导读:本文包含了非必需片段论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:片段,病毒,序列,基因,转染,万钧,论文。
非必需片段论文文献综述
施程洪[1]（2007）在《减毒羊痘病毒基因复制非必需片段的筛选与鉴定》一文中研究指出羊痘(山羊痘和绵羊痘)是由羊痘病毒(Capripoxvirus,CPV)感染山羊和绵羊等偶蹄动物引起的一种急性、热性、接触性传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列为A类传染病,我国将其列为一类传染病。当前痘病毒活载体疫苗的研究是一个热点。痘病毒因其具有特异性,含有大量的复制非必需片段可以插入大片段的外源基因等特点而引起了研究者的高度重视。羊痘病毒基因组全长150Kb,基因组结构相当庞大,含有多个复制非必需区,可以供多种免疫源基因的插入,进而构建成双价、多价疫苗。而构建羊痘病毒活载体疫苗,其首要的工作就是要进行复制非必需片段的筛选。本研究通过随机克隆的方法,将提纯后的羊痘病毒基因组HindⅢ酶切,随机克隆到pUC18质粒中。通过限制性内切酶片段电泳分析和序列测定分析结果表明,克隆得到6个不同大小的HindⅢ片段PUA、PUB、PUC、PUD、PUE、PUF。将它们和Genebank中登录的羊痘野毒株Pellor(AY077835)株进行同源性比较,核苷酸同源性达到90%以上。选取克隆或亚克隆后的单一的酶切位点,插入P_(11)P_(7.5)-LacZ报告基因构建了PUA1、PUB1、PUC1、PUD1、PUE1、PUF1六个重组载体质粒,转染羊痘病毒感染的BHK-21细胞。在X-gal存在条件下通过蓝白斑筛选重组病毒的方法,筛选出了1个复制非必需片段,为进一步构建表达外源片段重组质粒载体奠定了基础。(本文来源于《新疆农业大学》期刊2007-05-01）
何秀苗,秦爱建,刘岳龙,金文杰[2]（2004）在《禽腺病毒江苏株(JS)复制非必需片段的确定》一文中研究指出利用PCR方法从一株Ⅰ群禽腺病毒的分离物 (FAVI JS)中扩增出其基因组的两个末端L片段和r片段、ITR片段 ,并分别克隆进pGEM Teasy载体 ,然后将L片段、r片段和ITR片段同时克隆进pHC粘粒载体中 ,获得质粒pHC FAVI r ITR L ,再在该克隆片段中插入增强型绿色荧光蛋白 (eGFP)基因 ,获得转移质粒载体pFAVI eGFP。将pFAVI eGFP转染已被该野生型Ⅰ群禽腺病毒分离物感染了的鸡胚肾细胞进行同源重组 ,通过无限稀释法筛选重组病毒 ,结果获得了表达增强型绿色荧光蛋白的重组Ⅰ群禽腺病毒rFAVI eGFP ,证明位于基因组右末端r片段和ITR片段之间的位点为病毒复制非必需区 ,为禽腺病毒的重组基因工程疫苗的研究奠定了基础(本文来源于《微生物学报》期刊2004年03期）
彭大新,刘秀梵,吴艳涛,高崧,朱爱华[3]（2000）在《鸡痘病毒载体复制非必需片段优化及强启动子的筛选》一文中研究指出以痘苗病毒启动子P7．5调控的β-半乳糖苷酶（LacZ）基因为检测基因，分别插入叁个复制非必需片段构成重组质粒，脂质体介导转染鸡痘病毒中国疫苗株282E4感染原代鸡胚成纤维细胞（CEF）单层，蓝斑筛选纯化病毒；将重组病毒感染次代CEF收获细胞后制备提取物，检测其中的β-半乳糖苷酶的活性，由此得到一个基因表达效率高的复制非必需片段pFPV7s。根据痘苗病毒天然启动子P7．5的结构，人工合成4条寡核苷酸，形成一个早期和一个晚期启动子，将合成的启动子进行不同组合，最终形成10个较有代表性的启动子组合；以P7．5为对照，在其下游分别插入大肠杆菌β-半乳精苷酶基因LacZ，并进一步插入pFPV7s构建成鸡痘病毒转移载体，以同样的方法检测β-半乳糖苷酶的活性，得到了表达活性约为p7．5的3．5倍的LLEE启动子组合。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2000年02期）
