锦橙中β-葡萄糖苷酶的提取纯化及其结构表征

锦橙中β-葡萄糖苷酶的提取纯化及其结构表征

论文摘要

本文以锦橙为原料,对其果皮与果肉中的β-葡萄糖苷酶进行了提取纯化以及结构表征。实验结果显示,果皮中0.35 mol/L NaCl洗脱液中的β-葡萄糖苷酶的平均酶活为(6.57±4.27)×10-3 U/g,其活性显著高于0.4 mol/L NaCl洗脱液中的β-葡萄糖苷酶活性和果肉中的0.35 mol/L和0.4 mol/L NaCl洗脱液中的酶活(p<0.05),且0.35 mol/L NaCl洗脱液中的蛋白质浓度最高,达0.154 mg/mL。在该条件下纯化得到的β-葡萄糖苷酶的分子量略高于170 kDa,且该酶的最大荧光吸收峰为582 nm,其粒径范围为5~25 nm。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与仪器
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 锦橙果皮和果肉中β-葡萄糖苷酶粗酶液的制备
  •     1.2.2 β-葡萄糖苷酶的硫酸铵沉淀
  •     1.2.3 透析法除盐、浓缩
  •     1.2.4 DEAE-Sepharose柱层析
  •     1.2.5 β-葡萄糖苷酶活性测定
  •     1.2.6 酶液中蛋白质浓度的测定
  •     1.2.7 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量
  •     1.2.8 荧光光谱分析
  •     1.2.9 粒径测定
  •   1.3 数据处理
  • 2 结果与分析
  •   2.1 不同浓度NaCl溶液洗脱效果的比较
  •   2.2 纯化酶液中蛋白质浓度
  •   2.3 测定纯化的β-葡萄糖苷酶的分子量
  •   2.4 荧光光谱分析
  •   2.5 粒径分布测定
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 任婧楠,范刚,张璐璐,潘思轶,王可兴

    关键词: 锦橙,葡萄糖苷酶,提取纯化,结构表征

    来源: 食品工业科技 2019年15期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 环境食品学教育部重点实验室华中农业大学食品科技学院

    基金: 国家重点研发计划专项(2017YFD0400101),国家自然科学基金(31671824),湖北省重大科技创新计划项目(2015ABA035,2016ABA112)

    分类号: TS201.25

    DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.15.014

    页码: 84-88

    总页数: 5

    文件大小: 1121K

    下载量: 330

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