导读:本文包含了溶菌酶蛋白质论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:检测信号,响应性聚合物刷,毛细管电泳,溶菌酶
溶菌酶蛋白质论文文献综述
侯明心[1]（2019）在《可逆吸附-释放蛋白质的PMOXA/PAA响应性涂层用于毛细管电泳放大溶菌酶的检测信号》一文中研究指出毛细管电泳仪(CE)因其较快的分析速度和较高的分析效率,被广泛地用于蛋白质的检测中。但是商用CE一般配备紫外检测器(UV-detector),这种检测器由于检测光程短,同时CE本身样品用量少,导致样品检测灵敏度低,因此商用CE对痕量蛋白质的检测困难。提高UV检测器灵敏度的方法主要有3大类,一是通过改变检测器的几何形状以增加光程来提高检测灵敏度,但该方法提高检测灵敏度的程度有限,并且检测池设计困难不利于应用推广;二是在用CE分析前对被测样品进行浓缩,该方法又称为线下样品富集,即样品在进行CE分析前,需要经过过滤、离心分离、蒸馏等步骤以增加浓度,这种方法一方面前处理步骤复杂,另一方面需要消耗大量的有机溶剂,容易对环境造成污染。叁是CE在线富集技术,即在CE分析的过程中通过改变分析物的迁移速度,实现对分析物的浓缩,主要包括动态pH界面(dynamic pH junction)、样品堆积(sample stacking)、吹扫(sweeping)、瞬时等速电泳(transient isotachophoresis,t-ITP)等[2-8],这些方法虽然能够提高CE的检测灵敏度,但是在应用过程中仍具有局限性。本文将可控吸附-释放蛋白质的聚(2-甲基-2-恶唑啉)(poly(2-methyl-2-oxazoline),PMOXA)和聚丙烯酸(poly(acrylic acid),PAA)的智能涂层(PMOXA/PAA)用于CE中,在线富集溶菌酶。首先制备末端带氨基的PMOXA(PMOXA-NH2)和末端带巯基的PAA(PAA-SH),之后利用聚多巴胺(poly(dopamine),PDA)的黏附性能成功制备出PDA/PMOXA/PAA混合刷涂层。电渗流的实验和荧光实验的结果说明PDA/PMOXA/PAA混合刷涂层表面的电荷量对不同pH和离子强度(ionic strength,I)的磷酸缓冲液具有响应性;PDA/PMOXA/PAA混合刷涂层在pH 7.0(I=10-5 M)可以吸附大量溶菌酶,在pH 3.0(I=10-1M)时涂层会释放之前吸附的溶菌酶。PDA/PMOXA/PAA涂层的这种可控吸附-释放蛋白质的性能用于CE中,在线提取并富集溶菌酶。在PDA/PMOXA/PAA涂层毛细管中(PAA链长是PMOXA链长的1.56倍),用在线富集方法得到的检测信号(溶菌酶吸收峰的峰面积)是用未修饰的毛细管在普通CE分离实验中的26倍。并且该方法分析溶菌酶的最低检测限为4.5×10-9 mg/mL,相比于在未修饰的毛细管中用普通CE法,检测灵敏度提高了1×105倍。(本文来源于《中国科学技术大学》期刊2019-05-09）
