导读:本文包含了质粒载体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:质粒,载体,基因,肿瘤,蛋白,细胞,幽门。
质粒载体论文文献综述
元佩燕,陈蕾,徐帅妹,童方丽,徐平平[1]（2019）在《构建环状RNA mmu＿circ＿Rab11a质粒载体并转染293T细胞》一文中研究指出背景:研究发现Rab11a在细胞自噬、增殖过程中发挥重要作用。由于circ RNA可通过调控亲本基因的表达参与生物学过程的调控,因此,mmu_circ_Rab11a是否同样在细胞自噬、增殖过程中发挥重要作用值得关注。目的:探讨环状RNA mmu_circ_Rab11a质粒载体构建并转染293T细胞的可行性。方法:构建PLC5+mmu_circ_Rab11a过表达质粒载体,采用PCR、基因测序等方法对重组质粒进行验证鉴定。利用脂质体Lipofectamine3000转染试剂将mmu_circ_Rab11a过表达载体瞬时转染至293T细胞中。利用RT-PCR检测对照组、空载组(p LC5-ciR)及mmu_circ_Rab11a过表达组中mmu_circ_Rab11a的基因表达情况并对PCR产物进行Sanger测序验证。mmu_circ_Rab11a过表达质粒载体转染MC3T3,CCK8检测细胞增殖能力。结果与结论:实验成功构建了mmu_Circ_Rab11a过表达载体,可促使293T细胞高效转染mmu_circ_Rab11a。过表达mmu_circ_Rab11a可提高MC3T3细胞的增殖能力。提示可利用基因工程技术构建mmu_circ_Rab11a过表达载体,通过脂质体法转染法转染293T细胞,使其高效转录mmu_circ_Rab11a,为进一步研究mmu_circ_Rab11a的生物功能奠定实验基础。可通过调控mmu_circ_Rab11a的表达影响MC3T3细胞的增殖能力。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年33期）
蔡春梅,范思均,梁歌,姜严明,冯婧[2]（2018）在《质粒载体介导的短发夹RNA对RPE细胞转染效率及毒性研究》一文中研究指出目的连接针对人血管内皮生长因子(VEGF)设计的短发夹RNA与质粒载体,并转染视网膜色素上皮(RPE)细胞,观察其转染效率及对细胞的毒性。方法设计针对人VEGF的短发夹RNA(shRNAs,V1,V2),V3为阴性对照即不含特异性shRNA,其表达载体为pGCSilencer~(TM)/U6/Neo/GFP/VEGF RNAi。用Lipofectamine~(TM) 2000转染RPE细胞,用倒置荧光显微镜及流式细胞仪观察其转染效率;用MTT法观察其对细胞的毒性。结果质粒载体介导的GFP在细胞中的表达呈黄绿色,弥漫于整个胞浆和胞核,转染后24h GFP开始表达,转染后48h表达明显增强。流式细胞仪检测质粒pGCSilencer~(TM)/U6/Neo/GFP/VEGF RNAi对体外培养的RPE细胞转染效率为43.9%,质粒转染后MTT法测定细胞活性的OD值与对照组相比明显降低(P=0.004)。结论质粒pGCSilencerTM/U6/Neo/GFP/VEGF RNAi可以有效地转染体外培养的RPE细胞,但质粒转染对细胞有明显的毒性。(本文来源于《解剖科学进展》期刊2018年06期）
李康佳[3]（2017）在《水稻条斑病菌内源质粒分析与穿梭质粒载体的构建》一文中研究指出细菌质粒是独立于染色体外可自主复制的遗传物质,大多为环状双链DNA分子。质粒上往往携带有抗生素抗性、重金属抗逆性及功能蛋白分泌系统等功能相关基因,可帮助宿主菌适应生存环境;而质粒的自主复制与转移能力又使其具备作为基因工程载体的潜力。基因工程载体在黄单胞菌的致病机理研究及黄原胶、胞外蛋白酶的合成研究中均有着至关重要的作用。本研究以水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzcola,Xoc)为研究对象,基于水稻条斑病菌中首个被发现的内源质粒pXOCgx01的序列信息,开展了质粒普查分析和基因工程载体的构建工作。1.