导读:本文包含了基因工程表达论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:乳酸菌,活载体,抗原蛋白,乳酸乳球菌
基因工程表达论文文献综述
刘琼,陈宏亮,姜延龙,王春凤[1]（2019）在《基因工程乳酸菌作为活载体表达外源蛋白及疾病防治研究进展》一文中研究指出乳酸菌是一类可以发酵碳水化合物产生乳酸的兼性厌氧菌总称,包括乳球菌、乳杆菌、链球菌、片球菌和双歧杆菌等,美国食品和药品监督管理局(FDA)将许多乳酸菌定义为"食品级"微生物,极少数如化脓性链球菌,肺炎链球菌是致病菌。乳酸菌可以调节肠道菌群组成从而维持肠道稳态,提高免疫力;还可竞争型地占位,定殖在肠道表面诱导黏膜液以及肠道上皮细胞抗菌肽(AMP)的产生[1];在治疗消化系统疾病(病毒性及细菌性腹泻)、炎症性肠病(IBD)和自身免疫性疾病中(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2019年06期）
Gao,Xu-wen,Ma,Ying-ying,Wang,Zhuo[2]（2019）在《表达产气荚膜梭菌α类毒素的基因工程乳酸菌:一种有潜力的口服疫苗候选》一文中研究指出产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,CP)常见于哺乳动物和禽类的胃肠道中,是一种条件性致病菌,外毒素是其主要的致病因子,且多具有致死性。根据CP所产外毒素α、β、ε和ι的不同,将CP分为A、B、C、D、E 5个毒素型,其中外毒素α是CP最为重要的致病性毒素之一,各毒素型CP均可分泌。A型CP只产生外毒素α,可引起牛、羊等多种动物坏死性肠炎和肠毒血症,同时还可引起人食物中毒,是危害畜牧业发展和人类健康的重要病原菌之一。目前,对该细菌病的防控主要以抗生素为主,但随着抗菌药物的广泛应用,多重耐药(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年05期）
朱春玲,李梅,刘丽,刘少龙,夏小静[3]（2019）在《抗菌肽基因工程表达载体的研究进展》一文中研究指出近年来,由于传统抗生素的滥用,药物残留及耐药性问题日益严重,时刻威胁着人类的健康,寻找新的抗菌药物迫在眉睫。抗菌肽是一类分子量相对较小并由基因编码核糖体合成的生物活性肽[1]。Boman G.等人发现第1个天然抗菌肽天蚕素以来,便开启了抗菌肽研究的黄金时代。随着抗菌肽研究的不断深入,人们发现抗菌肽具有抗菌、抗病毒、抗癌、调节凋亡以及加快伤口愈合的功能。然而,天然抗菌肽的生产成本高、细胞选择性差,限制了天然多肽在临床上的应用[2],另外,(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2019年02期）
陈梦仟,郭帅,孙朋洋,张鹏,王燕[4]（2018）在《大肠杆菌基因工程菌诱导表达重组琼胶酶rAga0917的条件优化》一文中研究指出琼胶酶可催化长链琼脂糖分子内糖苷键水解产生具有生物活性的琼胶寡糖。琼胶酶具有重要的科研和应用价值,从而对琼胶酶的研究也日益增多。为获得基因工程菌株BL21(DE3)ply Ss-p ET28a(+)-Aga0917重组琼胶酶r Aga0917的高效表达条件,本研究通过单因素实验及正交设计探索了种龄、诱导剂浓度、诱导时机、诱导温度和诱导时间对基因工程菌株表达的r Aga0917酶活力的影响。单因素实验结果显示,种龄6 h、诱导剂终浓度0.05 mmol/L、诱导时机4 h、诱导温度25℃、诱导时间16 h时酶活力最高;正交设计结果显示,r Aga0917的最优表达条件组合为:种龄6 h、诱导时机4 h、诱导剂终浓度0.1 mmol/L、诱导温度16℃。对正交设计结果的直观分析和方差分析结果均表明,四个因素对异源表达目的蛋白琼胶酶酶活力影响的顺序为:诱导时机>诱导温度>种龄>诱导剂终浓度。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2018年08期）
