山羊胎肝内人脐带间充质干细胞的存活与分化研究

论文摘要

目的观察人脐带间充质干细胞（hUCMSC）在胎羊肝脏内的存活与分化。方法妊娠2个月时在胎羊肝脏实质区注射绿色荧光蛋白（GFP）转染标记的hUCMSC（GFP-hUCMSC）,出生1月龄时取羔羊肝脏组织,制作切片后在荧光显微镜下观察GFP阳性细胞的分布,采用PCR方法检测人雄性性别决定基因（SRY）的存在; RT-PCR方法检测人肝细胞特异基因的表达;免疫组织化学染色检测人肝细胞特异蛋白的表达。注射同体积生理盐水的同月龄羔羊为对照。结果在注射了GFP-hUCMSC的1月龄羔羊肝脏组织中可观察到绿色荧光的规则或散在分布,并可检测到人SRY基因的存在。RT-PCR方法可检测到人肝细胞核因子4α（HNF4α）、肝细胞核因子3β（HNF3β）和白蛋白（ALB）基因的阳性表达;免疫组织化学染色可检测到人ALB和HNF4α蛋白的阳性表达,而对照羔羊肝脏检测不到绿色荧光阳性细胞和人SRY基因以及人肝细胞特异基因和蛋白的表达。结论 hUCMSC可以在胎羊肝脏内存活并分化为人肝细胞样细胞,并可在胎羊出生后至少持续一个月。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 主要材料
•     1.1.1 主要试剂
•     1.1.2 实验动物
•     1.1.3 人脐带组织
•     1.1.4 实验仪器
•   1.2 GFP转染标记hUCMSC的准备
•   1.3 胎肝内细胞定位注射
•   1.4 GFP阳性细胞的观察
•   1.5 人雄性性别决定基因（SRY）基因的检测
•   1.6 人肝细胞特异基因的检测
•   1.7 人肝细胞特异蛋白的检测
• 2 结果
•   2.1 GFP阳性细胞的观察
•   2.2 人SRY基因PCR扩增
•   2.3 人肝细胞特异基因在羔羊肝组织中表达
•   2.4 人肝细胞特异蛋白在羔羊肝脏中表达
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 鄢东海,黄小昆,向雪萍,卿德科,方伟,李自安,王强,王金祥,庞荣清

关键词: 人脐带间充质干细胞,山羊,肝细胞,分化

来源: 实验动物与比较医学 2019年05期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学

单位: 联勤保障部队第920医院干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室云南省干细胞工程实验室,昆明医科大学920医院临床学院

基金: 云南省重点项目(2015FA039),云南省面上项目(2017FB042),云南省后备人才项目(2018HB002)

分类号: Q25

页码: 364-370

总页数: 7

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