在257株来自全国不同地区的分离株中共普查得到9种质粒,分别命名为 pXOCgx02、pXOCB116、pXOCB209、pXOCB216、pXOCB220、pXOCB409、pXOC709、pXOC820 和 pXOC905。对普查到的质粒进行功能鉴定,结果发现:pXOCB209可能具有重金属抗逆性、转座基因及IV型分泌系统,pXOCgx02和pXOC905可能具有IV型分泌系统,pXOCB116、pXOCB216和pXOCB220可能携带转座基因,而pXOCB409、pXOC709与pXOC820上未检测到重金属抗逆性、转座及IV型分泌系统相关功能基因。这表明Xoc的内源质粒各有不同的功能结构,但部分功能上仍具有一定的相似性。2.目前,在黄单胞菌中常用的基因工程载体均不是由黄单胞菌属细菌的质粒改造而成,不能充分满足黄单胞菌功能基因组学发展的需要。本研究通过对质粒pXOCgx01的序列分析,为构建适于黄单胞菌的基因工程载体对pXOCgx01进行了一系列改造:通过剪切重组去除原始质粒上可能与质粒复制无关的序列,引入抗性筛选标记、多克隆位点和复制起始位点oriVpMB1、oriV等质粒载体必备功能基因。由53 kb的原始质粒pXOCgx01构建得到两个约11.6 kb的穿梭质粒载体pXUG和pXUK,大大减小质粒载体自身分子量。其中,pXUG具有庆大霉素抗性,pXUK具有卡那霉素抗性。在此基础上,分别用pXUG对Xoc GX01的胞外多糖缺陷型菌株进行互补,用pXUK对Xoc GX01的胞外蛋白酶缺陷型菌株进行互补,结果表明:两个穿梭质粒载体均可将缺陷型的表型补回野生型水平。对pXUG和pXUK的稳定性进行验证,检测证实:穿梭质粒载体pXUG和pXUK均可在大肠杆菌和稻黄单胞菌中稳定复制、有效表达,且几乎不影响菌株自身表型。综上所述,本研究通过Xoc中国分离株中质粒的普查、序列分析、功能调查、质粒改造,为Xoc内源质粒的研究提供了丰富的材料;同时,本研究首次以Xoc内源质粒为骨架构建得到两个可在大肠杆菌和稻黄单胞菌中应用的载体pXUG和pXUK,大大简化黄单胞菌基因功能研究的传统流程,为黄单胞菌中高效分子工具的研究打下基础。(本文来源于《广西大学》期刊2017-06-01）
冯城婷[4]（2017）在《MGMT干扰质粒载体的构建及其对奥沙利铂抗肝癌细胞作用的影响》一文中研究指出目的:构建MGMT干扰质粒载体,并探讨其对奥沙利铂抗肝癌细胞作用的影响。方法:1、通过RNA干扰技术构建MGMT干扰质粒载体,通过质粒测序和PCR菌检鉴定质粒,获得干扰载体pENTR-U6-shRNA1-GFP和pENTR-U6-shRNA2-GFP。2、将细胞分为4组:空白对照组即未转染质粒的smmc-7721细胞KB组,转染pENTR-U6-shRNA1-GFP的smmc-7721细胞shRNA1组,转染pENTR-U6-shRNA2-GFP的smmc-7721细胞shRNA2组,转染阴性对照组质粒的smmc-7721细胞NC组,荧光显微镜观察转染效果,通过Realtime-PCR检测质粒转染smmc-7721细胞前后MGMT mRNA的表达水平,验证MGMT shRNA的干扰效果。3、以浓度2μg/mL,4μg/mL,8μg/m L,16μg/m L,32μg/mL,64μg/m L,128μg/m L,256μg/mL的奥沙利铂处理上述4组肝癌细胞48小时,MTT法计算各组smmc-7721的IC_(50),对比转染前后smmc-7721的IC_(50),评估MGMT干扰质粒载体对奥沙利铂抗肝癌细胞作用的影响。4、采用SPSS软件进行统计学分析。结果:1、经酶切鉴定、基因测序及PCR菌检验证,MGMT基因的RNAi质粒载体的目的序列与设计序列完全一致,成功构建pENTR-U6-shRNA-GFP干扰质粒;2、将质粒转染smmc-7721细胞,经荧光显微镜观察,转染pENTR-U6-shRNA1-GFP的smmc-7721细胞shRNA1组,转染pENTR-U6-shRNA2-GFP的smmc-7721细胞shRNA2组,转染阴性对照组质粒的smmc-7721细胞NC组,均有绿色荧光出现,干扰质粒成功转染到肝癌细胞中;Realtime PCR结果显示shRNA1和shRNA2均有干扰效率分别为56%和63%;3、实验组细胞中,shRNA1组的IC_(50)为2.31μg/mL、shRNA2组为1.98μg/mL,与对照组(NC组为5.00μg/mL、KB组为6.17μg/mL)细胞的IC_(50)相比明显降低(P_1<0.05,P_2<0.05,P_3<0.05,P_4<0.05)。