李喆[2]（2017）在《溶菌酶蛋白质内部空间远程相关性研究》一文中研究指出蛋白质是生命不可或缺的物质基础,也是生命活动的主要承担者。因其对于生命的重要性,人们对蛋白质的研究热情从未衰减,其中蛋白质的结构与功能一直都是科学领域的研究热点。研究蛋白质构象空间对于研究蛋白质结构和功能的关系来说是极其重要的,不同构象之间的动力学信息也是研究蛋白质结构和功能关系的重要的宝贵数据来源。动力学上的结构相关性是蛋白质别构效应的基础,绝大多数生物学相关的别构效应在空间上是远程的。了解结构相关性,尤其是在空间远程的相关性,对阐明蛋白质别构机制并操纵蛋白质别构是非常必要的。本篇论文以溶菌酶蛋白质HEWL(Hen Egg White Lysozyme)在自然折迭状态下的长时间分子动力学模拟轨迹为数据来源,分析了HEWL蛋白质内部空间远程相关性,并对可能的别构效应调节位点进行预测,形成了一套蛋白质内部空间远程相关性的计算分析方法。首先,分析了HEWL蛋白质的主链二面角的分布情况,由于蛋白质结构非常稳定,大多数主链二面角只有一种主要状态,但存在着部分主链二面角有两种及以上的主要状态,这些主链二面角的所在位置可能是蛋白质别构效应的关键位点。接下来计算了主链二面角之间的循环相关系数、互信息以及距离,分析了主链二面角之间的远程相关性,确定互信息对于分析HEWL蛋白质内部相关性更具优势,并探究了互信息与二级结构、距离之间的关系。发现较强的远程相关性主要存在于蛋白质结构的loop区之间。进一步的,依据某一个主链二面角的两种不同的状态将轨迹中的结构数据分为两个子集,计算了子数据集之间的互信息差异,发现两个主链二面角之间的相关性会受第叁个主链二面角的影响,而它们在空间上可能相距较远;通过作出互信息差异在主链二面角之间的距离上的分布图,进一步分析了互信息差异与距离的关系,一些二面角虽然距主链二面角对距离较远,但仍能影响主链二面角对的相关性。为了更好的阐释第叁个主链二面角对于主链二面角对之间相关性的影响,计算了每叁个主链二面角之间的交互信息,分析了叁个主链二面角之间的空间远程相关性,并且与子数据集相关性分析相比,该方法对于分析叁者之间的相关性更加可靠。接下来将分析对象从主链二面角延伸到残基,计算了每两个残基之间的互信息,分析了残基之间的空间远程相关性。最后,基于主链二面角和残基的空间远程相关性分析,本文对可能的别构效应调节位点进行预测,并与已知位点位置比对。分析蛋白质内部的相关性可以进一步构建蛋白质相关性网络模型,进而更准确的预测蛋白质别构效应的调节位点以及优化蛋白质设计。(本文来源于《吉林大学》期刊2017-06-01）
林晨[3]（2017）在《溶菌酶蛋白质结晶过程中成核的研究》一文中研究指出蛋白质药物是未来药物的发展方向,相比目前广泛使用的液体给药方式,晶体形式的给药方式有药物稳定性好、药物有效成分浓度高以及容易实现药物的可控性释放等优点。但是,目前的150多种生物药中,以晶体形式生产和给药的生物药只有胰岛素。主要原因是蛋白质的结晶过程比小分子的结晶过程更为复杂,更难以实现与控制。而成核作为蛋白质结晶过程的基础,很少对其有详细的研究,但该过程对晶体产品的性质具有决定性的作用。因此,充分了解成核过程及原理对蛋白质结晶过程的控制,获得理想结构以及尺寸的蛋白质晶体药物具有重要的意义。本研究的目的是探究蛋白质的成核过程,主要是探究一种能精确测量成核速率的方法与技术,并对成核溶液中聚集体的行为进行探究。一方面可用于指导结晶过程,提高蛋白质药物结晶的成功率,另一方面可以丰富对蛋白质结晶过程的研究。本文以母鸡蛋清溶菌酶(HEWL)为研究对象,具体研究内容如下:热力学方面,采用紫外分光光度计法测量了HEWL在不同实验条件下的溶解度。并以溶解度数据为基础,采用浊度法测量了HEWL在不同实验条件下的介稳区。溶解度和介稳区作为热力学基础数据,是研究成核过程的基础。