全细胞生物转化法制备γ-氨基丁酸

论文摘要

γ-氨基丁酸（γ-aminobutyrate,GABA）是广泛存在于自然界的一种非蛋白质的功能性氨基酸.它是哺乳动物中枢神经中一种重要的抑制性神经递质.为了高效廉价制备GABA,采取谷氨酸脱羧酶（glutamic acid decarboxylase,GAD）催化L-谷氨酸生成GABA的工艺.从K12来源的大肠杆菌（E. coli）基因组中PCR扩增得到GAD基因片段,并克隆到载体p ET-23a中,得到重组质粒p ET-23a-K12gad,并将其转化至大肠杆菌E. coli BL21（DE3）中,获得了能够重组表达GAD活性的工程菌株.从反应温度、p H、菌体量这三个方面对催化工艺进行了优化.为了进一步降低成本,通过化学法将谷氨酸钠转化为谷氨酸作为催化底物,提高转化速率的同时简化了纯化工艺.

论文目录

• 0 引言
• 1 材料与方法
•   1.1 实验材料
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 Gad重组质粒的构建
•     1.2.2 重组细胞的培养
•     1.2.3 GABA的测定
•     1.2.4 谷氨酸脱羧酶活力的测定[12]
• 2 结果与讨论
•   2.1 Gad基因在大肠杆菌中的表达
•   2.2 反应条件优化
•     2.2.1 温度对GAD全细胞催化活性的影响
•     2.2.2 菌体量对Gad全细胞催化活性的影响
•     2.2.3 pH对Gad全细胞催化的影响
•   2.3谷氨酸钠转化成L-谷氨酸最优条件
•   2.4 HPLC柱前衍生化测定GABA含量
• 3讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李文强,刘洋,唐荣兴,廖平安,马立新

关键词: 氨基丁酸,谷氨酸脱羧酶,全细胞转化,谷氨酸钠

来源: 湖北大学学报(自然科学版) 2019年01期

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 有机化工

单位: 湖北大学生命科学学院

基金: 湖北省技术创新重大项目(2017ACA174)资助

分类号: TQ226.36

页码: 5-9

总页数: 5

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