人白介素质粒论文_顾香,陈吉泉,李兵

导读:本文包含了人白介素质粒论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:白介素,质粒,基因,基因治疗,细胞,凋亡,虫卵。

人白介素质粒论文文献综述

顾香,陈吉泉,李兵[1](2019)在《重组人白介素35质粒的构建及鉴定》一文中研究指出目的:通过分子生物学技术构建重组人白介素35(IL-35)质粒,为进一步研究人IL-35的生物学功能奠定基础。方法:用KG-1细胞(人白血病细胞)扩增p35和EBI3的cDNA,将两者先后连接至pSectag2A质粒中,最后把Linker连接至pSectag2A-p35-EBI3中,构建成pSectag2A-IL-35质粒。结果:经测序等方法鉴定重组质粒中p35和EBI3序列与Genbank中(p35 NM-000882和EBI3 NM-005725)公布的序列一致。结论:成功构建pSectag2A-IL-35真核表达载体。(本文来源于《中外医学研究》期刊2019年17期)

储毅,刘全华,华丽,朱亚菊,高苗苗[2](2011)在《野生型和突变型人白介素13哺乳细胞表达质粒的构建》一文中研究指出目的:构建野生型及突变型人IL-13(hIL-13)哺乳细胞表达质粒。方法:采用融合PCR扩增人生长激素(hGH)-hIL13融合蛋白编码序列。PCR产物和pcDNA3.1表达载体经HindⅢ和EcoRⅠ双酶切处理后,将PCR产物定向插入pcDNA3.1真核表达载体中,构建质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g。将其转化到DH5α感受态细胞内进行扩增,阳性克隆鉴定,质粒抽提,进行测序验证。结果:重组质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g经测序验证,hGH-hIL13融合蛋白编码序列与实验设计一致,且已与pcDNA3.1(+)真核表达载体正确重组。结论:成功构建了哺乳细胞表达质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g,为后续野生型及突变型hIL-13哺乳细胞的重组表达奠定了基础。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2011年11期)

张春江,杨平荣,王槐,丁佳栋[3](2011)在《人白介素17信号途径真核融合表达质粒的构建及稳定共表达Hela细胞株的筛选》一文中研究指出细胞因子介导的自身免疫是引起自身免疫性疾病的一种重要的机制。白介素17(IL-17)是目前新发现的细胞因子,IL-17与自身免疫病和炎症性疾病关系密切。衔接蛋白ACT1是活化核转录因子NF-κB的重要蛋白分子。ACT1在IL-17信号通路中起重(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2011年11期)

刘双琳[4](2009)在《日本血吸虫SIEA26-28kDa单链抗体与人白介素18融合蛋白质粒的构建及表达》一文中研究指出目的:本研究旨在构建日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原26-28kDa单链抗体与人白介素18融合蛋白原核表达质粒,并通过大肠杆菌BL21菌株表达该融合蛋白,确定该融合蛋白的表达水平,探讨利用单链抗体联合白介素18进行日本血吸虫病靶向免疫治疗的可能性。方法:以pET32a/SIEA26-28kDa-EGFP-scFv和pGEM-T-CMV/IL18质粒为基础,利用PCR技术从pGEM-T-CMV/IL18质粒中扩增得到带有特定酶切位点的IL-18全长基因片段,经相应的限制性内切酶酶切该片段和pET32a/SIEA26-28kDa-EGFP-scFv质粒,分离并纯化相应目的片段后,利用连接酶连接,转化至感受态细胞,经固体LB细菌培养基培养,挑取单克隆,纯化质粒、鉴定克隆,获得pET32a/SIEA26-28kDa-IL18-scFv质粒;将该质粒转染至大肠杆菌BL21菌株,通过IPTG诱导表达融合蛋白IL18-scFv,同时表达EGFP-scFv融合蛋白,观察该融合蛋白的表达水平;并用Western-blot鉴定该融合蛋白的表达。结果:1.经酶切鉴定,原有保存的质粒证实为pET32a/SIEA26-28kDa-EGFP-scFv;2.经PCR成功扩增IL-18基因片段;3.经限制性内切酶酶切,连接酶连接,转化至感受态细胞,鉴定克隆,获得pET32a/SIEA26-28kDa-IL18-scFv质粒;4.经考马斯亮蓝染色鉴定,在IPTG诱导不同时间后,融合蛋白IL18-scFv和EGFP-scFv得到成功的表达,并经Western-blot鉴定。结论:1.成功构建pET32a/SIEA26-28kDa-IL18-scFv质粒;2.经IPTG诱导,IL18-scFv融合蛋白可有效表达。(本文来源于《中南大学》期刊2009-05-01)