动力学方面,首先,采用浊度法测量了HEWL在不同过饱和度条件下的成核诱导期,并作出HEWL的成核自由能图。表明过饱和度越高成核能障越低,有利于成核,同时也说明了要形成稳定的晶核必须要跨过成核能障。其次,主要是采用林肯热台和显微镜系统实时连续观测HEWL溶液和NaCl溶液混合后溶液的方法,并连续采集了一定体积液滴中晶体数随时间变化的图像,得到了成核速率随HEWL初始过饱和度变化的曲线。实验表明,可以通过调节HEWL溶液的初始过饱和度将成核从生长过程中分开,而获得成核速率。并用经典成核理论对测量得到的成核速率进行分析,结果表明当HEWL初始过饱和度较低时,非均相成核占主导地位,当HEWL初始过饱和度较高时,均相成核占主导地位。最后,采用动态光散射(DLS)测量了不同实验条件下HEWL成核溶液中聚集体的变化行为。观察蛋白质成核溶液中分子团簇的演变过程,并用两步成核理论对该演变过程进行验证,进一步深入了解了成核过程。(本文来源于《华南理工大学》期刊2017-05-04）
盖青青,屈锋[4]（2015）在《牛血清白蛋白和溶菌酶为双模板蛋白质的表面印迹聚合物的制备及吸附性能》一文中研究指出采用反应条件温和的原子转移自由基聚合法(ATRP),以N-异丙基丙烯酰胺(NIPAAm)和丙烯酰胺(AAm)为功能单体,以N-(3-二甲氨基丙基)甲基丙烯酰胺(DMAPMA)为辅助功能单体,制备了以牛血清白蛋白(BSA)和溶菌酶(Lyz)为双模板蛋白质的表面印迹聚合物(Bi-MIP)。对印迹过程中辅助功能单体的量进行了考察,结果表明,在单一蛋白质溶液和混合蛋白质溶液中,当DMAPMA为20μL时,制备的Bi-MIP对模板蛋白质BSA和Lyz有较好的吸附容量与选择性。通过静态吸附实验考察了Bi-MIP的吸附性能,并结合Langmuir吸附模型得到聚合物对模板蛋白质BSA和Lyz的最大吸附容量分别为10.2mg/g和19.2mg/g。且该印迹聚合物在实际样品中对模板蛋白质也表现出较强的吸附能力和较高的选择性。该方法将为复杂生物样品中同时对双/多种目标蛋白质的识别提供一种新的途径。(本文来源于《色谱》期刊2015年05期）
李勇,赵宁宁,高婷婷,周邦维,柳阳[5]（2014）在《蛋白质生态营养提高工业养殖大菱鲆幼鱼免疫力的效应和溶菌酶mRNA相对表达量》一文中研究指出在本课题组前期研究基础上,为探寻蛋白质生态营养饲粮对工业化海水养殖大菱鲆生长、水氨氮、免疫机能及溶菌酶基因表达的影响,选用体质量为145.08±5.60 g大菱鲆(Scophthatmus maximus L.)幼鱼,在工业化封闭循环水养殖条件下,进行以饲粮蛋白质含量为唯一变量的单因素随机动物实验,即4种蛋白水平处理(41%、46%、50%、55%;以Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组表示),每处理3个重复,每重复12尾鱼,试验为74天。结果表明:(1)试验鱼增重率随饲粮蛋白质含量升高而提高,中高蛋白水平(Ⅲ、Ⅳ组)增重率分别极显着或显着高于Ⅰ、Ⅱ组18.46%~65.75%;饲料系数则相应下降,Ⅲ、Ⅳ组分别极显着低于Ⅰ组21.15%~27.73%(P<0.01);(2)Ⅳ组试鱼氨氮排泄率在早晨摄食6 h后极显着高于其他叁组18.00%—35.03%(P<0.01);随着蛋白含量增加,大菱鲆氨氮排泄率先缓增后趋于平稳,待蛋白含量超过50%时,鱼氨氮排泄率急剧增加;(3)血清酸性磷酸酶(ACP)及溶菌酶(LYZ)活力随饲粮蛋白水平提高先升后降,Ⅲ组LYZ活力极显着高于Ⅰ组31.92%(P<0.01),显着高于Ⅱ组18.72%(P<0.05);血清丙二醛(MDA)随蛋白水平提高显着降低,Ⅳ组分别极显着低于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组13.26%~31.61%;血清过氧化物歧化酶(SOD)活力及补体C3含量,随蛋白含量增加而提高,但各组间差异不显着。