潘阳[5]（2018）在《毕赤酵母高效表达Streptomyces sp.FA1木聚糖酶基因工程菌构建及发酵优化》一文中研究指出木聚糖酶是糖苷水解酶[EC 3.2.1.x]的一种,可以将木聚糖水解,生成木糖与低聚木糖。在果蔬加工、面制品加工、低聚木糖制备、造纸印染和动物饲料的初级处理等行业中拥有应用价值。由于木聚糖酶在很多领域应用广泛,高效的发酵生产木聚糖酶对工业化具有实际意义。木聚糖酶基因的来源不同,其结构与性质也有很大差别。本实验室在对木聚糖酶的研究中,从链霉菌Streptomyces sp.FA1中得到了一种归属于糖苷水解酶第十家族的木聚糖酶(XynA)。将其在大肠杆菌中克隆,并进行胞外表达。结果显示有大量的包涵体存在。为了可以高效表达木聚糖酶,本课题在毕赤酵母(P.pastoris)中强化表达XynA,通过构建游离型表达质粒表达与整合表达联合应用来强化XynA分泌效率,提高XynA酶活。主要结果如下:(1)通过PCR得到自主复制序列PARS1和PARS2,构建了pMD18-T-PARS1、pMD18-T-PARS2,酶切验证并测序正确。在此基础上构建pAOX1-PARS与pGAP-PARS系列游离型载体:pPICZαA-PARS1、pPICZαA-PARS2、pGAPZαA-PARS1、pGAPZαA-PARS2,酶切验证并测序正确。(2)将木聚糖酶基因整合到游离型质粒,将游离重组质粒电转导入P.pastoris KM71,构建游离型重组菌:P.pastoris KM71/pPICZαA-PARS1-xynA、P.pastoris KM71/pPICZαA-PARS2-xynA、P.pastoris KM71/pGAPZαA-PARS1-xynA、P.pastoris KM71/pGAPZαA-PARS2-xynA,分泌表达XynA。经过摇瓶培养后,测定重组酶XynA的活力,筛选出最佳的游离型重组菌P.pastoris KM71/pGAPZαA-PARS2-xynA,木聚糖酶活最高达到29.6 U·m L-1。(3)对游离型重组菌在3.6 L罐水平进行发酵过程优化,分别以甘油、葡萄糖、蔗糖、混合碳源(蔗糖:甘油=1:2)作为碳源优化游离型重组菌株表达水平。以BSM培养基进行上罐发酵,50%甘油为最适补料碳源,培养96 h后,最高酶活可达350 U·mL~(-1)。同整合型重组菌P.pastoris KM71/pGAPZαA-xynA相比,表达水平提高了45.9%。(4)在整合表达木聚糖酶的基础上,将含有木聚糖酶基因的游离质粒转入菌株,构建P.pastoris KM71/pPIC9K-xynA/pGAPZαA-xynA,实现双启动子共表达(强化型)。通过摇瓶表达,甲醇诱导144 h后,XynA酶活为202 U·mL~(-1),是单一整合型酶活的1.7倍。重组XynA发酵上清液,经过40%(w/v)的(NH_4)_2SO_4沉淀、透析及Mono S阳离子交换柱纯化。对重组酶的酶学性质定性,结果表明:木聚糖酶的最适温度为60℃,55℃下120 h达到半衰期;最适pH为5.5,pH范围3-11放置24 h,其酶活仍有80%左右;浓度为10 mmoL·L~-11 Fe~(3+)对XynA的活性有抑制作用,Mn~(2+)和Cr~(2+)对Xyn A保留约85%的活性。(5)在3.6 L罐上对强化型菌株进行诱导温度,初始诱导菌浓,甲醇诱导浓度叁个方面优化。最后得到最佳上罐条件为:在28℃,初始菌浓OD_(600)=100,甲醇的浓度为1.5%(v/v),诱导发酵144 h。XynA酶活达到3030 U·m L~(-1),是单一整合型的2.1倍同时强化型重组酶比活相对整合型表达提高了52.4%。为链霉菌来源的GH10家族木聚糖酶在毕赤酵母中表达的最高水平。(本文来源于《江南大学》期刊2018-06-01）