宋磊,李新国[5](2003)在《人白介素-6表达质粒的构建及在酿酒酵母中的表达》一文中研究指出将带有哺乳动物细胞信号肽的人白细胞介素-6(hIL-6)基因片段构建到大肠杆菌-酵母细胞穿梭型质粒pYES2中,获得表达质粒pYES2-hIL-6.另外,将表达质粒pYES2-hIL-6转化到酿酒酵母细胞DBY747中,并将获得的转化子在含2%乳糖的YP培养基中培养到OD_(600)=1.0左右,后用2%的半乳糖进行了诱导表达.结果发现,在培养上清中发现人白介素-6的分泌.(本文来源于《上海师范大学学报(自然科学版)》期刊2003年04期)

章振林,林波,余路阳,沈水仙,朱丽华[6](2003)在《体内应用编码人白介素-10质粒DNA对实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠的基因治疗(英文)》一文中研究指出目的:研究白介素-10(IL-10)对实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠的基因治疗作用。方法:将IL-10质粒DNA注射入由猪甲状腺球蛋白(pTg)诱发的自身免疫性甲状腺炎小鼠甲状腺内,pTg免疫后28天,进行甲状腺IL-10 mRNA表达和组织学等检查。结果:IL-10质粒DNA注射后1周或2周甲状腺均有IL-10 mRNA表达;转染IL-10质粒DNA的COS-7细胞48小时有显着IL-10 mRNA表达,同时转染后48、72小时细胞培养液中IL-10浓度显着增高;治疗组小鼠甲状腺淋巴细胞浸润指数(1.1±0.4)明显低于对照组(2.2±0.5)(P<0.01);治疗组小鼠血清IFN-Υ水平明显低于对照组(P<0.01)。结论:甲状腺直接注射编码IL-10质粒DNA能显着抑制自身免疫性甲状腺炎淋巴细胞对甲状腺的浸润,缓解病情的发展。(本文来源于《Acta Pharmacologica Sinica》期刊2003年09期)

田卫东,田薇,李声伟,刘磊,王栋[7](2002)在《颞下颌关节骨关节病基因治疗的基础研究——含人白介素I受体拮抗剂的重组质粒重建》一文中研究指出Objective: To amplify the cDNA of human IL-1 receptor antagonist and subclone into pcDNA3.1(+), which would establish the gene therapy of temporal mandibular joint osteoarthritis. Materials and Methods: Total RNA of mononuclear cells was seperated and extracted from healthy human periferal blood cells. With RT-PCR method, human IL-1 Ra cDNA was amplified. After double digestion, the hIL-1 Ra cDNA, which carried the sites of Hind III(5’) and EcoR I(3’), was inserted into pcDNA3.1(+) containing matched restriction sites to construct the recombinant plasmid vector. The recombinant plasmid was transformed into the competent JM109(E.coli competent cell). Through selecting by ampicillinum and identifying by double digestion and sequenceing, the positive colonies wre selected. Results: It was proved by the double digestion and sequencing that the hIL-1 Ra cDNA was subcloned into pcDNA3.1 (+) exactly and proved to be the same as reported abroad, which carries a 5’ Hind III site in the 5’ end and a EcoR I site in the 3’ end. Conclusion: In the present study, human IL-1 Ra cDNA fragment was amplified correctly, and the recombinant plasmid which carries hIL-1 Ra cDNA was constructed.(本文来源于《第叁届中国国际暨第六届全国口腔颌面外科学术会议论文集》期刊2002-11-01)

柳勤,何菱[8](2000)在《重组人白介素-8表达质粒的构建、诱导表达及生物学活性测定》一文中研究指出白介素-8(IL-8)是一种趋化活性物质,与其他细胞因子一样,IL-8具有多效性功能,是炎症性疾病的重要介质,它在抗感染、免疫反应调节以及抗肿瘤方面有重要作用[1,2]。炎症反应的主要特征之一是中性粒细胞在炎性损伤部位的聚集。感染、创伤、局部缺血以及癌症(本文来源于《武警医学》期刊2000年02期)

