导读:本文包含了药物含量测定论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:含量,药物,蛋白,高效,可调,液相,姜黄。
药物含量测定论文文献综述
张倩茹,张艳,张建永,周卿,周旭美[1]（2019）在《“产-学-研”结合的药物分析实验教学改革——以山银花含量测定为例》一文中研究指出中药质量控制是中药研发与生产的重要环节,中药有效成分的含量测定已逐渐成为药物分析实验课程中的一个常见内容。但由于客观条件的限制,采用高效液相色谱法对中药有效成分的含量测定在一些高校中较难开展。为改进并推广中药质量分析的内容,本文以本校开设的"比色法测定山银花总酚酸"为例,探讨了药物分析课程中的中药有效成分含量测定的实验教学改革。(本文来源于《广东化工》期刊2019年14期）
蓝丽爱[2]（2019）在《创新药物CBMIDA和H_2S的新型分析方法建立及其在制剂含量测定和药物动力学研究中的应用》一文中研究指出金属络合剂和硫化氢供体药物是新药研发中两个较为特殊的对象,在对这两类化合物进行定量分析时,其特殊理化性质常导致精密度差,准确性低,定量线性范围窄等问题;现有这两类化合物的定量分析均通过较为耗时的衍生化方法实现,且方法难以重现。本文为放射性核素铀的促排剂双酚二胺四乙酸(CBMIDA)和第叁类气体信号分子硫化氢(H_2S)建立专属性强、灵敏度高、操作简便、易于重现、样品通量高、分析成本低的LC-MS/MS方法,并应用于其原料药与药物制剂的含量测定以及药代动力学研究,为新药申报提供技术和数据支持,也为同类型化合物的定量分析提供方法学参考。一、CBMIDA在体内外的LC-MS/MS分析方法建立及其在制剂含量测定和药物动力学研究中的应用在使用HPLC法对金属络合剂进行分析时,因其能够和分析系统中无处不在的金属离子发生络合而导致色谱峰畸形,分析精密度和准确度差,标准曲线线性范围窄。而目前多氨羧酸类螯合剂的测定方法几乎全部依靠测定其金属络合物来对络合剂进行定量。用于络合的金属种类、反应温度、pH、反应时间以及络合物的热力学稳定性均对络合物产率产生很大影响。待测物需要在较高温度下与适合的金属离子反应较长时间才能完全转化成同一种形式以供测定;此外这些方法液相分离多基于平衡时间较长、重现性较差的离子对色谱。本文选择耐酸、耐水且对极性和非极性化合物都有良好保留的Agilent Zorbax SB Aq柱作为分析柱,使用脉冲梯度色谱法并在流动相中加入甲酸和待测物的结构类似物EDTA,克服了金属络合剂分析中常出现的保留弱,峰形差,精密度、准确度和回收率低的问题,建立放射性核素铀的促排剂CBMIDA的快速、简便的体外LC-MS/MS测定方法。在流动相和样品溶液中加入EDTA可以掩蔽样品基质和分析系统中金属离子对络合剂测定的干扰,流动相中的酸可以抑制CBMIDA的解离,增加色谱保留,削弱金属配位能力,因而该方法可以直接测定CBMIDA原型药物,与现有螯合剂定量方法相比,具有更明显的简便性。应用该方法对CBMIDA的原料药和制剂进行含量测定,定量下限为25 ng?mL~(-1),方法在25~2500 ng?mL~(-1)范围内具有良好的线性,精密度和重现性考察RSD分别为1.31%和1.27%。由于CBMIDA能够与血浆蛋白中的金属离子发生络合,血浆样品前处理蛋白沉淀剂中同样需要加入EDTA才能提高CBMIDA在血浆中的回收率。将体外分析方法直接应用于血浆样品分析时,由于部分CBMIDA能够与色谱柱上沉积的血浆基质发生结合,导致色谱峰拖尾,峰后基线高于峰前;通过增加甲酸浓度进一步抑制CBMIDA的解离,减少其在络合过程提供的配位原子的数量,同时提高掩蔽剂EDTA的浓度,可以使CBMIDA和沉积于色谱柱上的生物基质作用变弱,从而解决生物基质引起的色谱峰拖尾和峰后基线高于峰前的问题。