李寒梅[6]（2018）在《重组鲎素Ⅰ基因工程菌的构建表达及其生物学活性的研究》一文中研究指出鲎素Ⅰ(TachyplesinsⅠ,TP-Ⅰ)是存在于东方鲎血细胞中的由17个氨基酸组成的小分子阳离子抗菌肽,结构内含2个二硫键,其二级结构为2个逆向平行的β-折迭通过1个β-转角结构连接。TP-Ⅰ具有强烈的抑杀细菌、真菌、病毒及肿瘤细胞等多种生物活性,被公认为是抗生素潜在替代药物,在医药、畜牧、食品添加剂以及培育农作物新品种等领域均有广阔的应用前景,但由于其获得途径受限制,导致目前并没有规模化TP-Ⅰ商业产品出现。为解决此类问题,本课题以串联TP-I基因为目的基因,利用基因工程技术构建高效表达TP-I的毕赤酵母(Pastoris pichia)真核表达体系,并且对表达产物进行各方面分析。首先,根据文献中已报道的TP-I肽氨基酸序列,分析TP-I多肽结构与其抑杀菌活性的关系、毕赤酵母菌对TP-I多肽的耐受情况等,选择具有17个氨基酸序列的TP-I肽作为目标序列。为实现选择的TP-I抗菌肽在工程菌中的高效表达,设计利用胰肽酶E的特异酶切位点-Ala↓或-Gly↓和羧肽酶A特异性酶切位点(序列C末端氨基酸),连接选定的4肽构成4拷贝串联74肽,根据毕赤酵母菌重组表达偏爱密码子原则,合成重组TP-I肽基因序列,克隆至高效表达载体pGAPZαB上,通过双酶切、PCR以及测序分析,表明成功构建了重组表达载体pGAPZαB-4TP-I。然后,将构建的表达载体pGAPZαB-4TP-I通过电转化方法,转化至宿主毕赤酵母菌GS115中,无需诱导,经YPD培养基摇瓶发酵后,利用Tri-SDS-PAGE电泳技术检测发酵液中产物情况,结果表明构建的4TP-I多肽序列能够在宿主菌中表达。将发酵液经Ni亲和层析柱的吸附与洗脱,洗脱液通过超滤离心管的离心浓宿、胰肽酶E和羧肽酶A酶的酶解等操作,再次进行Tri-SDS-PAGE电泳检测分析,显示在3.3 kDa附近存在与化学法合成的TP-I条带一致的蛋白质条带,证明酶切位点设计的正确。最后,酶解所得TP-I单体经BCA法和RP-HPLC法测定,1 L摇瓶发酵液中TP-I产物含量为27.24~29.53 mg,分别以大肠杆菌、枯草杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌为受试菌,对TP-I单体产物进行抑菌检测,结果显示TP-I单体具有不同程度的抑杀菌活性;另将TP-I单体产物委托公司做高分辨飞行时间质谱分析,得到分子量为2262.85,与设计的17个氨基酸序列分子量大小一致。因此,说明TP-I在毕赤酵母菌GS115表达体系的高效表达具有可行性。(本文来源于《南昌大学》期刊2018-05-28）
谢琦[7]（2018）在《HNP-1的原核基因工程表达和抑菌机制研究》一文中研究指出细菌耐药已成为危害全球公共卫生的严重问题。近年来全球抗生素的使用量不断增加,细菌耐药的发生与传播越来越严重,目前几乎所有的病原菌均呈现出抗生素耐药性,给全球医疗体系带来巨大的经济和社会负担。不幸的是,新型抗生素的开发远远赶不上耐药菌增长的速度,且随着抗生素使用量的大幅增加,出现细菌耐药性的时间也更为短暂。抗菌肽是开发新型抗生素的重要候选者。它们由宿主表达以消除入侵的病原体并增强免疫应答。其中人中性粒细胞蛋白(human neutrophil protein-1,HNP-1)是人中性粒细胞的主要抗菌肽分子,主要存在于人中性粒细胞的溶酶体颗粒内,是迄今发现含量最多的杀菌分子。