徐迎佳,何奔,沈南,王彬尧,郑道声[9](1999)在《人白介素1β转换酶全长的基因克隆及重组质粒构建》一文中研究指出以EB病毒转化的正常人外周血8淋巴细胞为原料,应用逆转录聚合酶链(RT-PCR)技术扩增出编码白介素1β转换酶的全长cDNA,并将此基因定向克隆入真核表达载体PCI中,通过转化子的筛选得到了带有插入片断的阳性克隆,经限制性内切酶物理图谱分析及核苷酸测序表明,克隆得到的基因与文献报道的完全一致,从而完成了ICE重组质粒的构建。本工作为进一步深入研究ICE对细胞凋亡的诱导效应奠定了实验基础。(本文来源于《基础医学与临床》期刊1999年01期)

徐迎佳,何奔,沈南,王彬尧,郑道声[10](1999)在《人白介素-1β转换酶的克隆及重组质粒构建》一文中研究指出白介素-1β转换酶(nitereukin-1β-conver-tingenzyme,ICE)是半胱氨酸蛋白酶家族中的一员。研究提示,ICE可能在哺乳类细胞凋亡过程中起重要作用。为进一步了解该基因在凋亡诱导中的作用,以及潜在的临床应用价值,我们克隆了人ICE的CDNA序列,并构建了相应的真核?..(本文来源于《上海第二医科大学学报》期刊1999年01期)

人白介素质粒论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的:构建野生型及突变型人IL-13(hIL-13)哺乳细胞表达质粒。方法:采用融合PCR扩增人生长激素(hGH)-hIL13融合蛋白编码序列。PCR产物和pcDNA3.1表达载体经HindⅢ和EcoRⅠ双酶切处理后,将PCR产物定向插入pcDNA3.1真核表达载体中,构建质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g。将其转化到DH5α感受态细胞内进行扩增,阳性克隆鉴定,质粒抽提,进行测序验证。结果:重组质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g经测序验证,hGH-hIL13融合蛋白编码序列与实验设计一致,且已与pcDNA3.1(+)真核表达载体正确重组。结论:成功构建了哺乳细胞表达质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g,为后续野生型及突变型hIL-13哺乳细胞的重组表达奠定了基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

人白介素质粒论文参考文献

[1].顾香,陈吉泉,李兵.重组人白介素35质粒的构建及鉴定[J].中外医学研究.2019

[2].储毅,刘全华,华丽,朱亚菊,高苗苗.野生型和突变型人白介素13哺乳细胞表达质粒的构建[J].中国免疫学杂志.2011

[3].张春江,杨平荣,王槐,丁佳栋.人白介素17信号途径真核融合表达质粒的构建及稳定共表达Hela细胞株的筛选[J].中国免疫学杂志.2011

[4].刘双琳.日本血吸虫SIEA26-28kDa单链抗体与人白介素18融合蛋白质粒的构建及表达[D].中南大学.2009

[5].宋磊,李新国.人白介素-6表达质粒的构建及在酿酒酵母中的表达[J].上海师范大学学报(自然科学版).2003

[6].章振林,林波,余路阳,沈水仙,朱丽华.体内应用编码人白介素-10质粒DNA对实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠的基因治疗(英文)[J].ActaPharmacologicaSinica.2003

[7].田卫东,田薇,李声伟,刘磊,王栋.颞下颌关节骨关节病基因治疗的基础研究——含人白介素I受体拮抗剂的重组质粒重建[C].第叁届中国国际暨第六届全国口腔颌面外科学术会议论文集.2002

[8].柳勤,何菱.重组人白介素-8表达质粒的构建、诱导表达及生物学活性测定[J].武警医学.2000

[9].徐迎佳,何奔,沈南,王彬尧,郑道声.人白介素1β转换酶全长的基因克隆及重组质粒构建[J].基础医学与临床.1999

[10].徐迎佳,何奔,沈南,王彬尧,郑道声.人白介素-1β转换酶的克隆及重组质粒构建[J].上海第二医科大学学报.1999

论文知识图

重组质粒pBHIm的酶切分析重组质粒pPHIm的物理图谱(A)和酶切分...使用NanoDropoND-1000检测大量抽提所...目的片段扩增产物的琼脂糖凝胶电泳分...重组hly操纵子质粒酶切鉴定及溶血试验...基因转染293T细胞后的镜下...

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人白介素质粒论文_顾香,陈吉泉,李兵
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