在血浆样品分析方法学考察时,针对多氨羧酸类螯合剂的金属络合和代谢特性,增加考察了抗凝剂对待测物血浆浓度的影响、酰基葡糖苷酸代谢产物对动物体内原型药物含量测定的干扰以及待测物37℃全血温孵稳定性。所建立Beagle犬和SD大鼠血浆样品分析方法专属性、精密度和准确度高,在0.1~10μg?mL~(-1)范围内呈良好线性,可成功应用于CBMIDA在Beagle犬体内的药代和毒代动力学研究以及SD大鼠体的药代动力学研究。本文所建立血浆样品分析方法与现有金属络合剂分析方法相比具有样品前处理条件温和、操作简单、样品通量高、定量线性范围较宽且耐用性强的特点,此外,针对儿茶酚多氨羧酸类螯合剂的特点,增加方法学考察的内容,因而该方法对儿茶酚多氨羧酸类螯合剂的生物样品分析方法优化具有实际参考价值。二、基于NBD捕获探针的H_2S供体药物制剂含量测定和药物动力学研究H_2S是继NO和CO之后的第叁类气体信号分子,已被证实能够参与多种疾病的进程,可用于心血管疾病、消化道疾病、急慢性炎症、帕金森病和阿尔茨海默病等疾病的治疗,因而H_2S供体也成为新药研发的候选药物。目前公认的专属性强、灵敏度高的H_2S定量分析方法以价格昂贵的单溴二胺(MBB)作为衍生化试剂,反应条件复杂苛刻,且生物样品定量分析的标准校正样品均为以缓冲溶液配制的反应产物(SDB)标准溶液,未考虑待测样品的基质效应和基质提取回收率对分析准确度的影响,不同课题组优化所得的最佳反应条件不一致,测得的同种动物体内H_2S的基线水平差别较大。开发反应简单,精密度、准确度和重现性好,成本低的新分析方法可推动H_2S生理病理机制研究的深入和H_2S供体药物的研发。本文基于NBD醚的硫解反应,选择常用的色谱改性剂4-Cl-NBD和以之为原料合成的四个探针NBDOMe、NBDOEt、NBDOTFE和NBDOCMR作为捕获剂对还原性、挥发性较强的H_2S进行LC-MS/MS定量。本文首先建立探针、探针与H_2S反应的产物和可能的副产物以及探针水解产物的LC-MS/MS检测方法,对上述五个探针与H_2S的最佳反应条件进行优化,并对探针的稳定性、选择性、反应速度和与H_2S定量反应的灵敏度和线性进行考察。然后选择与H_2S定量反应线性较好的NBDOEt和4-Cl-NBD对H_2S进行衍生化检测。这两个方法定量下限均为50 nM,标准曲线在50 n~5μM浓度范围线性良好,样品处理简单,精密度、准确度高,重现性好,被成功应用于Na_2S?9H_2O原料药和注射液中Na_2S的含量测定。采用NBDOEt和4-Cl-NBD对H_2S进行衍生化检测的灵敏度和线性与标准MBB法相当,但反应条件更加简单,且探针成本仅为MBB的十分之一。考察以NBDOEt和4-Cl-NBD探针对大鼠血浆中的H_2S进行捕获分析的回收率和灵敏度,结果发现,由于H_2S在体内主要以结合状态存在,以体外专属性较好、反应速度较快的NBDOEt探针对SD大鼠血浆中的H_2S进行测定的回收率小于30%,且精密度和重现性差,在血浆中加入抗氧化剂和巯基化合物常用还原剂并不能提高回收率。而专属性较差的4-Cl-NBD探针在pH为9.5左右可以和血浆中的硫化物(RSH)发生特殊反应而生成与H_2S反应相同的产物NBDSH。由于内源性硫化物的干扰,Na_2S血浆标准曲线线性无法达到生物分析要求,不能作为定量标准曲线。本文考察了H_2S全血和血浆稳定性、H_2S血浆标准曲线各浓度点的回收率以及NBDSH在血浆中的线性、精密度和回收率;结果,H_2S加入血浆和全血中之后10min内稳定;H_2S血浆标准曲线各浓度点绝对回收率在250%~500%范围内,但是同一浓度点回收率重现性良好,虽然标准曲线线性相关系数r~2小于0.99,但产物响应与Na_2S浓度呈正相关,标准曲线斜率重现性好;NBDSH血浆标准曲线在0.1~20μM范围内成良好线性,精密度考察LQC、MQC和HQC的平均绝对回收率分别为119.26%、86.75%和81.41%,RSD均小于15%;这些结果证实了以NBDSH的血浆标准曲线为定量校正曲线的合理性。