导读:本文包含了志贺氏菌论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:鉴定,荧光,芽孢,浊度,耐药性,特异性,蛔虫。
志贺氏菌论文文献综述
戴陈伟,童琳,武昌俊,许勇,李舜[1]（2019）在《实时荧光定量PCR技术快速检测志贺氏菌》一文中研究指出目的建立实时荧光定量PCR法快速检测志贺氏菌。方法提取志贺氏菌基因组为模板扩增virA基因片段,将目的片段连接至pMD19-T载体得到重组质粒,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,验证所得到的重组质粒,以紫外分光光度计测量重组质粒吸光度值A_(260),并换算为质粒拷贝数后作梯度稀释得到不同浓度的质粒标准品;进行荧光定量PCR分析并通过特异性、灵敏性实验以验证该方法的可行性。结果重组质粒标准品浓度在103～108 copies/μL范围内线性关系良好(r~2>0.99),实时荧光定量PCR检测志贺氏菌时出现良好的扩增曲线,鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均未出现扩增曲线。志贺氏菌的检出限为100CFU/m L。结论本方法便捷、高效、可靠,可用于志贺氏菌的快速定性定量检测。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2019年23期）
肖望成,杨勇,鲁红林,李娟,于鉴[2]（2019）在《福氏志贺氏菌与蛔虫混合感染引起的池鹭死亡病例诊断》一文中研究指出2018年5月,有市民在西山区滇池边发现1只死亡池鹭,送于云南农业大学,为明确其死因进行剖检。无菌采集其肠道内容物进行细菌分离培养、生化鉴定、16S r DNA扩增片段同源性分析,确定致病细菌和其亲缘关系;剖检发现其肠道内有寄生虫,提取虫体DNA进行PCR扩增确定寄生虫类型。结果显示,分离到的致病菌为福氏志贺氏菌,命名为YNCL2018,寄生虫鉴定为蛔虫。诊断该池鹭为福氏志贺氏菌与蛔虫混合感染致死。(本文来源于《野生动物学报》期刊2019年04期）
李聪[3]（2019）在《食源性蜡样芽孢杆菌和志贺氏菌适体的筛选及检测方法的建立》一文中研究指出蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)和志贺氏菌(Shigella)能够引发头晕、腹泻、呕吐等疾病,分别是典型的食源性革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,在不合格乳制品和肉制品中经常被检测出来。因此建立快速准确的检测方法,对于食品安全和人们健康生活具有重要意义。目前国内外常用的传统检测方法耗时耗力,主观性强,酶联免疫法(ELISA)中抗体制备周期长且不容易运输保存,分子生物学法因环境干扰而易出现假阳性。因此。建立兼具各方优点的检测方法具有重要意义。本文建立了适体与荧光定量PCR联用检测两种食源性致病菌的新方法,主要内容如下:(1)蜡样芽孢杆菌和志贺氏菌适体的筛选:以蜡样芽孢杆菌和志贺氏菌为靶目标,人工合成两端20 bp为固定序列和中间40 bp为随机序列,全长80 bp的ssDNA文库。利用改进的SELEX技术,经过十轮正筛和两轮反筛得到两种菌特异性强和亲和力高的适体,为提高亲和力,每轮逐次缩短孵育时间,增加洗涤次数,并通过地高辛碱性磷酸酶的显色反应测定适体与菌体的结合率。最终蜡样芽胞杆菌适体与菌体结合率为0.922,志贺氏菌适体与菌体结合率为0.842。