时间,在检测过程中细菌数量不会出现明显的增殖。第二部分,构建了流式细胞术的计数方法,明确了流式方法适用于细菌数量大于或等于10~5CFU/mL(g)的样品,在检测过程中样品的上样浓度应当控制在10~2-10~3cells/μL,通过正交分析,发现0.05mmol/mL的SYTO工作液和5μg/m L的PI,在37℃孵育3分钟,此为最佳的染色浓度和孵育时间。在流式分析过程中,对PI和SYTO检测通道的电压、荧光通道的阈值进行了优化,选择中速(30μL/min)检测180s作为实验条件能够检测LB.和S.培养液中的细菌数量。流式方法与平板计数法在10~3-10~8CFU/mL之间存在线性关系,在P<0.01时,两者不存在显着性差异。流式细胞术的灵敏度为10~2cells/μL,CV值在5%以内。第叁部分,通过不同的灭菌参数对乳酸菌进行灭活以获得非活性的对照菌液,最终选取70℃热烫10min作为实验条件。通过MoFlo XDP分选系统,将具有活性和非活性的细菌进行分选后,通过荧光显微镜进行验证,得到分选下来的活性细菌只具有绿色荧光,非活性细菌中有明显的红色荧光,对这两部分细菌进行MRS琼脂涂布计数,得到活菌数与流式结果一致,而非活性细菌平板无菌落形成,从而说明流式细胞仪对于细菌活性判定的准确性。第四部分,利用已构建的流式细胞术检测乳酸菌数量的方法,对11批次发酵剂、10批次发酵乳饮料和17批次发酵乳产品进行了检测,并与现行国标方法进行了对比。最终结果显示两种方法不存在显着性差异,且流式方法重现性好,单个样品的上机检测时间不超过5分钟,且能够分别得出活菌和非活性细菌的数量,较平板法有很大的优势。总之,本文构建了一种基于流式细胞术的乳酸菌快速计数方法,为流式细胞术在食品领域的应用奠定了理论基础。(本文来源于《上海师范大学》期刊2018-03-25)

杜建明[8](2018)在《实时荧光定量PCR法与尿液流式细胞仪UF-1000i尿液细菌计数的比较研究》一文中研究指出目的:应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法与尿液流式细胞仪UF-1000i两种方法对尿液细菌计数的基础性能进行比较研究,为临床快速诊断和治疗尿路感染提供可靠依据。方法:1.用紫外-可见分光光度法和麦氏比浊法对标准菌株ATCC27853(铜绿假单胞菌)和ATCC29212(粪肠球菌)进行细菌计数,比较两种方法的相关性以及吸光度和细菌浓度的关系。2.采用煮沸法、碱液煮沸裂解法,氯仿提取法对标准菌株ATCC27853(铜绿假单胞菌)和ATCC29212(粪肠球菌)进行细菌DNA提取,并应用FQ-PCR法进行扩增,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳比较分析。3.将标准菌株ATCC27853(铜绿假单胞菌)和ATCC29212(粪肠球菌)制成不同浓度菌悬液(活菌和死菌),应用FQ-PCR法和细菌培养两种方法对尿流式细胞仪UF-1000i尿液细菌计数进行性能评价。结果:1.在麦氏浊度0.4-0.8范围内,铜绿假单胞菌和粪肠球菌吸光度(625nm波长处)和麦氏浊度有良好的线性关系。铜绿假单胞菌、粪肠球菌浓度为108CFU时,在波长为625nm处的吸光度值分别为0.163和0.155,麦氏浊度二者都为0.5。2.叁种方法对铜绿假单胞菌DNA的提取效果相同;对粪肠球菌,煮沸法经PCR扩增未见对应的扩增产物,氯仿提取法和碱液煮沸裂解法提取DNA的效果相同。3.UF-1000i对两种菌检测的线性范围均在103-107CFU/ml,铜绿假单胞菌重复精密度CV在12.72%-19.46%之间,培养法为25.1%;粪肠球菌重复精密度CV在14.49%-15.57%之间,培养法为23.0%。UF-1000i和培养法对细菌计数测定无显着差异(p>0.05);FQ-PCR法对两种菌检测的线性范围均在106-1011CFU/ml之间,铜绿假单胞菌和粪肠球菌的重复精密度CV分别在11.38%-19.76%之间、12.86-23.28之间。FQ-PCR法和培养法对细菌计数测定无显着差异(p>0.05)。对死菌的检测,UF-1000i法检测铜绿假单胞菌和粪肠球菌的准确性分别为78.9%和94.7%;FQ-PCR法检测铜绿假单胞菌和粪肠球菌的准确性分别为81.5%和98.4%。培养法对两种菌检测的准确性为0%(不能培养出死菌)。结论:1.紫外-可见分光光度法可作为铜绿假单胞菌和粪肠球菌快速计数的方法。2.煮沸法、碱液煮沸裂解法,氯仿提取法叁种方法均可提取铜绿假单胞菌的DNA;碱液煮沸裂解法,氯仿提取法可提取粪肠球菌的DNA,且碱液煮沸裂解法可提取更低浓度菌的DNA,煮沸法不能提取粪肠球菌的DNA。3.UF-1000i对铜绿假单胞菌、粪肠球菌计数的性能稳定,精密度高于细菌培养法和FQ-PCR法;准确性和FQ-PCR法、细菌培养法无显着差异,且可以准确的对死菌计数。(本文来源于《山西医科大学》期刊2018-03-22)

