半定量逆转录聚合酶链反应论文_丁亚兴,田宏,孙静,雷玥,黄海涛

导读:本文包含了半定量逆转录聚合酶链反应论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:逆转录,定量,荧光,脊髓灰质炎,病毒,实时,肿瘤。

半定量逆转录聚合酶链反应论文文献综述

丁亚兴,田宏,孙静,雷玥,黄海涛[1](2015)在《评价荧光定量逆转录-聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验方法在麻疹监测中的价值》一文中研究指出目的评价荧光定量逆转录-聚合酶链反应(real-time RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法在麻疹病毒感染病例中的诊断价值。方法分析2014年天津市麻疹监测信息报告管理系统报告数据,运用χ~2检验(Chi-square Test)、配对Mc Nemar检验和效度分析,比较2种方法的判定价值。结果 171例麻疹疑似病例同时采集了血清和干血片标本,ELISA法检测两种标本IgM抗体阳性率分别为53.22%和49.71%,差异无统计学意义(χ~2=3.60,P=0.06),两种标本ELISA法检测一致率为94.15%。2 512例麻疹确诊病例中,2 439例采集了血标本,ELISA法检测IgM抗体阳性率为76.38%;871例采集了咽拭子,real-time RT-PCR检测核酸阳性率为86.68%。咽拭子采样间隔在3天内的real-time RT-PCR核酸阳性率达到91.14%,3天后的阳性率只有66.26%(χ~2=72.46,P<0.01)。血标本采样间隔在3天内的ELISA IgM抗体阳性率为71.47%,3天后达到94.14%(χ~2=118.06,P<0.01)。检验效度分析,ELISA方法灵敏度为71.60%,特异度为85.29%,约登指数为0.57。real-time RT-PCR方法灵敏度为99.60%,特异度为67.65%,约登指数为0.67。结论 real-time RT-PCR方法更敏感,适合发病早期诊断,ELISA方法更适合发病中后期诊断。(本文来源于《中国疫苗和免疫》期刊2015年06期)

唐海淑,崔惠,宁静,翟啸虎,甫尔哈提·吾守尔[2](2015)在《实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应在脊髓灰质炎病毒型内鉴定中的应用》一文中研究指出目的应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(rRT-PCR)对脊髓灰质炎病毒(PV)进行型内鉴定,为进行常规rRT-PCR型内鉴定方法奠定基础。方法采用世界卫生组织(WHO)推荐的rRT-PCR方法,对WHO发放的PV株和实验室分离的PV株进行型内鉴定(ITD)和疫苗衍生PV株(VDPV)筛选。结果 ITD rRT-PCR的实验结果与毒株的VP1编码区序列测定结果完全相符,VDPV rRT-PCR的结果与VP1编码区序列测定结果大部分相符,但有2株Ⅱ型脊髓灰质炎疫苗类似株(SL)PV2-SL被错判为非疫苗类似株(NSL),假阳性率为3.03%;1株Ⅲ型SL被错判为NSL,假阳性率为1.92%。结论在新疆脊髓灰质炎实验室rRT-PCR可以应用于脊髓灰质炎病毒的常规监测及型内鉴定。(本文来源于《疾病预防控制通报》期刊2015年02期)

姜红涛,姚秀林[3](2015)在《实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法与细胞培养法检测流行性感冒病毒的比较》一文中研究指出目的比较实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法与细胞培养法检测流行性感冒病毒的差异。方法采用实时荧光定量RT-PCR及经典的狗肾传代细胞病毒分离2种方法 ,同时对流感监测点送检的80份疑似流感标本检测流感病毒。结果细胞培养病毒分离的阳性数为26份,实时荧光定量RT-PCR的阳性数为36份,好=8.1,P<0.005。结论 通过该实验,验证了实时荧光定量RT-PCR的确快速敏感,适用于实验室快速诊断。(本文来源于《中外医疗》期刊2015年08期)