(2)两种菌适体的克隆和序列分析:取最后一轮的筛选产物,进行扩增、克隆、测序,共得到蜡样芽孢杆菌适体20条,志贺氏菌适体17条,应用DNAMAN软件对适体碱基序列进行同源性分析,并预测适体的二级结构及自由能。结果表明筛选得到的适体同源性不高,易出现相同碱基的堆积,二级结构多为茎环、发夹、凸起,形成了丰富的空间结构。分析推测二级结构是适体与菌体特异性结合的基础。(3)两种菌适体的特异性分析:通过荧光显微镜对测序所得适体进行特异性分析,选择结合力强、特异性高的适体用于后续检测方法的建立。首先以FAM标记的上游引物和生物素标记的下游引物,对测序成功的质粒进行扩增,然后利用磁珠法分离得到FAM标记的单链DNA适体,分别与目标菌和非目的菌孵育结合,在荧光显微镜观察荧光情况。结果显示适体L4.2与蜡样芽孢杆菌的结合力强、特异性高,适体B13与志贺氏菌的结合力强、特异性高。(4)适体-qPCR检测两种菌方法的建立:合成生物素标记的适体L4.2和B13,建立适体捕获目标菌体联合qPCR检测致病菌的方法,并将该方法应用于人工污染散装牛奶中。试验结果显示,L4.2捕获体系联合qPCR检测蜡样芽孢杆菌的灵敏度可达到5.0×10~1 CFU/mL,qPCR扩增曲线所得的循环阈值(Cycle threshold,Ct)与蜡样芽孢杆菌菌液浓度对数有良好的线性关系,其线性方程为:y=-3.5477x+35.89,相关系数为:R~2=0.9983。B13捕获体系联合qPCR检测志贺氏菌的灵敏度可达到3.0×10~1 CFU/mL,qPCR检测Ct值与志贺氏菌菌液浓度对数有良好的线性关系,其线性方程为:y=-3.353x+38.963,相关系数为:R~2=0.9961。运用本研究建立的适体捕获体系联合qPCR方法检测牛奶中人工污染蜡样芽孢杆菌和志贺氏菌回收率均在80-120%之间。本研究利用改进SELEX技术筛选得到分别与蜡样芽孢杆菌和志贺氏菌特异性结合的适体,并以筛选所得的适体为基础建立适体捕获联合qPCR检测致病菌的方法,特异性好、灵敏度高,无需抗体制备。捕获适体可快速合成,且更易保存和运输,并有望利用该方法研发快速检测致病菌的试剂盒。该方法为检测食源性致病菌提供了新的方法,为食品安全检测提供了新的思路。(本文来源于《河北农业大学》期刊2019-06-01）
贺生芳,郭澍强,谈静惠,马晓花,杨旭光[4]（2019）在《志贺氏菌可视浊度/荧光环介导等温扩增方法的建立》一文中研究指出为给实验室和现场检测提供一种快速且易于操作的志贺氏菌检测方法,通过将LAMP技术分别与荧光检测技术和浊度检测技术相结合,建立了灵敏、特异、准确的可视浊度/荧光环介导等温扩增(LAMP)检测方法。根据志贺氏菌基因保守序列,利用LAMP在线软件设计4条最佳引物,通过优化反应温度,分别建立了可视浊度环介导等温扩增检测方法(LAMP-浊度)以及可视荧光环介导等温扩增检测方法(LAMP-荧光),并分析所建立的两种方法的特异性和灵敏度。结果显示:所建立的LAMP-浊度方法最适反应温度是63℃,菌液灵敏度为13.6 cfu/mL,是普通PCR方法的10倍;所建立的LAMP-荧光方法最适反应温度是64℃,菌液灵敏度为1.36 cfu/mL,是普通PCR方法的100倍。利用4株志贺氏菌和10株非志贺氏菌,证实了建立的两种可视化LAMP方法具有良好的特异性。通过环介导等温扩增技术分别与浊度检测技术和荧光检测技术相结合,使其完成时间缩短至1 h内,整个扩增过程可实时监测,并可避免由于开盖加染料而导致的假阳性。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2019年05期）
