导读:本文包含了致密颗粒抗原论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:致密,颗粒,抗原,弓形虫,免疫,蛋白,小鼠。
致密颗粒抗原论文文献综述
朱翔,钮志林,路文明,丁宁玲,吴燕[1]（2015）在《应用重组致密颗粒抗原6检测诊断弓形虫病的研究》一文中研究指出目的以纯化的重组致密颗粒抗原6作为检测抗原,建立检测弓形虫IgM和IgG抗体的ELISA新方法,为临床治疗提供参考依据。方法 2007年1月-2011年12月对59份弓形虫阳性血清标本进行检测,并与进口弓形虫ELISA-IgM和IgG试剂盒进行比较,数据采用SPSS 13.0软件进行统计分析。结果 ELISA法优化检测条件为包被抗原浓度为40μg/ml;敏感度比较表明血清稀释度在1∶10~1∶80为优;特异性试验表明IgM阳性的抑制率为97.36%、IgG阳性的抑制率为97.98%;用rGRA6-IgM-ELISA对混合弓形虫IgM阳性和阴性血清的精密度检测表明,IgM阳性的变异系数(CV值)为2.76%,IgM阴性混合血清的CV值为0.45%;用rGRA6-IgG-ELISA对混合弓形虫IgG阳性和阴性血清的精密度检测表明,IgG阳性的变异系数(CV值)为2.89%,IgG阴性混合血清的CV值为1.65%;rGRA6-IgM-ELISA与进口试剂盒的总符合率为91.01%,rGRA6-IgG-ELISA与进口试剂盒的总符合率为94.59%。结论重组抗原rGRA6能被弓形虫感染患者血清IgM和IgG抗体所识别,用重组抗原rGRA6构建的试剂盒诊断弓形虫病具有较高的特异性、敏感性。(本文来源于《中华医院感染学杂志》期刊2015年24期）
蔡玉峰,王雅丽,王泽东,许越,刘贤英[2]（2015）在《评价基于致密颗粒蛋白GRA1为抗原检测猫弓形虫感染的血清学诊断方法》一文中研究指出为了研究以弓形虫致密颗粒蛋白GRA1为抗原检测猫弓形虫感染的血清学诊断及评价,试验采用标准弓形虫抗体阳性、阴性猫血清建立ELISA方法,最终确定重组GRA1最佳蛋白包被浓度为5μg/m L、血清最佳稀释度为1∶64,用此方法对已通过MAT/IFA法共同确定的185份猫弓形虫抗体血清进行检测并评价。结果表明:应用MAT/IFA法检出阳性血清39份、阴性血清146份,而通过重组GRA1-ELISA法检出阳性血清37份、阴性血清148份,二者共同检出阳性血清33份、阴性血清142份,GRA1假阳性率为10.8%,假阴性率为4.1%。比较重组GRA1-ELISA与MAT/IFA的结果,二者不一致部分无显着性差异(P>0.05);一致性部分经Kappa检验(K=0.83),一致率为94.6%。说明以重组GRA1作为包被抗原建立的ELISA方法检测效果没有弓形虫体裂解蛋白TLA好。因此,重组GRA1不是用于检测猫弓形虫感染的流行病学调查的最佳诊断抗原。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2015年19期）
闵娟[3]（2012）在《弓形虫致密颗粒抗原GRA7疫苗初免—加强免疫策略增强小鼠抗弓形虫感染的免疫保护性研究》一文中研究指出弓形虫是一种细胞内寄生的原虫,可感染包括人在内所有温血脊椎动物的有核细胞,引起人兽共患弓形虫病,严重威胁着人类健康和畜牧业生产。目前为止,尚无有效的治疗药物。鉴于疫苗防治多种疾病的经验,研制安全有效的抗弓形虫疫苗不失为一种具有潜力的防治措施。为此,本研究制备了弓形虫致密颗粒抗原GRA7的DNA疫苗和蛋白疫苗,将其接种于BALB/c小鼠,评价疫苗的免疫效果,并观察异质性prime-boost免疫策略对小鼠免疫应答的影响,为研制安全有效的弓形虫疫苗及优化免疫方案奠定基础。目的：构建编码弓形虫致密颗粒抗原GRA7的真核表达质粒pEGFP-GRA7和原核表达质粒pET30-GRA7,分别制备弓形虫GRA7的DNA疫苗和蛋白质疫苗,评价疫苗的免疫效果,观察prime-boost免疫策略对小鼠免疫应答的影响。