程民,沈国栋,卞庚,徐婷娟,徐维平[4](2014)在《人乳腺癌特异性基因1 mRNA实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测试剂盒的建立及应用》一文中研究指出目的建立人乳腺癌特异性基因1(BCSG1)mRNA实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)检测试剂盒,并评价其在乳腺癌循环肿瘤细胞检测中的应用价值。方法优化试剂盒中各组分的浓度、确定试剂盒的稳定性、灵敏度及特异性,并检测外周血样品中BCSG1 mRNA的表达水平。结果优化了试剂盒中的引物、探针,成功制备了定值标准品,通过设立阴、阳性质控品的方法,解决了试剂盒的特异性、灵敏性、准确性及质量控制等关键技术问题,特异度及准确性均为95%以上,灵敏度为100拷贝/ml(全血)。外周血标本中BCSG1 mRNA的检测结果为,12例临床确诊已转移的乳腺癌患者均为阳性,21例临床未确诊转移的乳腺癌患者中12例为阳性,其余9例为阴性,15例乳腺良性疾病患者、10例正常人均为阴性。结论建立的BCSG1 mRNA实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒具有很高的临床应用价值,可用于检测外周血样品中BCSG1mRNA的表达量,检测结果可作为乳腺癌患者诊疗过程中的重要监测指标。(本文来源于《中国临床保健杂志》期刊2014年01期)

张世婷,王晗,吕珀,薄芳,宋长江[5](2013)在《实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应型内鉴定脊髓灰质炎病毒方法的应用》一文中研究指出2011年新疆发生输入性脊灰野病毒的疫情后,为了缩短检测时限,中国决定从2013年起启用WHO推荐的《脊髓灰质炎病毒分离新的检测流程》,要求省级脊灰实验室经过培训考核,使用美国CDC研制的实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(本文来源于《中国公共卫生管理》期刊2013年06期)

陈玫,赵娜,郭玉,崔志强,张振国[6](2013)在《实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应脊灰型内鉴定新方法在脊灰实验室的应用》一文中研究指出目的在河北省脊髓灰质炎(脊灰)实验室首次应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,rRT-PCR)对脊灰病毒(PV)进行鉴定,并对该方法进行评估,为进行常规rRT-PCR型内鉴定方法做准备。方法采用世界卫生组织(WHO)推荐的rRT-PCR方法,对河北省既往分离的PV和WHO发放的PV株进行型内鉴定(intratypic differentiation,ITD)和疫苗衍生PV(vaccine-derived PV,VDPV)筛选。结果 ITD rRT-PCR的实验结果与毒株的VP1编码区序列测定结果完全相符,VDPV rRT-PCR的结果与VP1编码区序列测定结果不能完全相符,有2株Ⅱ型脊灰病毒被错判为NSL,假阳性率为6.9%(2/29)。结论 Real time PCR脊灰型内鉴定方法可以在河北省脊灰实验室用于脊灰病毒的常规监测。(本文来源于《实用预防医学》期刊2013年11期)

严冬梅,朱晖,安军静,王冬艳,祝双利[7](2010)在《实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应鉴定脊髓灰质炎病毒方法的评估》一文中研究指出目的在中国脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络[Poliovirus(PV)Laboratory Network,PLN]中,首次应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Real Time Fluorescent Quantitative Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,rRT-PCR)对PV进行鉴定,并对该方法进行应用评估。方法采用世界卫生组织(WHO)推荐的、美国疾病控制与预防中心研发的rRT-PCR法,对中国PLN既往分离的10株PV进行型内鉴定(Intratypic Differentiation,ITD)和疫苗衍生PV(Vaccine-derived PV,VDPVs)筛选,并将检测结果与毒株的VP1编码区核苷酸序列测定结果进行比较分析。结果10株PV rRT-PCR的结果与VP1编码区核苷酸序列测定结果不能完全相符,rRT-PCR无法鉴别10株PV中的5株Pre(前)-VDPVs,并且漏检了山西省2007年发现的1株Ⅰ型VDPV。结论作为WHO推荐使用的新型ITD方法,rRT-PCR法是否适用于中国PLN,还有待大样本PV rRT-PCR法的回顾性和前瞻性研究。(本文来源于《中国疫苗和免疫》期刊2010年02期)