王银环,钱凌,董芳华,李珏,陈敏[9](2018)在《流式细胞术和平板计数法用于地衣芽孢杆菌活菌制剂检测的比较研究》一文中研究指出目的考察流式细胞技术和平板计数法2种方法检测地衣芽孢杆菌活菌制剂(片剂、颗粒剂和胶囊剂)中芽孢数的不同。方法分别采用BD FACSMicro Count全自动微生物分析系统和平板计数法检测不同水浴温度及不同水浴时间处理过的地衣芽孢杆菌活菌胶囊中的芽孢数。同时采用上述2种方法检测3种地衣芽孢杆菌活菌制剂(片剂、颗粒剂和胶囊剂)中的活菌数、芽孢数和芽孢率。结果流式细胞技术和平板计数法对于检测不同水浴温度及不同水浴时间处理过的地衣芽孢杆菌活菌胶囊中的芽孢数无显着性差异。采用上述2种方法检测的3种地衣芽孢杆菌活菌制剂(片剂、颗粒剂和胶囊剂)中的活菌数、芽孢数和芽孢率的结果比较均无显着性差异。结论流式细胞技术和平板计数法对于3种地衣芽孢杆菌活菌制剂(片剂、颗粒剂和胶囊剂)检测活菌数、芽孢数和芽孢率无显着性差异。(本文来源于《中国现代应用药学》期刊2018年03期)

熊忠亮,乔军晶[10](2018)在《流式细胞仪在活体微藻计数中的应用》一文中研究指出通过对不同染色剂的不同浓度的不同微藻运用流式细胞仪计数方法,将其结果与用常规血球计数板计数结果比较,目的是探讨流式细胞仪计数的正确性与可靠性。结果:发现流式细胞仪的计数范围是1×10~2~1×10~6,较之公认的计数范围1×10~4~5×10~5要宽,且流式细胞仪计数在1×10~3~1×10~6的相对标准偏差(RSD)基本在2%左右,最大不超过5%。在1×10~2误差在15%左右。同时,实验还探讨了流式细胞仪对异弯藻和塔胞藻的混合悬液(n(A)∶n(B)=3∶1或1∶3)的计数。不管塔胞藻与异弯藻以何种比例混合,混合液的理论浓度与实际由流式细胞仪计数的浓度都很相近。而且两种不同混合藻液的相对标准偏差小于3%。结论是流式细胞仪对活体微藻计数结果是可靠的。(本文来源于《山东化工》期刊2018年01期)

流式细胞计数论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的探讨流式细胞术(FCM)计数血小板的应用价值。方法用流式细胞术与电阻抗法计数血小板并与(参考方法)手工法进行比较。结果 3种方法计数血小板均有相关性(P<0.01),血小板计数在(1~300)×10~9/L相关系数>0.97,血小板计数在(1~100)×10~9/L较低范围时,相关系数(r)>0.95。与参考方法比较,血小板计数>100×10~9/L时2种方法的相关系数分别为0.98、0.97,血小板<100×10~9/L时,相关系数为0.95、0.86。结论 FCM计数血小板优于电阻抗法,特别对血小板减少症的患者。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

流式细胞计数论文参考文献

[1].王文第,毛宝宏,王晶晶,刘月芬,王剑.流式细胞术建立甘肃地区学龄前汉族儿童外周血淋巴细胞亚群相对计数的正常参考值范围[J].中国循证儿科杂志.2019

[2].黎庆梅,梁彩云,江雪霞,高凯,麦惠霞.应用流式细胞术进行血小板计数的探讨[J].实用医技杂志.2019

[3].崔爽.用于循环肿瘤细胞分离分析与分型计数检测的光流控流式细胞术研究[D].山东师范大学.2019

[4].刘恋.流式细胞术在CD4淋巴细胞计数、肿瘤标志物检验中的应用效果[J].世界最新医学信息文摘.2018

[5].刘洋,姜凯,赵渝.基于流式细胞术的乳酸菌快速计数方法研究[C].益生菌:技术及产业化——第十叁届益生菌与健康国际研讨会摘要集.2018

[6].井楠,刘海峰,刘伟.流式细胞术检测初治活动性肺结核患者血清T淋巴细胞亚群计数分析[J].临床和实验医学杂志.2018

[7].姜凯.基于流式细胞术的乳酸菌快速计数方法研究和活性判定[D].上海师范大学.2018

[8].杜建明.实时荧光定量PCR法与尿液流式细胞仪UF-1000i尿液细菌计数的比较研究[D].山西医科大学.2018

[9].王银环,钱凌,董芳华,李珏,陈敏.流式细胞术和平板计数法用于地衣芽孢杆菌活菌制剂检测的比较研究[J].中国现代应用药学.2018

[10].熊忠亮,乔军晶.流式细胞仪在活体微藻计数中的应用[J].山东化工.2018

论文知识图

(a)HT1080细胞流式细胞计数阴性...。实验反正条件B疏水蛋白共展示酵母细胞表面酶蛋...高脂饮食及BVT.2733对C57BL/6J小鼠附睾...流式细胞计数2每组细胞的流式细胞计数结果(a...

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