此外,对每个实验对象采集多个空白点扣除平均背景值以消除内源性硫化物的干扰。最后,将血浆制备时间控制在10 min以内=并以NBDSH血浆标准曲线为定量校正曲线,本文可以准确测定SD大鼠尾静脉注射Na_2S注射液后体内H_2S的变化。本文所建立SD大鼠血浆中H_2S的测定方法样品前处理简单,充分考虑到反应回收率、基质效应和内源性干扰对分析准确度的影响,精密度和准确度高,重现性好。该方法为今后H_2S的病理生理机制和药代动力学研究提供新的技术思路。(本文来源于《中国人民解放军海军军医大学》期刊2019-05-22）
张齐[3]（2019）在《关于药物分析实验教学方法的改进——以阿司匹林原料药含量测定为例》一文中研究指出药物分析是研究和发展药品全面质量控制的方法学科。它是一门主要运用化学、物理学、生物学及微生物学的方法和技术研究化学结构已经明确的合成药品或者天然药品及其制剂的质量的学科[1]。药物分析是一门实践性很强的方法学科,从事药物分析的专业人员必须有扎实的实践操作技能,才能准确无误地分析一个药物的质量。所以,实验课程是药物分析教学实践中不可缺少的重要组成部分[1-2]。(本文来源于《科技经济导刊》期刊2019年04期）
南沣,王影,张丹,米欣[4]（2018）在《片剂药物溶解方法对含量测定结果的影响》一文中研究指出目的比较超声处理法、调速震荡法与手动振摇法在药品检验药物溶解中的应用。方法采用超声处理法、调速震荡法与手动振摇法对盐酸二甲双胍片、氢氯噻嗪片、硝苯地平片、维生素B1片进行预处理并测定含量,考察上述3种方法对不同样品含量测定结果的影响。结果与结论超声处理法操作简便、快捷,溶解效果满意,建议在药品检验中采用。(本文来源于《中国药业》期刊2018年19期）
曲耀成,姚雪静[5]（2018）在《重组蛋白类药物蛋白含量测定方法研究进展》一文中研究指出如何实现蛋白药物的准确定量一直是生物技术药物质量控制中的重要课题。本文将蛋白含量测定方法系统地分成3类:标准定量法、比色分析法以及紫外吸收法,并对每种方法如何实现准确定量分别进行阐述。此外,本文还提出一种测定抗体药物偶联物中蛋白含量的方法,为该种重组蛋白类药物蛋白含量的准确测定提供了参考。(本文来源于《药学研究》期刊2018年03期）
朱辰龙[6]（2017）在《高效液相色谱法在去甲氧基姜黄素纳米脂质载体中药物含量测定中的应用》一文中研究指出作为临床中一种十分常见的药物构成成分,去甲氧基姜黄素是姜黄素的类似成分,其临床作用与姜黄素有着一定的相同之处~([1])。去甲氧基姜黄素不仅能够起到抗癌、抗氧化及抗炎等药理作用,而且毒副作用少,具有良好的应用前景。然而,临床研究发现去甲氧基姜黄素水溶性差,降低了其生物利用度~([2-3])。作为新型的药物载体,纳米脂质载体能够促进液态脂质向固态脂质的转化,提升药物包封率及载药量,与此同时增强药物与癌(本文来源于《浙江中医杂志》期刊2017年12期）
刘佳玉[7]（2017）在《药物代谢酶含量测定的液相色谱—平行反应监测质谱方法的建立及应用》一文中研究指出研究背景I相药物代谢酶细胞色素P450氧化酶(cytochrome P450 oxidase,CYP450)和II相药物代谢酶尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UDP-glucuronide transferases,UGTs)主要存在于肝脏中,参与多种内外源性化合物(包括药物)的代谢,Cytochrome P450 oxidoreductase(POR)和cytochrome b5(b5)作为药物代谢酶的供电子物质在药物代谢中也具有重要的作用。