白细胞介素-23通过Smad4调控间充质干细胞成骨分化的机制研究

白细胞介素-23通过Smad4调控间充质干细胞成骨分化的机制研究

论文摘要

目的研究白细胞介素23(interleukin-23,IL-23)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)成骨分化的作用,并探讨其机制。方法分离培养小鼠骨髓MSC,在IL-23刺激下进行成骨诱导分化,通过茜素红实验与碱性磷酸酶实验明确其成骨分化能力;通过全基因组表达谱芯片检测IL-23刺激下MSC成骨分化过程中的基因表达谱,筛选IL-23调控MSC成骨分化的关键基因,并通过荧光定量PCR加以验证;通过siRNA干扰关键基因Smad4表达,并用茜素红实验与碱性磷酸酶实验明确MSC成骨分化能力改变。结果在成骨诱导分化条件下,IL-23刺激的MSC茜素红实验与碱性磷酸酶实验结果均显著高于无IL-23刺激的对照组;全基因组表达谱芯片结果显示,IL-23刺激下MSC成骨分化过程中Smad4表达明显上调;siRNA干扰Smad4表达后,IL-23刺激引起的MSC成骨能力增强被明显抑制。结论 IL-23通过上调Smad4表达以促进MSC成骨分化。

论文目录

  • 材料与方法
  •   一、主要材料与仪器
  •   二、MSC体外分离、培养
  •   三、流式细胞术
  •   四、成骨分化诱导与刺激
  •   五、ALP活性测定
  •   六、茜素红染色与定量分析
  •   七、RNA提取与逆转录
  •   八、全基因组表达谱芯片
  •   九、荧光定量PCR
  •   十、siRNA干扰
  •   十一、统计学分析
  • 结果
  •   一、MSC的形态与表型鉴定
  •   二、IL-23促进MSC成骨分化
  •   三、IL-23上调Smad4表达
  •   四、干扰Smad4表达可以抑制IL-23促进MSC成骨分化
  • 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张放,孙怡芸,梁晓倩,杨爽

    关键词: 间充质干细胞,白细胞介素,成骨分化

    来源: 骨科 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 武警第一机动总队机动第一支队勤务保障大队卫生队,武警总医院病理科,武警陕西总队渭南支队勤务保障大队卫生队,武警重庆总队执勤第一支队勤务保障大队卫生队

    分类号: R329.2

    页码: 544-550

    总页数: 7

    文件大小: 3947K

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