HNP-1具有广泛的抗菌谱和极强的抗菌活性,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌以及腺病毒、流感病毒、艾滋病毒等均有很强的杀伤活性,有可能成为新一代抗菌药物,有助于解决细菌的耐药性和抗生素的毒副作用等问题。尽管HNP-1有广阔的应用前景,天然获取HNP-1的量极其有限,而化学合成HNP-1则由于其分子内含有3对二硫键,难以保证多肽折迭时正确配对,从而影响其生物活性。因此,研究者尝试通过各种融合表达策略进行基因工程表达,但是效果仍然不理想,很难使HNP-1形成正确的折迭。本课题研究HNP-1在大肠杆菌中有效表达、成熟过程及其杀菌机制,研究内容和结论主要包括以下叁个方面:1.在大肠杆菌BL21(DE3)表达全长HNP-1过程中,会激活产生有杀菌活性的mature HNP-1:(1)用tricine gel体系比较IPTG诱导前、后蛋白表达的差异,发现诱导后蛋白样品在3.4kD附近出现明显的条带,切胶质谱鉴定为mature HNP-1的肽段,并用top-down MS进一步确认了 mature HNP-1生成;(2)随着IPTG诱导时间的延长,mature HNP-1表达量逐渐升高,而对应的活细菌数目却显着减少;(3)根据mature HNP-1分子量较小的特点,采用3kD超滤管对诱导后的全蛋白溶液进行超滤,得到纯化的mature HNP-1蛋白;(4)分别用纯化的preproHNP-1和matureHNP-1加入菌液中检测生长曲线,显示preproHNP-1没有抑菌活性,而mature HNP-1具有抑菌作用。2.HNP-1能够诱发大肠杆菌BL21(DE3)产生细菌程序性死亡:(1)采用非标定量蛋白质组学技术鉴定HNP-1参与抑菌过程的蛋白,根据诱导前、后差异蛋白的功能聚类,并结合文献报道推测HNP-1诱发了细菌程序性死亡过程;(2)TUNEL染色显示HNP-1促进DNA断裂;Annexin V染色显示HNP-1诱导使膜结构发生了显着变化,主要是内膜外翻;扫描电镜结果显示细菌表面产生了大量凋亡样小泡。上述经典表型实验确认HNP-1诱发大肠杆菌细菌程序性死亡过程。3.HNP-1通过和RecA结合,抑制其活性:(1)采用Ni-NTAbeads富集带有His-tag的HNP-1及其相互作用蛋白,经质谱鉴定,结合蛋白功能注释,筛选得到可能和HNP-1相互作用的蛋白RecA;(2)Western blot验证在HNP-1富集的相互作用蛋白溶液中存在RecA表达;又用RecA蛋白抗体富集其相互作用蛋白,在其中同样鉴定到HNP-1,从而正向和反向都确认了两者具有相互作用;(3)随着诱导时间延长,mature HNP-1逐渐替代了 preproHNP1和RecA结合,进一步说明是mature HNP-1和RecA相互结合为主;(4)通过分子对接软件ZDOCK和PyMoL预测RecA和mature HNP-1的结合位点,发现mature HNP-1正好能结合在RecA发挥重组修复活性的位点Asp-161和Ser-162,使RecA不能和DNA结合,抑制其活性;(5)采用体外实验证实加入10 μM mature HNP-1可以显着降低RecA和ssDNA的结合水平,抑制RecA酶活性。通过本项研究,我们发现大肠杆菌不能高效表达全长HNP-1的原因是会激活产生有杀菌活性的mature HNP-1。并通过超滤法获得了纯化的有活性的mature HNP-1,为批量生产mature HNP-1提供了一种操作简单和成本低廉的技术方案。我们的研究还揭示了 mature HNP-1在细菌内的作用靶点RecA。Mature HNP-1可以抑制RecA蛋白和ssDNA结合,从而抑制其SOS修复功能。RecA由于其具有的重要功能,已经成为抗耐药菌治疗的理想靶点。鉴于HNP-1在抑制RecA活性中的重要作用,有望成为新型抗耐药菌药物。(本文来源于《武汉大学》期刊2018-05-01）