江华超,项勋,高辉,郑小惠,段纲[5]（2019）在《竹鼠志贺氏菌的分离及致病性研究》一文中研究指出对云南某竹鼠养殖场发病死亡竹鼠进行肠道致病菌分离培养,经培养基分离纯化、革兰氏染色、生化鉴定、16S r DNA扩增以及测序分析,结果表明该致病菌为志贺氏菌。将纯化的菌株进行小鼠致病性研究和药敏试验分析,结果显示该菌对小鼠具有很强的致病作用,经病理切片观察发现该菌会引发多种器官及肠道充血或出血,该菌对喹诺酮类药物和头孢类药物高度敏感。(本文来源于《湖南师范大学自然科学学报》期刊2019年02期）
庞彬辉,贺会利,蓝翊文,谢永平[6]（2019）在《规模化养殖场食蟹猴志贺氏菌的分离和鉴定》一文中研究指出从规模化实验用食蟹猴养殖场的食蟹猴腹泻粪便中分离出两株细菌,经细菌分离培养、形态学观察、生化反应、全自动微生物鉴定系统以及血清凝集试验鉴定为福氏志贺氏菌x变种。分离菌株对氧氟沙星、环丙沙星、先锋Ⅴ、氯霉素敏感,对复方新诺明、青霉素、卡那霉索和庆大霉素耐药。(本文来源于《今日畜牧兽医》期刊2019年03期）
谭珊,宋欣媛,吴培福[7]（2019）在《鸡源志贺氏菌的分离鉴定及耐药性研究》一文中研究指出昆明地区某鸡场部分鸡群突发痢疾,并有小部分鸡群死亡,疑似肠道病原菌感染所致,将采集的12份病死鸡病料进行志贺氏菌的分离鉴定、生化试验及PCR鉴定,并检测分离菌的耐药性。结果表明,共分离鉴定出志贺氏菌5株,分离菌均能发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇,其中有1株菌能迟缓发酵发酵乳糖,有2株菌不发酵蔗糖;针对志贺氏菌特异性ipaH基因设计的1对引物,扩增出393 bp的目的条带,与预期大小一致;抗生素抑菌结果显示,5株志贺氏菌对加替沙星、头孢氨苄、恩诺沙星、氨苄西林和庆大霉素均产生了耐药性,并且是多重耐药,对卡那霉素和四环素的耐药程度处于中介,对氧氟沙星具有较高的敏感性。中药抑菌方面,5株分离菌对诃子、五味子和黄芩高度敏感,但是对大黄和白头翁处于低敏程度。(本文来源于《现代畜牧兽医》期刊2019年03期）
王怡雯,张帅,张红星,齐颖颖,谢远红[8]（2019）在《双抗夹心ELISA快速检测冷鲜肉中福氏志贺氏菌2a》一文中研究指出为建立冷鲜肉中福氏志贺氏菌2a双抗夹心ELISA检测体系,采用福氏志贺氏菌2a抗原免疫获得多克隆抗体,应用杂交瘤技术进行细胞融合,筛选出1株福氏志贺氏菌2a单克隆抗体杂交瘤细胞株,命名为2C10。试验结果表明,2C10杂交瘤细胞株抗体效价为1∶10.24×104,抗体纯度为96%,免疫球蛋白亚型为IgG2a。用此单克隆抗体作为检测抗体,多克隆抗体为捕捉抗体,建立双抗夹心ELISA体系,检测限为1 000 CFU/g。用此体系检测宋内志贺氏菌、大肠杆菌O157:H7、沙门氏菌、单增李斯特菌、枯草芽孢杆菌及阪崎肠杆菌,均无交叉反应。本研究可为冷鲜肉中福氏志贺氏菌2a的检测提供一种特异性强,准确度高的ELISA检测方法。(本文来源于《中国食品学报》期刊2019年02期）
李志明[9]（2019）在《志贺氏菌传统检验方法研究进展》一文中研究指出志贺氏菌是引起人类肠道疾病的常见致病菌,尤其在一些发展中国家致病率较高。为了有效地预防、治疗和控制水、饲料以及食物中的传染病,快速检测和鉴定志贺氏菌具有十分重要的意义。本文综述了近年来传统的志贺氏菌检测方法的进展,并介绍了这些方法的优缺点,为常规检验用志贺氏菌培养基的改进提供参考。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2019年03期）