(4)随饲粮蛋白水平增加,肝脏及头肾组织溶菌酶活力均显着提高,但蛋白水平50%以上时酶活力增加趋势减缓;c-型溶菌酶mRNA相对表达量主要在肝脏进行,而g-型主要在脾脏进行;随蛋白质水平增加,叁个组织中c-型溶菌酶转录水平相应提高(肝脏中提高1.16~1.37倍;脾脏提高1.52~1.64倍;头肾提高1.07 1.14倍);但g-型转录水平则在50%蛋白水平时增长最高(肝脏中提高1.15—1.20倍;脾脏中提高1.50~2.13倍;头肾中提高1.22~1.28倍)。可见,饲粮蛋白质营养在生化与基因转录层面上均影响大菱鲆幼鱼溶菌酶活力,且中等蛋白水平(50%含量)的效应最优;同时g-型溶菌酶活力更具免疫变化代表性。本研究结果表明,饲粮中、高蛋白质含量显着促进大菱鲆幼鱼的生长性能,但高蛋白组对水环境污染显着加大,而中蛋白组更利于幼鱼重要免疫机能发挥、溶菌酶基因表达和成活率提高。因此,饲粮中等蛋白质含量可谓其生态营养需要水平,更适宜于工业化循环水养殖大菱鲆幼鱼的健康生长。(本文来源于《第七届中国饲料营养学术研讨会论文集》期刊2014-10-16）
李让,鲁军,陈剑婷,袁悦,田漫[6]（2014）在《超声波辅助溶菌酶酶解提取地木耳蛋白质工艺优化》一文中研究指出以优化地木耳蛋白质提取工艺为目的,研究地木耳的酶解、冻融及超声法联合破碎细胞的提取工艺,将蛋白质提取率作为考察指标,选取料液比、提取时间和提取功率3个主要因素对工艺条件进行优化。采用响应面分析(RSA)方法预测出地木耳蛋白质得率的回归模型;对回归模型进行分析,确定优化工艺条件为:时间27.5min、功率1 000W、料液比1∶42(m∶V),该条件下的蛋白质提取率为17.24%,显着高于常规提取方法。(本文来源于《食品与机械》期刊2014年05期）
李勇,高婷婷,周邦维,柳阳,王晓晨[7]（2013）在《蛋白质生态营养提高工业养殖大菱鲆幼鱼免疫力的效应和溶菌酶mRNA相对表达量》一文中研究指出在工业化封闭循环水养殖条件下,设计4种蛋白质梯度水平(41%、46%、50%、55%,即I、II、III、IV组)饲料饲喂大菱鲆幼鱼(145.08±5.60 g)74 d。结果表明:(1)增重率随日粮蛋白质含量升高而提高,中高蛋白水平(III、IV组)增重率分别极显着或显着高于I、II组18.46%~65.75%;饲料系数则相应下降,III、IV组分别极显着低于I组21.15%~27.73%;(2)IV组试鱼氨氮排泄率在早晨摄食6小时后极显着高于其他叁组18.00%-35.03%;随着蛋白含量增加,大菱鲆氨氮排泄率先缓增后趋于平稳,待蛋白含量超过50%时,鱼氨氮排泄率急剧增加;(3)血清酸性磷酸酶及溶菌酶活力随日粮蛋白水平提高先升后降,III组LYZ活力极显着高于I组31.92%,显着高于II组18.72%;血清丙二醛随蛋白水平提高显着降低,IV组分别极显着低于I、II、III组13.26%~31.61%;血清过氧化物歧化酶活力及补体C3含量,随蛋白含量增加而提高,但各组间差异不显着。