蒙新睿[8]（2018）在《纳豆激酶热稳定性的突变及其在基因工程菌中的表达》一文中研究指出在发酵纳豆类食物的过程中,纳豆发酵菌能够生产出一种碱性丝氨酸蛋白酶,即纳豆激酶(Nattokinase,NK)。纳豆激酶能够有效的溶解纤维蛋白(人体内血栓的主要成分),其作为一种新型溶栓类药物或者保健食品,与同类尿激酶等产品相比具有着生产原料价格低廉、安全性高等优势,具有广阔的市场前景。在纳豆激酶工业生产过程中,由于蛋白质分子的结构的破坏会出现热损耗高、酶活性低等现象。通过分子生物学手段,对纳豆激酶进行改造以提高其热稳定性和酶活性,以获得适应纳豆激酶大规模工业化生产的基因工程菌。本实验选择使用pET-26b原核表达载体,分别构建了含有纳豆激酶成熟肽、前导肽+成熟肽的原核表达载体,并将其转化到大肠杆菌BL21中。在经过IPTG诱导表达后,离心收集菌体,超声破碎菌体,SDS-PAGE检测蛋白表达。纤维蛋白板法检测表达蛋白的酶活。结果显示,纳豆激酶成熟肽及前导肽+成熟肽在大肠杆菌中均可成功表达;成熟肽表达的上清液和沉淀,均未表现出纤溶活性;前导肽+成熟肽表达的上清液表现出纤溶活性,而沉淀未表现出纤溶活性。通过文献阅读和生物信息学预测,筛选出166位甘氨酸,xxx(具体位点涉及保密内容,暂不公布)位丝氨酸可能对纳豆激酶热稳定性产生影响。利用重迭延伸PCR技术将166位甘氨酸突变为精氨酸、xxx位丝氨酸突变为脯氨酸。分别构建了原核表达载体pET-26b-NKt166、pET-26b-NKtxxx,并转入大肠杆菌BL21中。在经过IPTG诱导表达后,离心收集菌体,超声破碎菌体,SDS-PAGE检测蛋白表达。纤维蛋白板法检测表达蛋白的酶活。结果显示,NKt166和NKtxxx在大肠杆菌中均可成功表达;NKt166表达的上清液和沉淀,均未表现出纤溶活性;NKtxxx表达的上清液表现出纤溶活性,而沉淀未表现出纤溶活性。经过不同温度处理后,同野生型相比,NKtxxx的热损失率降低了15.23%,而且其完全失活温度从63℃提高至65℃;同时,其纤溶活性提高了18.10%。本实验选用高效毕赤酵母表达载体pGAPZα-a,构建了含有纳豆激酶前导肽+成熟肽的真核表达载体pGAPZα-a-NKt,并转入毕赤酵母x-33中,在经过甲醇诱导表达后,收集上清液,SDS-PAGE检测蛋白表达。纤维蛋白板法检测表达蛋白的酶活。结果显示,NKt在毕赤酵母x-33中能够表达一种分泌型蛋白,纤维蛋白平板显示其上清液中蛋白不具有纤溶活性。(本文来源于《辽宁大学》期刊2018-05-01）
杜圣杰[9]（2018）在《拜氏梭菌CoA转移酶过表达基因工程菌的构建及其发酵性能的研究》一文中研究指出丁醇作为最具潜力的新型清洁燃料之一具有热值与汽油相当、容易运输、燃烧无污染等优点。在丁醇的各种生产方法中,微生物发酵法(ABE发酵)因具有环保清洁、不需要使用催化剂、反应条件温和等优势而成为主要研究方法。拜氏梭菌(Clostridium beijerinckii NCIMB 8052)具有底物适应谱广、遗传性状稳定等优点,是ABE发酵的常用菌株,但是,其丁醇产量低是一直没有突破的瓶颈,而CoA转移酶是启动梭菌溶剂合成途径的关键酶,在梭菌中过表达该酶对提升梭菌的丁醇产量具有重要意义。因此,本文利用课题组保藏的C.beijerinckii NCIMB 8052,构建了CoA转移酶过表达基因工程菌,并对其进行了发酵性能分析。主要研究结果如下:(1)构建了CoA转移酶过表达基因工程菌。