导读:本文包含了降解性质粒论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:质粒,性质,基因,碳源,载体,硝基苯,环境。
降解性质粒论文文献综述
李娟[1]（2007）在《石油降解性质粒的提取及c23O基因的克隆与表达》一文中研究指出迅速发展的石油工业带给我们的不仅是巨大的经济效益,还包括日益严重的环境污染问题。用于强化降解的微生物菌种通常是自然界筛选的混合菌群,组成比例在使用过程中容易发生变化,并可能在实际应用中发生竞争、抑制的情况。所以,利用遗传工程技术获得可用于提高整个降解效率的多功能基因工程菌意义重大。本研究以本实验室分离并保存的8株石油降解菌LY-1、LY-2、LY-3、LY-4、LY-5、LY-6、LY-7、LY-8为研究对象,进行质粒提取,获得了对石油降解非常重要的降解性质粒(degradative plasmid),并成功的克隆出了邻苯二酚2,3-双加氧酶基因(c23O),并对此基因进行了表达和功能研究。在质粒检测实验中,得到的质粒带大于20 kb,对于大质粒提取研究较少,所以运用几种质粒提取方法进行质粒的抽提,从菌株LY-5中,提取出较为清晰的大质粒。在经邻苯二酚诱导后LY-5菌株中检测到了邻苯二酚2,3双加氧酶(CatO2ase)酶活,这表明LY-5菌株的细胞内含有邻苯二酚降解路径。对质粒进行初步降解功能研究发现,该质粒具有石油降解特性。查阅相关文献,查找质粒上可能存在的降解性基因。确定要克隆的目的基因是c23O基因,在Genbank上查找此基因的同源序列,并设计引物,以菌株LY-5中提取的质粒为模板,通过PCR的方法进行基因克隆,得到了c23O基因并进行测序,对测序结果进行生物信息学分析。c23O基因序列全长924 bp,编码307 aa,蛋白的分子量为34.86 kDa,理论等电点为5.35。编码区G+C含量为54.87 %,A+T含量为45.13 %,为典型的原核生物的碱基含量特征。c23O基因的氨基酸序列保守区预测表明与其匹配的保守区共有3个,pfam00903;COG0346;COG2514。Pfam蛋白家族预测表明,该基因同属于PF00903家族,分值:81.8,E-value:2.1e-21。从BlastP相似性搜索结果表明基因与恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)的基因相似性达到99%。菌株LY-5的c23O基因与已知产碱菌属(Alcaligenes)的c23O基因编码基因编码的多肽氨基酸序列相似性不高,与来源于假单胞菌属的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)和恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)的酶基因序列的相似性较高。将克隆得到的c23O基因构建原核表达载体pGEX-c23O,通过PCR、重组质粒提取和双酶切检测证明重组载体构建成功。通过IPTG诱导使c23O基因在大肠杆菌(Escherichia coli)中表达,SDS-PAGE检测获得64 kDa左右的融合蛋白带,大小与预期相符,说明它们已经在大肠杆菌中表达。IPTG诱导3小时,胞内酶活性达到最高476.7 mu/ml。对胞外、胞内、胞间质总酶活进行计算,得到最高酶活活性545 mu/ml。成功表达出邻苯二酚2,3-双加氧酶酶活,且显示其表达蛋白在表达宿主菌中主要以胞内酶的形式存在。同时,也证明了产碱杆菌属(Alcaligenes)的c23O基因能够在原核生物中良好表达。(本文来源于《哈尔滨工业大学》期刊2007-07-01）
