导读:本文包含了透明质酸分解酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,透明质酸,链球菌,分解,载体,部位,皮肤。
透明质酸分解酶论文文献综述
崔亚娜[1]（2010）在《兽疫链球菌透明质酸分解酶基因的敲除》一文中研究指出透明质酸(hyaluronic acid,HA)是一种高分子聚合物,由葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡萄糖胺以β-1,3和β-1,4糖苷键相连的二糖单位重复构建而成。由于特殊的生理作用、独特的流变学特性和极强的持水保湿能力,透明质酸在化妆品工业、医学研究、临床治疗等领域有广泛的应用。目前,透明质酸的生产逐渐由动物组织提取法转向微生物发酵法。然而,现有发酵所采用的链球菌大多数既产HA,也产透明质酸分解酶(Hyaluronate Lyase,简称Hyl) ,这导致了HA发酵的产率低分子量也比较小。因此,选育Hyl缺陷型菌株是HA高产菌株选育过程中极重要的一步。近年来,随着一些透明质酸分解酶基因(Hyl)序列的报道,根据基因工程原理利用基因敲除的方法获得Hyl缺陷型菌株,越来越被人们重视。本研究即根据GenBank中公布的兽疫链球菌Hyl基因序列设计引物,扩增获得了整个基因序列,然后将其克隆到载体pBR322上,经测序及序列比对,该片段与GenBank中公布的Hyl基因序列同源性达98%。根据出发菌的Hyl基因序列设计引物扩增获得了部分透明质酸分解酶基因(Hyl-1)。然后将其克隆到载体pMD19-T上,再以质粒pUC19为模板,PCR扩增得到氨苄青霉素抗性基因,通过反向PCR将其插入Hyl-1基因的中部,得到基因敲除载体pMD19T-SA。该载体与质粒pBR322分别用EcoR I、Pst I双酶切后进行连接,得到基因敲除载体pBR322-SA,经PCR及限制性酶切分析,两种敲除载体均与设计结果相符。分别用线性化与非线性化的改造质粒转化兽疫链球菌感受态细胞,用氨苄青霉素抗性平板进行初筛,通过转化子对抗生素耐受性实验,氨苄青霉素浓度确定为4μg/mL,结果共获得85个明显的单菌落。将其分别在不含抗生素的液体和固体培养基中重复转接和培养6次后,再通过氨苄青霉素抗性平板筛选,结果获得2株阳性转化子。进一步对阳性转化子进行PCR验证及酶活测定,2株转化子的酶活分别为2.1U与1.2U,均低于原出发菌株的48.0U水平。结果表明本研究最终得到2株由Hyl基因失活导致透明质酸分解酶活力下降的重组菌。本文为利用基因工程手段获得可应用于工业生产的兽疫链球菌提供了研究方向。为进一步利用微生物发酵法生产HA,提高HA产量及分子量打下了基础。(本文来源于《河北农业大学》期刊2010-06-15）
崔亚娜,苏旭东,王羽,马晓燕,王雪静[2]（2009）在《兽疫链球菌透明质酸分解酶基因的敲除》一文中研究指出以透明质酸分解酶基因(Hyl)为改造目标,利用同源重组技术获得Hyl基因敲除的重组菌。首先以兽疫链球菌的基因组DNA为模板扩增出部分透明质酸分解酶基因(Hyl-1),然后将其克隆到载体pMD19-T上,再以质粒pUC19为模板,PCR扩增得到氨苄青霉素抗性基因,通过反向PCR将其插入Hyl-1基因的中部,得到基因敲除载体pMD19T-SA。该载体与质粒pBR322分别用EcoRⅠ、PstⅠ双酶切后进行连接,得到基因敲除的重组载体pBR322-SA,PCR及限制性酶切分析,构建的敲除载体与设计结果相符。最后,利用这两种敲除载体通过同源重组技术得到一株重组菌,经PCR及酶活鉴定,这株菌的Hyl基因已缺失。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2009年12期）
黄艳[3]（2004）在《一株透明质酸生产菌的鉴定及其透明质酸分解酶基因的克隆和鉴定》一文中研究指出本研究首先对本室保藏的一株透明质酸生产菌GXH-1进行生理生化特性鉴定，结果发现细胞干重和HA得率的最佳pH值、培养温度、培养时间分别是pH=6.5、37℃、48hr。克隆了GXH-1的16SrDNA并测序，经在Gene-Bank中进行Blast分析，结果是该序列与Streptococcus equi subsp zooepidemicus的16SrDNA同源性达到100％(gi|28849227|dbj|AB104843)。 根据透明质酸分解酶的同源性分析，在Streptococcus equi的全序列里分析出一个约2.6Kb的ORF，这个ORF可能是透明质酸分解酶的序列。根据此ORF的序列，设计出一对引物，以GXH-1的总DNA为模板，PCR扩增了一个约2.6kb的开放阅读框。测序的结果是此ORF与Gene-Bank中已公布的Streptococcus equi的2.6Kb的ORF的氨基酸同源性达99％。将此ORF连接入质粒pSE-380中，并在大肠杆菌JM109和BL21中表达。SDS-PAGE分析表明：有分子量约为97.5kD的目标条带，在BL21中表达强于在JM109的表达。采用了Morgan-Elson反应做了透明质酸分解酶活力测定，检测到透明质酸分解酶活力。 本研究还构建了透明质酸分解酶基因的置换型同源重组质粒、石.、﹄毖、派、PGEM一3zf(+)一hy卜alnP，期望利用hyl一alnP双链片断实现与菌株染色体上的基因同源重组，获得透明质酸分解酶缺失的突变子。(本文来源于《广西大学》期刊2004-05-01）
黄汉生[4]（1997）在《抑制透明质酸分解的化妆品成分》一文中研究指出抑制透明质酸分解的化妆品成分２２（总２７８）日本资生堂公司和Ｓｕｎｔｏｒｙ公司已联合开发成功的一种防止透明质酸分解、保持皮肤理想湿润状态的化妆品成分。这种新原料是一种中国植物浓香悬钩子（ＲｕｂｕｓＳｕａｖｉｓｍｕｓ）萃取物中所含的香精，与传统的仅仅保...(本文来源于《日用化学品科学》期刊1997年06期）
透明质酸分解酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以透明质酸分解酶基因(Hyl)为改造目标,利用同源重组技术获得Hyl基因敲除的重组菌。首先以兽疫链球菌的基因组DNA为模板扩增出部分透明质酸分解酶基因(Hyl-1),然后将其克隆到载体pMD19-T上,再以质粒pUC19为模板,PCR扩增得到氨苄青霉素抗性基因,通过反向PCR将其插入Hyl-1基因的中部,得到基因敲除载体pMD19T-SA。该载体与质粒pBR322分别用EcoRⅠ、PstⅠ双酶切后进行连接,得到基因敲除的重组载体pBR322-SA,PCR及限制性酶切分析,构建的敲除载体与设计结果相符。最后,利用这两种敲除载体通过同源重组技术得到一株重组菌,经PCR及酶活鉴定,这株菌的Hyl基因已缺失。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
透明质酸分解酶论文参考文献
[1].崔亚娜.兽疫链球菌透明质酸分解酶基因的敲除[D].河北农业大学.2010
[2].崔亚娜,苏旭东,王羽,马晓燕,王雪静.兽疫链球菌透明质酸分解酶基因的敲除[J].中国生物工程杂志.2009
[3].黄艳.一株透明质酸生产菌的鉴定及其透明质酸分解酶基因的克隆和鉴定[D].广西大学.2004
[4].黄汉生.抑制透明质酸分解的化妆品成分[J].日用化学品科学.1997
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