CYP450和UGTs的多态性和含量差异是引起药物药效个体差异的重要因素,肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是我国常见的肿瘤之一,临床上,肝癌及其并发症治疗时药物的剂量需要及时调整,然而,作为剂量调整的基础,CYP及UGT的含量在HCC病人中是如何改变的,至今尚不完全清楚,因此,CYP450和UGTs含量的研究对肝癌病人临床个体化治疗方案的制定有重要意义。目前测定肝药酶含量的常用方法有免疫印迹法(Western blot)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)。其中,基于抗原抗体结合原理的Western blot法和ELISA法虽具有高灵敏度的特点,但特异性抗体制备困难,并且无法同时对同一样本中的多种蛋白定量。而LC-MS/MS不需要制备特异性抗体,并具有高通量、高特异性以及线性范围宽等特点。本文建立了液相色谱-平行反应监测质谱方法(liquid chromatography parallel reaction monitoring mass spectrometry,LC-PRM/MS),与选择反应监测质谱方法相比,LC-PRM/MS能够获得二级的所有碎片信息,并且结果能够搜库,保证定量的特异性。我们将建立的方法应用于肝癌病人肝硬化组织中的药物代谢酶含量的测定,期望为肝癌病人的临床用药提供参考。本论文共分为两个部分。第一部分使用稳定同位素标记技术制备了定量肽段串联体蛋白(Quantification concatemer,Qcon CAT);第二部分建立了平行反应监测方法,并将该方法应用于药物代谢酶的定量中。研究方法1.内标肽段的制备20种药物代谢酶和POR以及b5各挑选2-3条特异性肽段,将选出的特异性肽段串联成为了Qcon CAT蛋白,构建可以表达该蛋白的基因序列,将其导入大肠杆菌后使用含重标精氨酸和赖氨酸的SILAC培养基进行诱导表达,表达成功的重组蛋白使用GST填料进行纯化,SDS-PAGE鉴定纯度,并使用Trypsin进行酶解。2.内标肽段酶切效率和标记效率的考察酶切后的肽段使用数据依赖采集模式考察酶切效率和标记效率,使用Proteome Discoverer 2.1搜库检索,对酶切肽段定性。3.内标肽段的定量化学合成一条CYP1A2的标准肽段ASGNLIPQEK,使用氨基酸水解法进行定量,将含量已知的标准肽段梯度稀释,加入等量的内标肽段,使用液相质谱进行检测,计算内标肽段的含量。4.人肝微粒体的定量及酶切使用差速离心法制备人肝微粒体(Human liver microsomes,HLMs),用Bradford法对人肝微粒体进行定量,定量后取出10μg蛋白使用Trypsin酶切26小时。5.液相-质谱平行反应监测方法的建立将定量后的内标肽段与酶切后的人肝微粒体混合,使用数据依赖扫描模式,更换叁根预柱,平行测定两次,结果使用Proteome Discoverer 2.1搜库鉴定,确定目标肽段的保留时间和定量限,并筛选用于定量的子离子。6.标准曲线的建立将Qcon CAT蛋白梯度稀释,加入等量酶切后的人肝微粒体,使用液相色谱-平行反应监测质谱方法进行扫描,建立定量肽段的标准曲线。7.液相-质谱平行反应监测方法的应用将建立的平行反应监测方法应用于肝癌病人肝硬化组织中药物代谢酶含量的测定。研究结果1.重组蛋白纯度鉴定及定量SDS-PAGE分析结果表示,表达的重组蛋白纯度较高。使用Bradford法对重组蛋白进行定量,标准品的方程为y=9.8617x+0.1537,R2=0.9876,蛋白浓度为0.56 mg/m L。2.