胡尚勤,刘天贵[2]（2003）在《天然降解性质粒在控制环境持久性有机污染物中的应用》一文中研究指出本文结合我国目前环境污染日益严重的实际情况 ,根据微生物在生物圈内的能量流动和物质循环 ,以及自净中起的重要作用 ,从微生物遗传工程的角度 ,特别是如何利用对环境污染物有很强降解能力的质粒角度论述了利用微生物控制环境污染问题。人工构建的新功能工程菌具有降解范围广、效果好的优点 ,对控制环境污染具有其它理化方法所不及的优势。这无疑为解决环境污染提供了新途径 ,这对改善环境、控制环境污染都有极其重要的意义。(本文来源于《重庆环境科学》期刊2003年12期）
刘春,周集体,黄丽萍,吕红[3]（2003）在《假单胞菌XN-1硝基苯降解性质粒的提取及研究》一文中研究指出假单胞菌XN 1对有机污染物硝基苯具有降解性 ,并且对氨苄青霉素具有抗性。检测和提取了假单胞菌XN 1细胞内的质粒 ,得到了一个约 2 2kb大小的质粒pXN 1。质粒消除实验证实这个质粒与硝基苯降解性有关 ,而与抗生素抗性无关。XN 1和其自发突变株XN 1 2和XN 1 3特性的差异和质粒检测的差异之间存在对应关系 ,并且得到了一个比 pXN 1小几个kb的衍生质粒 pXN 1 3。(本文来源于《微生物学通报》期刊2003年01期）
罗如新,张素琴,李顺鹏[4]（1999）在《氯苯降解性质粒pL1限制性酶消化和物理图谱》一文中研究指出大量提取Ｌ１ 菌质粒并用低熔点琼脂糖回收．用５ 种限制性核酸内切酶消化，所得片段数分别是：ＨｉｎｄⅢ４ ，ＢａｎＨⅠ１６ ，ＸｂａⅠ４ ，ＰｓｔⅠ１５，ＳｍａⅠ１２．从各片段的累加测出该质粒的平均大小约为９２５ ｋｂ ，分子量为６００９ ×１０６ｄａｌｔｏｎ ．在单酶消化的基础上，用Ｈｉｎｄ Ⅲ／ＸｂａⅠ、ＨｉｎｄⅢ／ＢａｍＨⅠ、ＸＢａⅠ／ＢａｍＨⅠ双酶消化，以及Ｂａｍ ＨⅠ部分消化，由此组建了Ｈｉｎｄ Ⅲ／ＸｂａⅠ／Ｂａｍ ＨⅠ３ 个酶的物理图谱(本文来源于《环境科学学报》期刊1999年05期）
罗如新,沈标,李顺鹏[5]（1997）在《一氯苯的微生物厌气降解及其降解性质粒的研究》一文中研究指出以一氯苯为唯一碳源，从某化工厂废水处理厂的活性污泥中分离得一株一氯苯降解菌，初步鉴定属于气单胞菌属（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ）。用气相色谱法测得该菌在３周内的氯苯降解率为３３％。不同的质粒消除试验结果表明，该菌质粒很稳定。已成功地将质粒转移到大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉＪＦ８０３）中。该转化子能利用一氯苯为唯一碳源生长，且转化子中有与原菌株电泳迁移率相同的质粒。因此，可以认为该质粒携带有降解一氯苯的基因。(本文来源于《南京农业大学学报》期刊1997年02期）
李尔炀,史乐文[6]（1994）在《T_3菌株降解性质粒的研究》一文中研究指出Ｔ３株为乙酸钙不动杆菌（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒｃａｌｃａｃｅｔｉｃｕｓ），能够降解苯甲酸和萘，含有６个质粒．降解萘的基因由染色体携带，降解苯甲酸的基因由ｐＢＴ４质粒携带，ｐＢＴ４质粒分子量为５．１Ｋｂ（３．３７×１０６道尔顿），ｐＢＴ４质粒有３个ＨｉｎｄＩＩＩ切点，３个ＢａｍＨＩ切点．(本文来源于《江苏石油化工学院学报》期刊1994年01期）
赵姬勇,王志通,简浩然[7]（1988）在《萘降解性质粒的筛选及其在炼油污水处理场中的转移》一文中研究指出从炼油污水处理场活性污泥中分离到一株能以萘为唯一碳源的假单胞杆菌(Pseudomonas sp.)S13。通过质粒接合转移、质粒消除以及分子杂交,证明假单胞杆菌S13降解萘的功能是由质粒编码的。应用膜扩散器在炼油污水处理场进行的现场试验证明,假单胞杆菌S13的萘降解性质粒,可在污水处理场里通过接合转移传递到另一个从同一环境分离的假单胞杆菌T9中去,并使后者获得利用萘的能力。这一结果表明,当条件合适时,降解性质粒可在自然环境里的细菌群体中扩散。(本文来源于《环境科学学报》期刊1988年01期）