王贺,司君利,张修振,亓玉琴,钮自宇[8](2010)在《实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测结肠癌中Syndecan-1 mRNA和HPA-1 mRNA的表达及临床意义》一文中研究指出背景与目的:侵袭转移是导致结肠癌死亡率增加的主要原因,如何阻断肿瘤的侵袭转移成为目前研究的热点。本研究旨在检测Syndecan-1基因和HPA-1基因在结肠癌组织中的表达水平,探讨二者与结肠癌侵袭转移及预后的关系。方法:用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测49例结肠癌、49例配对的癌旁组织(距癌2cm)和49例配对远离结肠癌的手术切缘正常组织(距癌5cm以上)的Syndecan-1和HPA-1基因的表达水平,分析二者与结肠癌临床病理特征的关系。结果:结肠癌中HPA-1mRNA的表达水平(40.56±11.75)显着高于癌旁组织(18.28±11.33)和正常组织(10.80±10.20)(P均<0.001),癌旁组织明显高于正常组织(P<0.05);正常结肠组织中Syndecan-1mRNA表达水平(61.21±12.96)显着高于癌旁组织(14.35±11.06)和结肠癌组织(10.12±8.58)(P均<0.001),癌旁组织明显高于结肠癌组织(P<0.05)。Syndecan-1mRNA的表达减弱和HPA-1的表达增强与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期显着相关(P均<0.05)。Spearman等级相关分析证明了Syndecan-1mRNA和HPA-1的表达呈明显负相关(r=-0.405,P<0.05)。结论:Syndecan-1mRNA在结肠癌组织中呈低表达,HPA-1mRNA在结肠癌组织中呈高表达,且Syndecan-1mRNA的表达减弱与HPA-1的表达增强可促进结肠癌的侵袭转移。联合检测Syndecan-1mRNA及HPA-1mRNA对于指导结肠癌临床治疗及判断预后有重要价值。(本文来源于《癌症》期刊2010年03期)

吴炳坤,项红梅[9](2009)在《荧光定量逆转录聚合酶链反应检测婴幼儿粪便A组轮状病毒》一文中研究指出目的建立一种快速、准确、定量检测A组轮状病毒方法。方法选择轮状病毒内壳蛋白基因作为A组轮状病毒的靶序列,设计合成引物和探针;与世界卫生组织(WHO)推荐的轮状病毒胶体金法平行检测,评价荧光定量逆转录聚合酶链反应(PCR)的敏感性与重复性。收集腹泻患儿粪便样本246份,并对其进行检测分析。结果采用荧光定量逆转录PCR检测A组轮状病毒的敏感性为1.0×101拷贝/μL;246份粪便样本中检出A组轮状病毒68例(27.64%);胶体金法检出A组轮状病毒抗原阳性48例(19.51%)。结论应用荧光定量逆转录PCR能够快速、准确检测A组轮状病毒,适合于大样本检测。(本文来源于《检验医学》期刊2009年05期)

张健珍,张春兰,胡赋,易俊卿,陈厚志[10](2008)在《实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞MMP-1及TIMP-1基因的表达》一文中研究指出目的:应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)内基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)基因的表达。方法:提取 PBMC 总 RNA 并逆转录为 cDNA,采用 FQ-RT-PCR 方法分别检测37例慢性乙型肝炎患者及20例正常对照的 PBMC 内 MMP-1及 TIMP-1mRNA 的表达水平,同时37例慢性乙型肝炎患者均行肝穿刺活检,病理组织进行纤维化程度分期(S)。结果:正常对照组 PBMC 内存在 MMP-1mRNA 及 TIMP-1mRNA 的表达,慢性乙型肝炎患者 PBMC 内 MMP-1mRNA 表达水平与正常对照组比较无统计学差异,而 TIMP-1mRNA 表达水平显着高于正常对照组;随着慢乙肝肝纤维化程度加深,各期之间 MMP-1mRNA 的表达水平无统计学差异(X~2 =8.960,df=4,P=0.111);而 TIMP-1mRNA 表达水平逐渐升高,且 TIMP1-mRNA/MMP-1mRNA 比值逐渐升高, 各期之间 TIMP-1mRNA 的表达水平及 TIMP1-mRNA/MMP-1mRNA 比值有统计学差异(分别为 X~2=14.2908, df=4,P=0.002;X~2=12.209,df=4,P=0.007)。结论:外周血 PBMC 内 MMP-1mRNA 表达水平与肝纤维化程度无明显相关性,而 TIMP-1mRNA 的表达水平与肝脏纤维化程度密切相关,PBMC 内 TIMP1-mRNA 水平及 TIMP1-mRNA/MMP-1mRNA 比值可以作为诊断肝纤维化的新指标;但能否作为早期诊断的敏感指标,仍需要临床大量试验证实。(本文来源于《第十七次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编》期刊2008-09-01)