设计了CoA转移酶基因ctfAB特异性引物,以C.beijerinckii NCIMB 8052基因组为模板,扩增得到了ctfAB片段,将其与pMD-19T进行了连接,完成了T/A克隆,测序验证无误后,将经过Bsr GI和HindIII双酶切的ctfAB片段和载体pMTL007进行了连接,构建了CoA转移酶过表达载体pMTL007-ctfAB,并将其电转化入C.beijerinckii NCIMB 8052中,通过菌落PCR和SDS-PAGE电泳验证实验,证实CoA转移酶过表达基因工程菌构建成功;(2)对工程菌进行了发酵性能分析。工程菌和野生菌进行了分批摇瓶发酵,分别对两者的发酵液pH值、发酵液残糖量、菌体生物量和溶剂产量进行了检测,结果发现:工程菌提前进入产溶剂期,其pH值比野生菌提前出现上升趋势;在发酵12-24h这一时段内,工程菌的糖消耗速率比野生菌提高15%,工程菌最终发酵液残糖量比野生菌降低43.3%;发酵进行到18 h时,工程菌进入稳定期,野生菌则继续生长,生长速度超过工程菌,野生菌的最大菌体生物量大于工程菌;工程菌最高丁醇产量达11.53±0.63 g/L,比野生菌提高4.5%,总溶剂最高产量达16.84±0.77 g/L,比野生菌提高4.2%。本研究成功构建了C.beijerinckii NCIMB 8052的CoA转移酶过表达基因工程菌,为在C.beijerinckii NCIMB 8052中进一步开展CoA转移酶的研究提供了一种可能,也为提高ABE发酵的丁醇产量提供了一种途径。(本文来源于《华中科技大学》期刊2018-05-01）
李琴[10]（2018）在《重组尿酸酶基因工程菌的构建与表达及应用模型的筛选》一文中研究指出高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)是以尿酸(uric acid,UA)升高为主要特征的一组疾病,不仅引起痛风,而且有研究表明HUA可能是胰岛素抵抗、血脂异常、高血压、脂肪肝、慢性肾病等多种代谢相关性疾病和心血管疾病发生发展的独立危险因素;且血清尿酸(serum uric acid,SUA)升高伴发的相关危害程度的广泛性,已经成为威胁全人类生活质量的一大健康隐患,对于HUA的防治和基础研究已成为热点之一。目前研究显示,致HUA的主要原因是,UA排泄减少;UA是人体内嘌呤代谢的终产物,在正常状态下,体内2/3的UA经肾脏排泄,约1/3的UA经肠道排泄。但是由于UA自身有限的水溶性,使其在通过肾脏的排泄时易引起泌尿系尿酸性结石;且目前临床上,治疗HUA和痛风的药物副作用极大;增加肠道的尿酸排泄量,为人类降低SUA提供了新的思路。尿酸酶能催化UA分解为CO_2、H_2O_2和尿囊素,而人类尿酸酶基因在进化过程中存在无义突变,机体缺乏该酶,使人体内UA不能进一步氧化分解,在某些病理情况下,由于嘌呤代谢紊乱,血液中UA积累过多,会导致HUA,继而引发痛风。本实验拟构建携带尿酸酶基因的工程菌株,并在尿酸酶N端引入信号肽使其在细胞外进行表达,加速肠道UA的分解,发挥降UA作用;同时建立不同类型的HUA大鼠模型,为后续工程菌株的应用奠定基础。1.构建重组尿酸酶表达菌株。以本实验保存载体(携带尿酸酶基因)为模板,PCR扩增suox(SPA信号肽+尿酸酶编码基因),并将其克隆至pMG36e(大肠杆菌-乳酸菌的穿梭载体)中,即pMG36e-suox。同时合成spo(乳酸菌信号肽)将其与uox(尿酸酶基因)连接后克隆至pMG36e中,即pMG36e-spo-uox。测序鉴定两种载体。测序结果与GenBank查询结果一致。2.重组尿酸酶的表达。将测序正确的含pMG36e-spo-uox、pMG36e-suox的BL菌株,扩大培养后,分别检测两表达载体于不同时间点在周质空间、上清液及包涵体蛋白表达量。结果pMG36e-spo-uox、pMG36e-suox成功在细胞外表达,且在9h获得最大表达量。