方法：采用PCR技术从弓形虫基因组DNA中扩增弓形虫致密颗粒抗原GRA7基因,回收PCR产物,将其连接至克隆载体pEASY-T1中,构建克隆载体pEASY-GRA7,分别进行菌落PCR、酶切和测序鉴定。采用亚克隆技术将GRA7基因分别克隆至真核表达载体pEGFP-C1和原核表达载体pET-30a(+)中,分别构建能表达GRA7的重组真核表达载体pEGFP-GRA7和重组原核表达载体pET30-GRA7,并对它们进行鉴定。将pEGFP-GRA7转染HFF细胞,经荧光显微镜观察、SDS-PAGE和Western blotting分析、鉴定后,大量提取重组质粒pEGFP-GRA7用于制备弓形虫GRA7DNA疫苗。将pET30-GRA7转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,采用镍柱亲和层析法纯化GRA7蛋白,SDS-PAGE和VWestern blotting分析鉴定后,制备弓形虫GRA7重组蛋白疫苗。动物实验观察疫苗的免疫效果,同时评价异质性prime-boost免疫策略对BALB/c小鼠免疫应答的影响。结果：经PCR体外扩增获得GRA7基因片段,大小为708bp。重组真核表达质粒pEGFP-GRA7经菌落PCR、双酶切鉴定,琼脂糖凝胶电泳结果显示在708bp处有一特异性条带,与预期GRA7目的基因片段大小一致；DNA测序结果显示目的基因片段GRA7准确插入真核表达质粒中。pEGFP-GRA7转染的HFF细胞经荧光显微镜观察、SDS-PAGE和Western blotting分析,均能检测到GRA7蛋白的表达。重组原核表达质粒pET30-GRA7经菌落PCR、双酶切鉴定,琼脂糖凝胶电泳结果显示在708bp处有一特异性条带,与预期GRA7目的基因片段大小一致；DNA测序结果显示目的基因片段GRA7准确插入原核表达质粒中。pET30-GRA7转入E.coli BL21诱导产物经SDS-PAGE和Western blotting分析,可检测到GRA7蛋白的表达。采用异质性prime-boost免疫策略接种BALB/c小鼠,其中DNA疫苗初免-蛋白加强免疫组小鼠抗弓形虫IgG、IgG2a和IFN-γ水平均高于其它实验组(P<0.05),而各组间IL-4和IL-10水平差异无显着性。结论：体外扩增弓形虫致密颗粒抗原GRA7基因并亚克隆到表达载体中,成功制备了弓形虫GRA7的DNA疫苗和蛋白疫苗。采用DNA疫苗初免-蛋白加强免疫策略可诱导小鼠较强的抗GRA7的体液免疫和细胞免疫,显着增强小鼠抗弓形虫感染的保护作用。(本文来源于《山东大学》期刊2012-05-17）
苑文英,刘辉,刘秀华,刘嘉琳[4]（2007）在《弓形虫表面抗原和致密颗粒蛋白的研究进展》一文中研究指出弓形虫生活史包括无性增殖与有性增殖,存在形式有滋养体、包囊、卵囊、配子体、裂殖体,滋养体包括速殖子、缓殖子,它们在分子学上有一些共同成份:表面抗原(surface an-tigen,SAG),微线体蛋白(microneme protein,MIC)、棒状(本文来源于《中国人兽共患病学报》期刊2007年03期）
蔡力汀,舒衡平,王丹静,蒋立平,吴翔[5]（2005）在《编码弓形虫致密颗粒抗原-1(GRA1)质粒DNA免疫小鼠诱导抗弓形虫感染的保护性(英文)》一文中研究指出目的构建真核表达质粒pcGRA1,并观察其免疫小鼠的保护性。方法经PCR从cDNA克隆中扩增出GRA1编码基因,定向克隆入pcDNA3的EcoRⅠ/XhoⅠ位点,从而获得pcGRA1。用限制性内切酶消化、PCR及序列测定对该重组质粒进行鉴定。将100μg质粒于小鼠左后腿DNA肌注,于注射后2周和4周各加强1次;分别观察小鼠体内的特异性抗体滴度、GRA1基因在小鼠体内的分布、GRA1在肌细胞的表达以及免疫小鼠对弓形虫强毒株RH速殖子攻击后的保护性。结果DNA序列测定结果表明,将573bp的GRA1编码阅读框定向克隆到pcDNA3EcoRⅠ/XhoⅠ位点,成功构建了重组质粒pcGRA1;免疫小鼠血清中检测到特异性IgG;不同组织DNA为模板特异地扩增出GRA1编码基因;IFA检测pcGRA1免疫鼠肌细胞呈阳性反应;弓形虫RH株速殖子攻击感染pcGRA1免疫鼠,其存活时间长于对照组。结论重组质粒pcGRA1免疫小鼠可诱导特异性免疫反应,对弓形虫强毒株的攻击感染具有一定的保护性。(本文来源于《中国寄生虫病防治杂志》期刊2005年04期）