(4)随日粮蛋白水平增加,肝脏及头肾组织溶菌酶活力均显着提高,但蛋白水平50%以上时酶活力增加趋势减缓;c-型溶菌酶mRNA相对表达量主要在肝脏进行,而g-型主要在脾脏进行;随蛋白质水平增加,叁个组织中c-型溶菌酶转录水平相应提高(肝脏中提高1.16-1.37倍;脾脏提高1.52-1.64倍;头肾提高1.07-1.14倍);但g-型转录水平则在50%蛋白水平时增长最高(肝脏中提高1.15-1.20倍;脾脏中提高1.50-2.13倍;头肾中提高1.22-1.28倍)。可见,日粮蛋白质营养在生化与基因转录层面上均影响大菱鲆幼鱼溶菌酶活力,且中等蛋白水平(50%含量)的效应最优;同时g-型溶菌酶活力更具免疫变化代表性。结果表明,日粮中、高蛋白质含量显着促进大菱鲆幼鱼的生长性能,但高蛋白组对水环境污染显着加大,而中蛋白组更利于幼鱼重要免疫机能发挥、溶菌酶基因表达和成活率提高。因此,日粮中等蛋白质含量可谓其生态营养需要水平,更适宜于工业化循环水养殖大菱鲆幼鱼的健康生长。(本文来源于《第九届世界华人鱼虾营养学术研讨会论文摘要集》期刊2013-11-12）
李勇,高婷婷,张家国,柳阳,周邦维[8]（2012）在《蛋白质营养对工业化养殖大菱鲆幼鱼生长、消化、免疫及溶菌酶基因表达的研究》一文中研究指出本论文试验以大菱鲆(Scophthatmus maximus L.)幼鱼[初始体重(145.08±0.56)g]为研究对象,在工业化封闭循环海水养殖环境中,进行以日粮蛋白质含量为唯一变量的单因素随机动物实验,即4种蛋白水平处理(41%、46%、50%、55%;以Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ表示),每处理3个重复,每个重复12尾鱼,试验期74天,通过生长、消化酶、水质、免疫指标和溶菌酶基因表达量的测定,探寻蛋白质营养对工业化封闭循环海水养殖大菱鲆幼鱼的效应规律、免疫作用特征及其分子机制。研究结果如下:(1)试验鱼增重率随着日粮蛋白质水平升高而提高,其中Ⅲ、Ⅳ两组增重率显着高于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ两组间没有显着差异;饵料系数则呈相反规律,Ⅲ、Ⅳ两组极显着低于Ⅰ组(P<0.01),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ叁组间没有显着差异;蛋白质效率各组没有显着差异。(2)日粮蛋白质水平对试验鱼胃蛋白酶和胃肠脂肪酶活力有显着影响,对胃肠淀粉酶活力影响不显着。Ⅳ组胃蛋白酶活力分别极显着高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(P<0.01),Ⅱ、Ⅲ两组无显着差异,胃肠脂肪酶活力从Ⅰ～Ⅳ组逐渐降低;各组肝胰脏淀粉酶和脂肪酶活力受处理影响不显着,而胰蛋白酶活力有显着差异,Ⅳ组显着高于Ⅲ组(P<0.05),极显着高于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.01),Ⅰ、Ⅱ两组差异不显着。(3)大菱鲆排氮率呈现出明显的节律性,排氮高峰出现在摄食后6(早)～9(晚)h。