邵坤,张华宁,李心朋,胡彬,李文[10]（2019）在《山东省2011-2014年志贺氏菌分子分型及耐药性分析》一文中研究指出目的通过对山东省2011-2014年分离的志贺氏菌(Shigella)进行血清、毒力基因、分子分型和药敏等分析,了解山东省志贺氏菌的特性及流行趋势。方法用玻片凝集法进行血清分型,PCR方法扩增相关毒力基因,用脉冲场凝胶电泳技术进行分子分型,采用微量肉汤稀释法测定菌株抗生素敏感性。结果44株志贺氏菌主要为福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)(54. 55%)和宋内志贺氏菌(Shigella sonnei)(43. 18%)。ipa H、set1、sen、ial毒力基因携带率分别为100%、43. 18%、56. 82%、50. 00%。经脉冲场凝胶电泳分型(pulsed field gel electrophoresis,PFGE),福氏志贺氏菌被分为18种带型,且总体相似度偏低;宋内志贺氏菌被分为14种带型,且89. 47%的菌株相似度在90%以上。44株志贺氏菌对15种抗生素中的14种均存在不同程度的耐药。93. 18%的菌株为多重耐药菌株。结论山东省志贺氏菌以福氏和宋内血清群为主,毒力基因携带率高,有聚类分布出现,耐药严重,应加强对志贺氏菌菌型、溯源和耐药性的监测。(本文来源于《中华疾病控制杂志》期刊2019年02期）
志贺氏菌论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
2018年5月,有市民在西山区滇池边发现1只死亡池鹭,送于云南农业大学,为明确其死因进行剖检。无菌采集其肠道内容物进行细菌分离培养、生化鉴定、16S r DNA扩增片段同源性分析,确定致病细菌和其亲缘关系;剖检发现其肠道内有寄生虫,提取虫体DNA进行PCR扩增确定寄生虫类型。结果显示,分离到的致病菌为福氏志贺氏菌,命名为YNCL2018,寄生虫鉴定为蛔虫。诊断该池鹭为福氏志贺氏菌与蛔虫混合感染致死。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
志贺氏菌论文参考文献
[1].戴陈伟,童琳,武昌俊,许勇,李舜.实时荧光定量PCR技术快速检测志贺氏菌[J].食品安全质量检测学报.2019
[2].肖望成,杨勇,鲁红林,李娟,于鉴.福氏志贺氏菌与蛔虫混合感染引起的池鹭死亡病例诊断[J].野生动物学报.2019
[3].李聪.食源性蜡样芽孢杆菌和志贺氏菌适体的筛选及检测方法的建立[D].河北农业大学.2019
[4].贺生芳,郭澍强,谈静惠,马晓花,杨旭光.志贺氏菌可视浊度/荧光环介导等温扩增方法的建立[J].中国动物检疫.2019
[5].江华超,项勋,高辉,郑小惠,段纲.竹鼠志贺氏菌的分离及致病性研究[J].湖南师范大学自然科学学报.2019
[6].庞彬辉,贺会利,蓝翊文,谢永平.规模化养殖场食蟹猴志贺氏菌的分离和鉴定[J].今日畜牧兽医.2019
[7].谭珊,宋欣媛,吴培福.鸡源志贺氏菌的分离鉴定及耐药性研究[J].现代畜牧兽医.2019
[8].王怡雯,张帅,张红星,齐颖颖,谢远红.双抗夹心ELISA快速检测冷鲜肉中福氏志贺氏菌2a[J].中国食品学报.2019
[9].李志明.志贺氏菌传统检验方法研究进展[J].食品安全质量检测学报.2019
[10].邵坤,张华宁,李心朋,胡彬,李文.山东省2011-2014年志贺氏菌分子分型及耐药性分析[J].中华疾病控制杂志.2019
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