重组蛋白的定性使用Proteome Discoverer 2.1搜库匹配目标蛋白质信息,所有内标肽段均为目标蛋白的特异性肽段,匹配情况良好。3.重组蛋白酶切效率及标记效率的考察经分析,纯化蛋白仅存在一个漏切位点,占所有肽段的10%以下,即酶切效率高,各个肽段标记的均一性良好,标记效率均达到90%。4.重组蛋白的绝对定量使用子离子y5和y4的平均值作为Qcon CAT的定量结果,即134.75fmol;与两组定量曲线使用母离子的定量结果相差不到1.1倍。5.定量肽段保留时间和子离子的设置相同肽段使用不同色谱柱进行色谱分离时,肽段的保留时间存在的偏差,而在同一色谱柱上对相同肽段的保留时间偏差小于1分钟。使用搜库结果中信号强度最高的叁个子离子用于肽段的定量。6.标准曲线的建立使用PRM方法建立药物代谢酶定量肽段的标准曲线,R2值均在0.98以上,动态范围为5-200fmol。7.肝癌病人肝硬化组织中药物代谢酶的定量共测定12例样本中6种药物代谢酶的含量。CYP1A2、UGT1A1、UGT2B4、UGT2B15、POR以及b5在样本中的含量均值分别为67.36 fmol/μg、87.25 fmol/μg、92.97 fmol/μg、53.01 fmol/μg、140.65 fmol/μg以及84.91 fmol/μg。个体差异倍数分别为6.5、5.02、5.24、4.33、6.17和4.02倍;与正常组织相比,POR在肝癌病人的肝硬化组织呈高表达,UGT1A1与UGT2B15的含量与正常组织比有所降低,且差异显着(p<0.05)。结论1.本研究构建了串联体蛋白,实现了规模化内标肽段的制备,并保证了内标的纯度与标记效率;2.建立了药物代谢酶的PRM分析方法,在此基础上建立了绝对定量的标准曲线,线性关系为0.99,动态范围为5-200fmol;3.使用建立的方法测定了12例样本中6种药物代谢酶的含量,CYP1A2、UGT1A1、UGT2B4、UGT2B15、POR以及b5在样本中的含量均值分别为67.36 fmol/μg、87.25 fmol/μg、92.97 fmol/μg、53.01 fmol/μg、140.65 fmol/μg以及84.91fmol/μg。将结果与正常组织的结果进行比较,POR在肝癌病人的肝硬化组织呈高表达,UGT1A1与UGT2B15的含量与正常组织比有所降低,且差异显着(P<0.05)。(本文来源于《郑州大学》期刊2017-05-01）
美克古丽·艾买提[8]（2017）在《可调激光光源-微顺序注射联用技术在药物含量测定中的应用》一文中研究指出目的:建立可调激光-微顺序注射-阀上实验室荧光反猝灭法在线监测叔胺类药物含量的方法。方法:四苯硼钠对罗丹明B和亚甲基蓝的荧光信号有猝灭作用,而硫酸氢氯吡格雷,利血平,盐酸尼卡地平和盐酸丙咪嗪等药物分子中的叔胺结构质子化后,与四苯硼钠反应形成更稳定的疏水性离子缔合物,使罗丹明B和亚甲基蓝重新释放出荧光,且荧光信号的增强程度(△F)与这些药物的浓度成线性关系。根据上述原理,采用可调激光-光纤传感技术,建立一种荧光反猝灭法间接测定结构含有叔胺的药物含量的方法。结果:1.荧光信号的增强程度△F与硫酸氢氯吡格雷浓度线性回归方程为△F=4471.7C+12552,r=0.9984,线性范围为(0.07~2.82)×10-5 mol·L-1,检出下限为0.67×10-6mol·L-1,重复性RSD为2.94%,加标回收率在93.0%~99.5%之间。2.荧光信号的增强程度△F与利血平浓度线性回归方程为△F=11791C+278.87,r=0.9986,线性范围为(0.048~1.16)×10-5 mol·L-1,检出下限为0.1×10-6 mol·L-1,重复性RSD为0.58%,加标回收率在95.1%~99%之间。3.