半定量逆转录聚合酶链反应论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(rRT-PCR)对脊髓灰质炎病毒(PV)进行型内鉴定,为进行常规rRT-PCR型内鉴定方法奠定基础。方法采用世界卫生组织(WHO)推荐的rRT-PCR方法,对WHO发放的PV株和实验室分离的PV株进行型内鉴定(ITD)和疫苗衍生PV株(VDPV)筛选。结果 ITD rRT-PCR的实验结果与毒株的VP1编码区序列测定结果完全相符,VDPV rRT-PCR的结果与VP1编码区序列测定结果大部分相符,但有2株Ⅱ型脊髓灰质炎疫苗类似株(SL)PV2-SL被错判为非疫苗类似株(NSL),假阳性率为3.03%;1株Ⅲ型SL被错判为NSL,假阳性率为1.92%。结论在新疆脊髓灰质炎实验室rRT-PCR可以应用于脊髓灰质炎病毒的常规监测及型内鉴定。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

半定量逆转录聚合酶链反应论文参考文献

[1].丁亚兴,田宏,孙静,雷玥,黄海涛.评价荧光定量逆转录-聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验方法在麻疹监测中的价值[J].中国疫苗和免疫.2015

[2].唐海淑,崔惠,宁静,翟啸虎,甫尔哈提·吾守尔.实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应在脊髓灰质炎病毒型内鉴定中的应用[J].疾病预防控制通报.2015

[3].姜红涛,姚秀林.实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法与细胞培养法检测流行性感冒病毒的比较[J].中外医疗.2015

[4].程民,沈国栋,卞庚,徐婷娟,徐维平.人乳腺癌特异性基因1mRNA实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测试剂盒的建立及应用[J].中国临床保健杂志.2014

[5].张世婷,王晗,吕珀,薄芳,宋长江.实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应型内鉴定脊髓灰质炎病毒方法的应用[J].中国公共卫生管理.2013

[6].陈玫,赵娜,郭玉,崔志强,张振国.实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应脊灰型内鉴定新方法在脊灰实验室的应用[J].实用预防医学.2013

[7].严冬梅,朱晖,安军静,王冬艳,祝双利.实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应鉴定脊髓灰质炎病毒方法的评估[J].中国疫苗和免疫.2010

[8].王贺,司君利,张修振,亓玉琴,钮自宇.实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测结肠癌中Syndecan-1mRNA和HPA-1mRNA的表达及临床意义[J].癌症.2010

[9].吴炳坤,项红梅.荧光定量逆转录聚合酶链反应检测婴幼儿粪便A组轮状病毒[J].检验医学.2009

[10].张健珍,张春兰,胡赋,易俊卿,陈厚志.实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞MMP-1及TIMP-1基因的表达[C].第十七次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编.2008

论文知识图

一1RNA完整性鉴定1例32岁孕8周孕妇的自然流产胚胎绒毛...1例27岁孕6周孕妇的自然流产胚胎绒毛...整合素p3mRNA电泳图光合作用反应过程及限制因子Fig.5.1T...和β-actin1%琼...

标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

半定量逆转录聚合酶链反应论文_丁亚兴,田宏,孙静,雷玥,黄海涛
下载Doc文档

猜你喜欢