3.单纯果糖喂养和氧嗪酸钾联合果糖建立高尿酸血症大鼠模型的比较研究。利用随机数字表法,将60只雄性SD大鼠平均分为6组,即5%Fru组(单用5%浓度的果糖喂养)、5%FPO组(用5%果糖+氧嗪酸钾处理)、10%Fru(单用10%果糖喂养)、10%FPO组(10%果糖水+氧嗪酸钾处理)、PO组(单用氧嗪酸钾处理)、Con组(空白对照组,单用清水饲喂);实验建模14w;每周检测大鼠SUA、血清尿素氮(serum urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serum Creatinine,SCr)水平,并在实验结束后,采集大鼠肝肾组织,观察其组织学变化情况。结果在较短时间内,5%Fru组、10%FPO组、10%FPO组均能迅速升高SUA(P<0.01);10%Fru组SUA水平不稳定,在第10w、11w SUA水平明显下降,显着低于5%FPO组、10%FPO组(P<0.01)。在第6w,10%果糖处理组BUN水平开始升高(P<0.01),在第7w SCr水平开始升高(P<0.01)。10%果糖处理组可见肾脏组织学改变,5%FPO组偶见轻微肾脏组织学改变,其余各组未见肾脏组织学改变;未见各组大鼠肝脏有明显组织学变化。果糖联合氧嗪酸钾能够快速建立稳定的HUA大鼠模型,不同浓度果糖对肾脏改变状态不同,根据后续研究需要选择相应的模型。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2018-05-01）
基因工程表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,CP)常见于哺乳动物和禽类的胃肠道中,是一种条件性致病菌,外毒素是其主要的致病因子,且多具有致死性。根据CP所产外毒素α、β、ε和ι的不同,将CP分为A、B、C、D、E 5个毒素型,其中外毒素α是CP最为重要的致病性毒素之一,各毒素型CP均可分泌。A型CP只产生外毒素α,可引起牛、羊等多种动物坏死性肠炎和肠毒血症,同时还可引起人食物中毒,是危害畜牧业发展和人类健康的重要病原菌之一。目前,对该细菌病的防控主要以抗生素为主,但随着抗菌药物的广泛应用,多重耐药
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
基因工程表达论文参考文献
[1].刘琼,陈宏亮,姜延龙,王春凤.基因工程乳酸菌作为活载体表达外源蛋白及疾病防治研究进展[J].中国兽医杂志.2019
[2].Gao,Xu-wen,Ma,Ying-ying,Wang,Zhuo.表达产气荚膜梭菌α类毒素的基因工程乳酸菌:一种有潜力的口服疫苗候选[J].中国预防兽医学报.2019
[3].朱春玲,李梅,刘丽,刘少龙,夏小静.抗菌肽基因工程表达载体的研究进展[J].中国兽医杂志.2019
[4].陈梦仟,郭帅,孙朋洋,张鹏,王燕.大肠杆菌基因工程菌诱导表达重组琼胶酶rAga0917的条件优化[J].基因组学与应用生物学.2018
[5].潘阳.毕赤酵母高效表达Streptomycessp.FA1木聚糖酶基因工程菌构建及发酵优化[D].江南大学.2018
[6].李寒梅.重组鲎素Ⅰ基因工程菌的构建表达及其生物学活性的研究[D].南昌大学.2018
[7].谢琦.HNP-1的原核基因工程表达和抑菌机制研究[D].武汉大学.2018
[8].蒙新睿.纳豆激酶热稳定性的突变及其在基因工程菌中的表达[D].辽宁大学.2018
[9].杜圣杰.拜氏梭菌CoA转移酶过表达基因工程菌的构建及其发酵性能的研究[D].华中科技大学.2018
[10].李琴.重组尿酸酶基因工程菌的构建与表达及应用模型的筛选[D].重庆医科大学.2018