朱湘民,赵姬勇,罗清修,王志通[8]（1988）在《降解性质粒DNA的裂解气液色谱分析》一文中研究指出用GC-9A气相色谱仪和PYR-2A管式炉裂解器,对四种降解性质粒DNA进行了裂解气液色谱鉴别,通过对指纹图的分析,较好地区分了不同降解性质粒DNA间的差异。证明了裂解气液色谱法分析质粒的可行性。另外,对分析质粒DNA的色谱柱、进样量、裂解温度和时间等色谱条件也进行了试验。(本文来源于《微生物学报》期刊1988年01期）
王春生,罗清修,陆娟子,孙国萍,王淑君[9]（1984）在《BHC降解性质粒的研究》一文中研究指出分离获得了一株对β-及γ-BHC均具有一定降解效果的Ⅱ_5-A菌株,该菌在好气条件下以BHC为唯一碳源。检测发现。它携带一个质粒。用丝裂霉素C进行的质粒消除试验表明,凡是消除了质粒的菌株,均丧失在以BHC为唯一碳源的无机盐培养基上的生长能力。该质粒经提取和纯化后,通过转化,成功地转移到大肠杆菌(Escherichia coli C600),使该转化子获得降解BHC的能力,并在转化子中检测出与原菌株电泳泳动度相同的质粒。因此,认为Ⅱ_5-A菌株降解BHC的基因是位于它所携带的质粒上。作者暂将此降解性质粒命名为BHC质粒,并编号为pWE1。(本文来源于《环境科学学报》期刊1984年04期）
王春生,简浩然,王志通[10]（1984）在《一种分离纯化降解性质粒DNA的简便方法》一文中研究指出控制微生物对某些环境污染物降解的质粒——降解性质粒,分子量较大,难于和染色体DNA分离。超螺旋质粒DNA在热变性后冷却即快速复性方面与染色体DNA不同。根据此性质,作者改进了McMaster的和Kado的方法,获得了良好效果。实验证明。经此法纯化的质粒具有转化活性,是研究化学污染物的降解性质粒的简便方法。(本文来源于《环境科学学报》期刊1984年01期）
降解性质粒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文结合我国目前环境污染日益严重的实际情况 ,根据微生物在生物圈内的能量流动和物质循环 ,以及自净中起的重要作用 ,从微生物遗传工程的角度 ,特别是如何利用对环境污染物有很强降解能力的质粒角度论述了利用微生物控制环境污染问题。人工构建的新功能工程菌具有降解范围广、效果好的优点 ,对控制环境污染具有其它理化方法所不及的优势。这无疑为解决环境污染提供了新途径 ,这对改善环境、控制环境污染都有极其重要的意义。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
降解性质粒论文参考文献
[1].李娟.石油降解性质粒的提取及c23O基因的克隆与表达[D].哈尔滨工业大学.2007
[2].胡尚勤,刘天贵.天然降解性质粒在控制环境持久性有机污染物中的应用[J].重庆环境科学.2003
[3].刘春,周集体,黄丽萍,吕红.假单胞菌XN-1硝基苯降解性质粒的提取及研究[J].微生物学通报.2003
[4].罗如新,张素琴,李顺鹏.氯苯降解性质粒pL1限制性酶消化和物理图谱[J].环境科学学报.1999
[5].罗如新,沈标,李顺鹏.一氯苯的微生物厌气降解及其降解性质粒的研究[J].南京农业大学学报.1997
[6].李尔炀,史乐文.T_3菌株降解性质粒的研究[J].江苏石油化工学院学报.1994
[7].赵姬勇,王志通,简浩然.萘降解性质粒的筛选及其在炼油污水处理场中的转移[J].环境科学学报.1988
[8].朱湘民,赵姬勇,罗清修,王志通.降解性质粒DNA的裂解气液色谱分析[J].微生物学报.1988
[9].王春生,罗清修,陆娟子,孙国萍,王淑君.BHC降解性质粒的研究[J].环境科学学报.1984
[10].王春生,简浩然,王志通.一种分离纯化降解性质粒DNA的简便方法[J].环境科学学报.1984
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