结论:本实验成功构建MGMT干扰质粒载体,转染肝癌细胞smmc-7721后可有效地使MGMT基因mRNA水平表达明显降低,同时降低转染后smmc-7721细胞奥沙利铂的IC_(50),为探讨MGMT干扰载体在促进奥沙利铂杀伤肝癌细胞的分子机制及揭示MGMT与肝癌的关系提供了研究工具,奠定了技术基础。(本文来源于《苏州大学》期刊2017-05-01）
王强,潘丽红,吕丹,朱慧芬[5]（2017）在《共沉默Birc5和Hspa5的双干扰siRNA质粒载体构建及鉴定》一文中研究指出目的构建共沉默Birc5和Hspa5的双干扰siRNA质粒,为进一步以Birc5和Hspa5作为肿瘤生物治疗靶点研究提供基础。方法使用Ambion Target Finder设计Birc5和Hspa5mRNA的干扰序列;挑取酶切鉴定正确的质粒转化菌液Birc5-siRNA和Hspa5-siRNA测序鉴定;采用分子克隆技术构建特异性沉默Birc5和Hspa5的双干扰siRNA质粒,命名为pgsiRNA-Birc5+Hspa5,酶切鉴定;将pgsiRNA-Birc5+Hspa5转染HepG2细胞48h后采用Real-time PCR检测Birc5和Hspa5的mRNA表达水平。结果经酶切鉴定正确的质粒转化菌液Birc5-siRNA和Hspa5-siRNA测序结果显示均为插入正确的克隆质粒;经酶切鉴定分析显示pgsiRNA-Birc5+Hspa5符合酶切鉴定结果;转染pgsiRNA-Birc5+Hspa5 48h后HepG2细胞Birc5和Hspa5mRNA表达均显着下降,未转染组Birc5和Hspa5mRNA的相对表达量均为1.0,pgsiRNA-Birc5+Hspa5组Birc5为0.15(P<0.05),Hspa5为0.37(P<0.05),表明双干扰载体构建成功。结论成功构建了Birc5和Hspa5双干扰siRNA质粒,为进一步同时靶向沉默肿瘤Birc5和Hspa5基因研究提供了工具和基础。(本文来源于《华中科技大学学报(医学版)》期刊2017年02期）
季晓飞,赵慧琳,张莹,柏雪莲,张艳丽[6]（2016）在《基因敲除质粒载体的构建及其在幽门螺杆菌基因敲除中的应用》一文中研究指出目的构建用于幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)同源重组双交换基因敲除的质粒载体,实现Hp内基因的快速敲除。方法以质粒pLYL03为骨架,重新排列质粒上的基因元件以减少冗余序列,用卡那霉素抗性基因(aphA)替换原质粒上的红霉素抗性基因作为抗性筛选标记,在抗性筛选标记两端构建多克隆位点用于同源重组同源臂的插入,由此构建用于Hp同源重组双交换基因敲除的质粒载体pSJHK。以质粒pSJHK为载体构建hp0169基因的同源重组双交换敲除质粒pSJHK-0169,通过电击转化方法将敲除质粒pSJHK-0169转入Hp中,用卡那霉素筛选转化子。结果以质粒pLYL03为基础构建用于Hp同源重组双交换基因敲除的质粒载体pSJHK,大小4 371bp。以基因hp0169作为目标基因构建同源重组双交换敲除质粒pSJHK-0169,经电击转化Hp中,获得卡那霉素抗性阳性转化子,测序确证基因敲除成功。结论构建的基因敲除质粒载体pSJHK实现了对Hp中目标基因的敲除,为Hp新基因功能研究和致病因子的发掘提供了有效的基因操作工具。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2016年12期）