司兴奎,金宁一,顾万钧,马凤龙,郭志儒[4]（1999）在《鸡痘病毒282E4株Bam HIFa、Fb、Fc片段非必需区筛选与序列分析》一文中研究指出将亚克隆获得的分别含有鸡痘病毒（ Ｆ Ｐ Ｖ） Ｂａｍ Ｈ Ｉ相应片段的 ｐ Ｕ Ｆａ、ｐ Ｕ Ｆｃ 和 ｐ Ｕ Ｆｄ ３ 个质粒的单酶切位点，插入 Ｐ１１ Ｐ７．５ Ｌａｃ Ｚ报告基因盒，构建成 ｐ Ｕ Ｆａ１、ｐ Ｕ Ｆｃ１ 和 ｐ Ｕ Ｆｄ１ ３ 个重组载体质粒，在脂质体存在条件下，同 Ｆ Ｐ Ｖ 共同转染鸡胚成纤维细胞（ Ｃ Ｅ Ｆ），９６ ｈ 后在 Ｘｇａ１ 存在条件下挑选蓝色重组病毒空斑，经３ 次空斑纯化和传代，获得 １ 株可稳定表达 β半乳糖苷酶的重组病毒，并对该重组用质粒作了序列分析。(本文来源于《中国兽医学报》期刊1999年04期）
彭大新,王志亮,张如宽,文其乙,刘秀梵[5]（1995）在《鸡痘病毒基因组DNA复制非必需片段的鉴定》一文中研究指出将中国鸡痘病毒鹌鹑化弱毒株（２８２Ｅ４）蚀斑纯化，在ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞上增殖后，经超声波裂解，蔗糖梯度离心得到纯化病毒，以蛋白酶Ｋ消化，酚：氯仿、氯仿和水饱和乙醚抽捉，乙醇沉淀，得到ＦＰＶ基因组ＤＮＡ，后用ＥｃｏＲｌ消化，随机克隆到ｐＵＣ１８质粒中。限制性内切酶片段电泳分析结果表明，克隆到１０个不同大小的片段，根据酶切图谱分析，选取克隆或亚克隆后的单一酶切位点，插入标记基因（Ｐ１１一ＩａｃＤ筛选出３个复制非必需片段。为进一步构建表达外源片段重组质粒载体创造了良好的条件。(本文来源于《江苏农学院学报》期刊1995年04期）
顾万钧,金宁一,周复春,毛春生,殷震[6]（1995）在《鸡痘病毒282E_4株基因7．3kbBamHI非必需片段酶谱分析和鉴定》一文中研究指出鸡痘病毒２８２Ｅ＿４株基因７．３ｋｂＢａｍＨＩ非必需片段酶谱分析和鉴定顾万钧，金宁一，周复春，毛春生，殷震（农牧大学军事兽医研究所长春１３００６２）鸡痘病毒（ＦＰＶ）基因组长达３００ｋｂ，其中存在着广泛的非必需区，可以重组插入几个或多个外源基因，适于...(本文来源于《中国兽医学报》期刊1995年02期）
非必需片段论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
利用PCR方法从一株Ⅰ群禽腺病毒的分离物 (FAVI JS)中扩增出其基因组的两个末端L片段和r片段、ITR片段 ,并分别克隆进pGEM Teasy载体 ,然后将L片段、r片段和ITR片段同时克隆进pHC粘粒载体中 ,获得质粒pHC FAVI r ITR L ,再在该克隆片段中插入增强型绿色荧光蛋白 (eGFP)基因 ,获得转移质粒载体pFAVI eGFP。将pFAVI eGFP转染已被该野生型Ⅰ群禽腺病毒分离物感染了的鸡胚肾细胞进行同源重组 ,通过无限稀释法筛选重组病毒 ,结果获得了表达增强型绿色荧光蛋白的重组Ⅰ群禽腺病毒rFAVI eGFP ,证明位于基因组右末端r片段和ITR片段之间的位点为病毒复制非必需区 ,为禽腺病毒的重组基因工程疫苗的研究奠定了基础
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
非必需片段论文参考文献
[1].施程洪.减毒羊痘病毒基因复制非必需片段的筛选与鉴定[D].新疆农业大学.2007
[2].何秀苗,秦爱建,刘岳龙,金文杰.禽腺病毒江苏株(JS)复制非必需片段的确定[J].微生物学报.2004
[3].彭大新,刘秀梵,吴艳涛,高崧,朱爱华.鸡痘病毒载体复制非必需片段优化及强启动子的筛选[J].农业生物技术学报.2000
[4].司兴奎,金宁一,顾万钧,马凤龙,郭志儒.鸡痘病毒282E4株BamHIFa、Fb、Fc片段非必需区筛选与序列分析[J].中国兽医学报.1999
[5].彭大新,王志亮,张如宽,文其乙,刘秀梵.鸡痘病毒基因组DNA复制非必需片段的鉴定[J].江苏农学院学报.1995
[6].顾万钧,金宁一,周复春,毛春生,殷震.鸡痘病毒282E_4株基因7．3kbBamHI非必需片段酶谱分析和鉴定[J].中国兽医学报.1995
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