Ⅳ组试验鱼排泄率在早晨摄食后6h极显着高于其他3组18.00%、20.73%及35.03%(P<0.01),在晚摄食后9h极显着高于Ⅰ组31.24%(P<0.01),显着高于Ⅱ组14.25%(P<0.05),与Ⅲ组差异不显着;随着日粮蛋白质含量的增加,大菱鲆排泄率先缓增后趋于平稳,待日粮蛋白含量超过50%时,鱼氨氮排泄率急剧增加。(4)随日粮蛋白含量提高,各组试验鱼主要免疫器官组织溶菌酶活力呈先上升后缓降趋势,Ⅲ组活力最高,其中肝脏溶菌酶活力分别极显着高于Ⅰ组80.07%(P<0.01),显着高于Ⅱ组43.56%(P<0.05);头肾溶菌酶活力极显着高于Ⅰ、Ⅱ两组67.78%和35.76%(P<0.01);Ⅲ、Ⅳ两组差异不显着。脾脏、腮丝溶菌酶活力虽亦表现出上述变化规律,但各处理组间差异不显着。血清免疫因子方面,各组试验鱼血清SOD活力及C3补体含量,随日粮蛋白含量增加而提高,但各处理间差异不显着;血清丙二醛含量则呈相反规律;血清酸性磷酸酶活力及溶菌酶活力随蛋白水平提高先升高后稍降,Ⅲ组血清溶菌酶活力极显着高于Ⅰ组31.92%(P<0.01),显着高于Ⅱ组18.72%(P<0.05),也高于Ⅳ组2.66%,但差异不显着。(5)大菱鲆肝、脾、肾3个组织c型溶菌酶mRNA相对表达量随日粮蛋白含量增加而提高,Ⅳ组表达量最高。肝脏:Ⅳ组显着高于Ⅲ组9.6%(P<0.05),极显着高于Ⅰ、Ⅱ组18.1%和37%(P<0.01);脾脏:Ⅳ组极显着高于Ⅰ组64%(P<0.01),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ3组差异不显着(P>0.05);头肾:4个组差异不显着(P>0.05)。(6)大菱鲆肝、脾、肾3种组织中g型溶菌酶mRNA相对表达量随日粮蛋白水平的提高呈先增加后缓降的趋势,Ⅲ组最高。头肾:Ⅲ组显着高于Ⅱ组42%(P<0.05),极显着高于Ⅰ组113%(P<0.01),高于Ⅳ组10.36%但差异不显着(P>0.05)。脾脏:Ⅲ组显着高于Ⅱ组4.9%(P<0.05),极显着高于Ⅰ组28%(P<0.01),高于Ⅳ组2.4%但差异不显着(P>0.05);肝脏:Ⅲ组显着高于Ⅰ组15%(P<0.05),分别高于Ⅱ、Ⅳ组2.6%和4.3%(P>0.05)。结果表明,大菱鲆幼鱼日粮的中高蛋白质水平(50%含量),既有利于鱼的健康快速生长,又能维持工业化养殖的清洁水环境。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会论文集》期刊2012-10-19）
闻崇炜,毛春友,胡萍萍,刘瑞江[9]（2012）在《Tricine蛋白质电泳定量检测溶菌酶方法的研究》一文中研究指出利用叁(羟甲基)甲基甘氨酸(Tricine)蛋白质电泳测定蛋清中溶菌酶含量,测得散养鸡蛋清、鹌鹑蛋清、笼养鸡蛋清中溶菌酶含量分别为2.074 8、1.890 4、0.897 8 mg/mL。该方法简便易行、稳定性好,可用于溶菌酶制备工艺中原料及各阶段样品的含量检测,也可以用于测定其他类似的小分子蛋白质含量。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2012年05期）