王鹏,苗军,方成,胡永成,陈晓鹏[7]（2016）在《可调控BMP-2表达的单质粒载体构建及其在ADSCs中的表达研究》一文中研究指出目的:拟构建可调控骨形态发生蛋白(BMP-2)表达的单质粒慢病毒表达载体,为研究骨修复过程中的成骨性能打下基础。方法:通过基因重组技术获取含BMP-2的慢病毒表达载体,通过菌落PCR和基因测序鉴定;将慢病毒表达载体与包装载体p MD2.G和p SPAX在293T细胞中包装,收集病毒液,转染大鼠脂肪基质干细胞(ADSCs)。首先,从细胞形态学和MTT来初步分析诱导剂多西环素(Dox)不同浓度对ADSCs活性的影响;其次,缩小Dox浓度范围,在荧光显微镜下通过荧光表达强度判断Dox对ADSCs中基因表达的诱导效率,相同条件下,q RT-PCR分析BMP-2的m RNA的相对表达量,进一步优化Dox的诱导浓度;最后,通过Western blot检测不同Dox浓度下,转染目的基因的ADSCs中BMP-2表达,Image J软件进行灰度值分析判断二者之间的剂量依赖关系。结果:1%琼脂糖凝胶电泳证实p UC57-BMP-2经双酶切后可获得大小约1 100 bp的目的基因片段,菌落PCR和基因测序证实含目的基因的慢病毒表达载体p LVCT-BMP-2构建成功。ADSCs对Dox最大耐受浓度为6μg/m L,Dox对ADSCs中目的基因表达的最大诱导浓度为5μg/m L,Western blot证实ADSCs中BMP-2表达与Dox浓度(0~5μg/m L)存在剂量依赖关系。结论:成功构建可调控BMP-2表达的单质粒慢病毒表达载体,转染ADSCs后,BMP-2的表达与Dox浓度存在剂量依赖关系。(本文来源于《天津医科大学学报》期刊2016年03期）
李卓,康炜,辛娜,田宇,李建华[8]（2015）在《人AQP1-shRNA表达质粒载体的构建与筛选》一文中研究指出目的构建针对人水通道蛋白1(AQP1)基因的shRNA表达质粒载体,并验证其干扰效果,为进一步探讨AQP1基因对人乳腺癌细胞的作用及机制建立基础。方法设计合成4对针对人AQP1基因不同位点的shRNA片段,通过DNA重组技术将其插入载体GV115中,构建AQP1-shRNA重组质粒,转染人乳腺癌MCF-7细胞,并通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blot法检测干扰效率。结果 RT-PCR法证实AQP1在乳腺癌MCF-7细胞中有表达。测序验证表明4对靶向AQP1-shRNA表达载体均构建成功。4组干扰载体能够从基因和蛋白表达水平不同程度抑制AQP1表达,其中以AQP1-shRNA 4对AQP1的干扰效率最强。结论成功有效地构建了针对人AQP1基因的shRNA重组质粒,能够有效抑制人乳腺癌细胞MCF-7中AQP1的表达。(本文来源于《重庆医学》期刊2015年30期）
宋丽[9]（2015）在《乳酸乳球菌upp基因缺陷互补型质粒载体系统的构建及其缺失菌生物学特性研究》一文中研究指出乳酸菌是人和动物肠道内重要的益生菌群,与人类生活密切相关。乳酸菌作为一种可安全使用的食品级微生物,其应用历史长久,且被广泛地用于食品加工、工业发酵以及微生态制剂研制等多种领域,其中绝大多数种类的乳球菌和乳杆菌均可用于安全生产。乳酸菌具有提高人和动物胃肠道粘膜免疫功能的作用,可作为免疫佐剂,也是表达外源蛋白最理想的候选载体菌株。随着对乳酸菌分子生物学研究的日益深入以及其在食品、医药等行业的广泛应用,可利用现代分子生物学技术来构建和应用乳酸菌食品级高效表达载体系统,这对于乳酸菌应用潜能的开发和乳品工业的发展具有十分重要意义,也是近年来的研究热点。乳酸乳球菌能够广泛的存在于人和动物消化道中,并发挥着重要的生理作用,而且其在作为安全性良好的外源基因表达宿主菌方面也已显现出较大的发展潜力。乳酸菌整合载体主要用于染色体突变,即通过整合或基因替代进行任意特殊位点基因的改变。食品级整合载体是在染色体上进行基因重组,无选择标记、无碱基残留,且重组多发生在非编码区域。温敏型质粒在一定温度范围内可正常复制,当温度高于一定阀值时质粒复制效率降低或不复制。反选择标记基因指在特定的筛选条件下,含有反选择标记基因的菌株死亡,不含有反选择标记基因的可以存活下来,因此既不引入抗性基因又能达到筛选的目的。尿嘧啶磷酸核糖基转移酶基因(uracil phosphoribosyl transferase,UPP)表达产物为尿嘧啶磷酸核糖转移酶,该酶可作用于5-氟尿嘧啶,使其转化生成5-氟单磷酸脱氧尿嘧啶,通过对胸腺嘧啶核苷酸合成酶进行抑制,最终导致细胞死亡。