袁仕善,吴少庭,黄达娜,张仁利,高世同[6]（2004）在《弓形虫致密颗粒抗原GRA8的原核和真核表达质粒的构建》一文中研究指出目的 构建弓形虫RH株致密颗粒抗原GRA8的原核和真核重组表达质粒。方法 参照GRA8序列分别设计引物 ,采用PCR从弓形虫RH株基因组DNA中分别扩增出编码GRA8的基因片段 ,克隆至 pMD18-T载体 ;菌落PCR鉴定阳性克隆并测序分析 ;各组阳性克隆的质粒分别亚克隆至原核表达质粒pGEX - 4T - 2和真核表达载体 pVAX1,分别转化大肠杆菌BL2 1和JM10 9,PCR和酶切鉴定转化菌落的插入序列 ;将构建的原核表达菌株经IPTG诱导 ,SDS -PAGE和免疫印迹分析融合蛋白的表达 ;将构建的真核重组表达质粒免疫小鼠 ,观察其诱导的抗体应答。结果 PCR扩增出GRA8基因的特异片段 ,各组阳性克隆的序列正确 ,并分别被亚克隆到原核表达质粒 pGEX - 4T - 2和真核表达载体pVAX1上 ,构建了弓形虫致密颗粒抗原GRA8的原核和真核重组表达质粒 ;原核表达质粒在大肠杆菌中表达了GRA8的融合蛋白 ;真核重组表达质粒诱导小鼠产生了抗弓形虫抗原的抗体。结论 以pGEX - 4T - 2和 pVAX1为载体 ,分别成功构建了GRA8的原核和真核重组表达质粒。(本文来源于《中国人兽共患病杂志》期刊2004年03期）
致密颗粒抗原论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了研究以弓形虫致密颗粒蛋白GRA1为抗原检测猫弓形虫感染的血清学诊断及评价,试验采用标准弓形虫抗体阳性、阴性猫血清建立ELISA方法,最终确定重组GRA1最佳蛋白包被浓度为5μg/m L、血清最佳稀释度为1∶64,用此方法对已通过MAT/IFA法共同确定的185份猫弓形虫抗体血清进行检测并评价。结果表明:应用MAT/IFA法检出阳性血清39份、阴性血清146份,而通过重组GRA1-ELISA法检出阳性血清37份、阴性血清148份,二者共同检出阳性血清33份、阴性血清142份,GRA1假阳性率为10.8%,假阴性率为4.1%。比较重组GRA1-ELISA与MAT/IFA的结果,二者不一致部分无显着性差异(P>0.05);一致性部分经Kappa检验(K=0.83),一致率为94.6%。说明以重组GRA1作为包被抗原建立的ELISA方法检测效果没有弓形虫体裂解蛋白TLA好。因此,重组GRA1不是用于检测猫弓形虫感染的流行病学调查的最佳诊断抗原。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
致密颗粒抗原论文参考文献
[1].朱翔,钮志林,路文明,丁宁玲,吴燕.应用重组致密颗粒抗原6检测诊断弓形虫病的研究[J].中华医院感染学杂志.2015
[2].蔡玉峰,王雅丽,王泽东,许越,刘贤英.评价基于致密颗粒蛋白GRA1为抗原检测猫弓形虫感染的血清学诊断方法[J].黑龙江畜牧兽医.2015
[3].闵娟.弓形虫致密颗粒抗原GRA7疫苗初免—加强免疫策略增强小鼠抗弓形虫感染的免疫保护性研究[D].山东大学.2012
[4].苑文英,刘辉,刘秀华,刘嘉琳.弓形虫表面抗原和致密颗粒蛋白的研究进展[J].中国人兽共患病学报.2007
[5].蔡力汀,舒衡平,王丹静,蒋立平,吴翔.编码弓形虫致密颗粒抗原-1(GRA1)质粒DNA免疫小鼠诱导抗弓形虫感染的保护性(英文)[J].中国寄生虫病防治杂志.2005
[6].袁仕善,吴少庭,黄达娜,张仁利,高世同.弓形虫致密颗粒抗原GRA8的原核和真核表达质粒的构建[J].中国人兽共患病杂志.2004
论文知识图