牛司强[10]（2011）在《一种肺炎链球菌溶菌酶样假想蛋白质SP0987的结构和功能研究》一文中研究指出由于抗生素耐药的增加和疫苗本身存在的缺陷,肺炎链球菌的预防和治疗面临着很大的挑战。这就需要我们进一步深入研究肺炎链球菌的致病机理,为抗菌药物的开发和疫苗的研制提供理论基础。前期工作中课题组研究发现,肺炎链球菌的一个体内诱导基因sp0987编码的假想蛋白质SP0987是一个潜在的毒力因子。到目前为止,SP0987的结构和功能都不清楚,需要我们做进一步的研究。目的本研究将用X-射线晶体学方法首次解析假想蛋白质SP0987的叁维立体结构,在结构的基础上研究其生物学功能,并探索sp0987基因影响细菌毒力的初步机制。方法通过克隆、表达、纯化、蛋白质晶体培养、衍射数据收集和蛋白质叁维立体结构解析,得到SP0987的叁维立体结构;从叁维结构所提供的信息,运用酶活性分析方法和定点突变技术进行溶菌酶活性的分析和酶活性位点的分析与验证;通过荧光报告系统来确定SP0987的细胞定位;通过构建肺炎链球菌sp0987缺陷菌株研究小鼠生存实验及体内的定植实验和体外的细胞粘附和侵袭实验,来研究sp0987基因缺陷后对肺炎链球菌致病性的影响。结果生物信息学分析显示,由基因sp0987编码的假想蛋白质SP0987全长266个氨基酸,其编码产物可能为溶菌酶,主要作用是降解细胞壁中N-乙酰胞壁酸和N-乙酰葡糖胺之间的β-1,4-糖苷键,属于GH25家族溶菌酶;通过克隆、表达、纯化、蛋白质晶体培养、衍射数据收集和蛋白质叁维立体结构解析,首次成功解析SP0987的叁维立体结构;序列比对和叁维结构迭合分析发现,SP0987是溶菌酶样蛋白质,保守性分析及结构特点分析发现可能的活性位点D33、D131、E133和D222,且都为酸性氨基酸残基;分子筛实验提示,SP0987在溶液中以单体形式存在;应用绿色荧光蛋白报告系统分析SP0987的细胞定位,结果发现SP0987定位于细胞膜,与生物信息学分析结果一致;用LFH-PCR技术构建sp0987缺陷菌,小鼠体内生存实验结果显示,sp0987缺陷后肺炎链球菌毒力明显减弱;体外细胞实验发现,sp0987缺陷菌对宿主细胞的侵袭明显弱于野生菌,而对宿主细胞的粘附没有明显差异;体内定植实验发现,肺炎链球菌D39野生菌及缺陷菌经鼻腔感染后,缺陷菌入血时间明显较晚,且在BALB/c小鼠鼻咽部和肺部的细菌载量有明显差异,缺陷菌的细菌载量明显减少。结论用X-射线晶体学方法首次成功解析肺炎链球菌假想蛋白质SP0987的叁维结构;结构分析及功能实验发现,SP0987是溶菌酶样膜蛋白,在溶液中以单体形式存在;毒力实验显示,sp0987基因缺陷菌在小鼠体内毒力显着降低,并影响肺炎链球菌的侵袭能力和定植能力,所以其编码产物SP0987是一种新的毒力因子。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2011-05-01）
溶菌酶蛋白质论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
蛋白质是生命不可或缺的物质基础,也是生命活动的主要承担者。因其对于生命的重要性,人们对蛋白质的研究热情从未衰减,其中蛋白质的结构与功能一直都是科学领域的研究热点。研究蛋白质构象空间对于研究蛋白质结构和功能的关系来说是极其重要的,不同构象之间的动力学信息也是研究蛋白质结构和功能关系的重要的宝贵数据来源。动力学上的结构相关性是蛋白质别构效应的基础,绝大多数生物学相关的别构效应在空间上是远程的。了解结构相关性,尤其是在空间远程的相关性,对阐明蛋白质别构机制并操纵蛋白质别构是非常必要的。本篇论文以溶菌酶蛋白质HEWL(Hen Egg White Lysozyme)在自然折迭状态下的长时间分子动力学模拟轨迹为数据来源,分析了HEWL蛋白质内部空间远程相关性,并对可能的别构效应调节位点进行预测,形成了一套蛋白质内部空间远程相关性的计算分析方法。