upp基因可利用这一特性作为反选择标记基因。本研究以p WV01型温敏质粒为主要载体,构建了含有Lactococcus lactis MG1363 upp表达盒(作为反选择标记)的载体p GBWVHC32-upp,经温度敏感性试验测试显示,p GBWVHC32-upp在L.lactis MG1363中的复制shut-off温度为40℃,因此将39℃作为其筛选温度。并以p GBWVHC-32upp作为整合载体骨架,构建了4个用于基因打靶整合系统操作的整合载体,分别为p GBWVHC32upp-1L1R、p GBWVHC32upp-1L2R、p GBWVHC32upp-2L1R和p GBWVHC32upp-2L2R。根据本研究获得的筛选温度建立了乳酸菌基因打靶整合系统的筛选方法:分别将构建的4个整合载体电转化入L.lactis MG1363中过夜培养;单克隆菌落经培养后按1%比例转接GM17液体培养基39℃培养,并按照筛选方法进行筛选,最后将经1:1000–10000稀释的菌液涂布于含有5-FU的SDM培养基上32℃培养1-2天;挑取菌落提取基因组经PCR鉴定获取缺失upp基因的乳酸乳球菌Δupp L.lactis MG1363突变菌株。研究结果表明,利用基因打靶整合系统经筛选可以获得Δupp L.lactis MG1363突变菌株。提取乳球菌基因组DNA,经PCR鉴定目的基因的靶位点获得了缺失。实验表明,获得的Δupp L.lactis MG1363突变菌株经多次传代仍可保持遗传稳定性,并且与野生型L.lactis MG1363的生长曲线相似。碳源利用分析试验结果表明,缺失菌株除了有对5-FU的抗性外,其碳源代谢与野生型菌株没有区别。扫描电镜结果分析得出,缺失菌L.lactis MG1363和野生菌株在对数生长期、平台期和衰退期的形态学观察没有差异。为了检测upp基因的缺失是否会对乳酸乳球菌的代谢通路产生影响,进而会在食品级应用方面存在潜在的危害,本研究对Δupp L.lactis MG1363和野生菌株的RNA样品进行RNA-Seq测序,通过对这两株菌的RNA进行提取、转录组测序及差异基因表达进行分析(|Log2 Ratio|>1,p-value<0.05,FDR<0.001),发现:Δupp L.lactis MG1363相对于野生菌株显着上调和下调表达的基因数分别为6个和10个。在Δupp L.lactis MG1363中,upp基因的转录并未被检测到,这与获得缺失upp基因的菌株表型特征相符。差异基因11mg_0201是唯一一个与代谢相关的蛋白酶基因,提示upp基因缺失并没有造成代谢途径的显着变化,表明upp基因缺失并不会造成菌体代谢毒性,符合食品安全级别。在缺失upp基因的乳酸乳球菌菌株中转化入含有表达upp基因的质粒时,重组菌无法在含5-FU的培养基上生长,所以可将其作为反选择筛选标记构建基因缺陷互补型质粒载体系统。本研究以L.lactis MG1363 pH诱导分泌型质粒p AMJ399作为表达载体,构建了重组质粒p AMJ399upp-Ca IFN-γ,并电转化入Δupp L.lactis MG1363中,通过反选择标记筛选到重组乳酸乳球菌p AMJ399upp-Ca IFN-γ/Δupp L.lactis MG1363,其可自身产酸启动诱导。Western blot检测结果显示,在菌体中可见与兔抗Ca IFN-γ抗体特异性发生反应的约20ku的目的蛋白,证明Ca IFN-γ蛋白在重组乳酸乳球菌中获得了表达。以上结果表明,可以利用该基因打靶整合系统对乳酸乳球菌染色体上非必须位点进行删除;该基因打靶整合系统在L.lactis MG1363中适用,可进行无选择标记的基因删除,以便对基因的功能进行研究,也可以利用upp基因作为反选择标记构建基因缺陷互补型质粒载体系统表达异源蛋白,为研究符合生物安全的基因工程重组乳酸乳球菌奠定基础。(本文来源于《东北农业大学》期刊2015-06-01）