首先,分析了HEWL蛋白质的主链二面角的分布情况,由于蛋白质结构非常稳定,大多数主链二面角只有一种主要状态,但存在着部分主链二面角有两种及以上的主要状态,这些主链二面角的所在位置可能是蛋白质别构效应的关键位点。接下来计算了主链二面角之间的循环相关系数、互信息以及距离,分析了主链二面角之间的远程相关性,确定互信息对于分析HEWL蛋白质内部相关性更具优势,并探究了互信息与二级结构、距离之间的关系。发现较强的远程相关性主要存在于蛋白质结构的loop区之间。进一步的,依据某一个主链二面角的两种不同的状态将轨迹中的结构数据分为两个子集,计算了子数据集之间的互信息差异,发现两个主链二面角之间的相关性会受第叁个主链二面角的影响,而它们在空间上可能相距较远;通过作出互信息差异在主链二面角之间的距离上的分布图,进一步分析了互信息差异与距离的关系,一些二面角虽然距主链二面角对距离较远,但仍能影响主链二面角对的相关性。为了更好的阐释第叁个主链二面角对于主链二面角对之间相关性的影响,计算了每叁个主链二面角之间的交互信息,分析了叁个主链二面角之间的空间远程相关性,并且与子数据集相关性分析相比,该方法对于分析叁者之间的相关性更加可靠。接下来将分析对象从主链二面角延伸到残基,计算了每两个残基之间的互信息,分析了残基之间的空间远程相关性。最后,基于主链二面角和残基的空间远程相关性分析,本文对可能的别构效应调节位点进行预测,并与已知位点位置比对。分析蛋白质内部的相关性可以进一步构建蛋白质相关性网络模型,进而更准确的预测蛋白质别构效应的调节位点以及优化蛋白质设计。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
溶菌酶蛋白质论文参考文献
[1].侯明心.可逆吸附-释放蛋白质的PMOXA/PAA响应性涂层用于毛细管电泳放大溶菌酶的检测信号[D].中国科学技术大学.2019
[2].李喆.溶菌酶蛋白质内部空间远程相关性研究[D].吉林大学.2017
[3].林晨.溶菌酶蛋白质结晶过程中成核的研究[D].华南理工大学.2017
[4].盖青青,屈锋.牛血清白蛋白和溶菌酶为双模板蛋白质的表面印迹聚合物的制备及吸附性能[J].色谱.2015
[5].李勇,赵宁宁,高婷婷,周邦维,柳阳.蛋白质生态营养提高工业养殖大菱鲆幼鱼免疫力的效应和溶菌酶mRNA相对表达量[C].第七届中国饲料营养学术研讨会论文集.2014
[6].李让,鲁军,陈剑婷,袁悦,田漫.超声波辅助溶菌酶酶解提取地木耳蛋白质工艺优化[J].食品与机械.2014
[7].李勇,高婷婷,周邦维,柳阳,王晓晨.蛋白质生态营养提高工业养殖大菱鲆幼鱼免疫力的效应和溶菌酶mRNA相对表达量[C].第九届世界华人鱼虾营养学术研讨会论文摘要集.2013
[8].李勇,高婷婷,张家国,柳阳,周邦维.蛋白质营养对工业化养殖大菱鲆幼鱼生长、消化、免疫及溶菌酶基因表达的研究[C].中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会论文集.2012
[9].闻崇炜,毛春友,胡萍萍,刘瑞江.Tricine蛋白质电泳定量检测溶菌酶方法的研究[J].江苏农业科学.2012
[10].牛司强.一种肺炎链球菌溶菌酶样假想蛋白质SP0987的结构和功能研究[D].重庆医科大学.2011