舒榕,王强,朱慧芬,孙媛丽,贺琪[10]（2015）在《携带SLC基因的Birc5-siRNA质粒载体的构建及鉴定》一文中研究指出目的构建携带SLC基因的Birc5-siRNA质粒载体,为肿瘤靶向治疗研究提供基础。方法使用Ambion公司siRNATarget Finder设计的Birc5mRNA干扰序列,将Birc5-siRNA插入载体PEGFP6-1后转化大肠埃希菌扩增培养,提取质粒;将SLC插入质粒pGenesil-8后转化细菌扩增培养,提取质粒;挑取酶切鉴定正确的质粒转化菌液测序鉴定;采用分子克隆技术构建特异性沉默Birc5且携带SLC基因的质粒,命名为pgsiRNA-Birc5+SLC。结果质粒Birc5能被EcoRⅠ酶切出1条约400bp的DNA条带,说明Birc5-siRNA已插入质粒载体PEGFP6-1;pGenesil-8-SLC能被BglⅡ+XbaⅠ酶切出1条约430bp的DNA条带,说明SLC插入正确;酶切鉴定正确的质粒转化菌液Birc5-siRNA和SLC测序结果显示均为插入正确的克隆质粒;经酶切鉴定分析显示pgsiRNA-Birc5+SLC符合酶切鉴定结果,表明携带SLC基因的Birc5-siRNA质粒载体构建成功。结论成功构建了携带SLC基因的Birc5-siRNA质粒,为进一步研究靶向沉默肿瘤Birc5基因并趋化淋巴细胞抗肿瘤研究提供了工具和基础。(本文来源于《华中科技大学学报(医学版)》期刊2015年01期）
质粒载体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的连接针对人血管内皮生长因子(VEGF)设计的短发夹RNA与质粒载体,并转染视网膜色素上皮(RPE)细胞,观察其转染效率及对细胞的毒性。方法设计针对人VEGF的短发夹RNA(shRNAs,V1,V2),V3为阴性对照即不含特异性shRNA,其表达载体为pGCSilencer~(TM)/U6/Neo/GFP/VEGF RNAi。用Lipofectamine~(TM) 2000转染RPE细胞,用倒置荧光显微镜及流式细胞仪观察其转染效率;用MTT法观察其对细胞的毒性。结果质粒载体介导的GFP在细胞中的表达呈黄绿色,弥漫于整个胞浆和胞核,转染后24h GFP开始表达,转染后48h表达明显增强。流式细胞仪检测质粒pGCSilencer~(TM)/U6/Neo/GFP/VEGF RNAi对体外培养的RPE细胞转染效率为43.9%,质粒转染后MTT法测定细胞活性的OD值与对照组相比明显降低(P=0.004)。结论质粒pGCSilencerTM/U6/Neo/GFP/VEGF RNAi可以有效地转染体外培养的RPE细胞,但质粒转染对细胞有明显的毒性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
质粒载体论文参考文献
[1].元佩燕,陈蕾,徐帅妹,童方丽,徐平平.构建环状RNAmmu＿circ＿Rab11a质粒载体并转染293T细胞[J].中国组织工程研究.2019
[2].蔡春梅,范思均,梁歌,姜严明,冯婧.质粒载体介导的短发夹RNA对RPE细胞转染效率及毒性研究[J].解剖科学进展.2018
[3].李康佳.水稻条斑病菌内源质粒分析与穿梭质粒载体的构建[D].广西大学.2017
[4].冯城婷.MGMT干扰质粒载体的构建及其对奥沙利铂抗肝癌细胞作用的影响[D].苏州大学.2017
[5].王强,潘丽红,吕丹,朱慧芬.共沉默Birc5和Hspa5的双干扰siRNA质粒载体构建及鉴定[J].华中科技大学学报(医学版).2017
[6].季晓飞,赵慧琳,张莹,柏雪莲,张艳丽.基因敲除质粒载体的构建及其在幽门螺杆菌基因敲除中的应用[J].中国病原生物学杂志.2016
[7].王鹏,苗军,方成,胡永成,陈晓鹏.可调控BMP-2表达的单质粒载体构建及其在ADSCs中的表达研究[J].天津医科大学学报.2016
[8].李卓,康炜,辛娜,田宇,李建华.人AQP1-shRNA表达质粒载体的构建与筛选[J].重庆医学.2015
[9].宋丽.乳酸乳球菌upp基因缺陷互补型质粒载体系统的构建及其缺失菌生物学特性研究[D].东北农业大学.2015
[10].舒榕,王强,朱慧芬,孙媛丽,贺琪.携带SLC基因的Birc5-siRNA质粒载体的构建及鉴定[J].华中科技大学学报(医学版).2015
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