荧光信号的增强程度△F与盐酸尼卡地平浓度线性回归方程为△F=2827C+608.41,r=0.9991,线性范围为(0.047~4.97)×10-5 mol·L-1,检出下限为0.31×10-6 mol·L-1,重复性RSD为1.24%,加标回收率在93.8%~102%之间。4.荧光信号的增强程度△F与盐酸丙咪嗪浓度线性回归方程为△F=3574C+667.74,r=0.9995,线性范围为(0.078~3.99)×10-5 mol·L-1,检出下限为0.52×10-6 mol·L-1,重复性RSD为0.45%,加标回收率在94.5%~97.2%之间。用该方法对市售药品进行测定,测定值与药品标示值基本相符。结论:该方法简便易行,高效迅速,可用于测定叔胺类药物中有效成分的含量。(本文来源于《新疆医科大学》期刊2017-03-01）
王江红,尹晓莉,宋春丽,李琳丽[9]（2016）在《抗黑色素瘤新型药物Y731的含量测定及稳定性研究》一文中研究指出目的采用HPLC法测定新型抗黑色素瘤小分子药物Y731原料药的含量,并考察其稳定性。方法采用Phenomenex-C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为10 mmol·L~(-1)乙酸铵(p H9.2)-乙腈(50∶50),检测波长272 nm,流速1.0 m L·min~(-1),柱温30℃。结果 Y731能与相邻杂质峰完全分离,其线性范围为5~160μg·m L~(-1)(r=0.9995);高、中、低浓度样品的平均加样回收率分别为100.77%、100.52%、101.26%,RSD分别为1.56%、1.00%、1.45%(n=3);Y731在高温、高湿和强光照射条件下稳定。结论所用方法专属性强、灵敏度高,适用于Y731的含量测定和稳定性研究。(本文来源于《华西药学杂志》期刊2016年05期）
郑海林,崔琳静,吕桂霞,沈永年,符美华[10]（2016）在《不同部位皮肤癣菌分泌的角蛋白酶含量测定及药物敏感性实验》一文中研究指出目的:探讨不同部位皮肤癣菌的角蛋白酶分泌量差异及对抗真菌药物的敏感性差异。方法:选取临床上不同部位分离的59株皮肤癣菌,采用与角蛋白酶底物Keratin-azure共孵育后检测液体吸光值的方法进行角蛋白酶含量测定;同时采用CLSI M-38P的标准方法进行4种抗真菌药物的敏感性实验。结果:股癣和甲癣分泌的角蛋白酶略高于其他部位分离的菌株。不同部位的皮肤癣菌对伊曲康唑和特比萘芬的药物敏感性存在差异。结论:不同部位的皮肤癣菌其分泌的角蛋白酶量及对部分抗真菌药物药物敏感性也存在差异。(本文来源于《2016全国中西医结合皮肤性病学术年会论文汇编》期刊2016-04-21）
药物含量测定论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
金属络合剂和硫化氢供体药物是新药研发中两个较为特殊的对象,在对这两类化合物进行定量分析时,其特殊理化性质常导致精密度差,准确性低,定量线性范围窄等问题;现有这两类化合物的定量分析均通过较为耗时的衍生化方法实现,且方法难以重现。本文为放射性核素铀的促排剂双酚二胺四乙酸(CBMIDA)和第叁类气体信号分子硫化氢(H_2S)建立专属性强、灵敏度高、操作简便、易于重现、样品通量高、分析成本低的LC-MS/MS方法,并应用于其原料药与药物制剂的含量测定以及药代动力学研究,为新药申报提供技术和数据支持,也为同类型化合物的定量分析提供方法学参考。一、CBMIDA在体内外的LC-MS/MS分析方法建立及其在制剂含量测定和药物动力学研究中的应用在使用HPLC法对金属络合剂进行分析时,因其能够和分析系统中无处不在的金属离子发生络合而导致色谱峰畸形,分析精密度和准确度差,标准曲线线性范围窄。而目前多氨羧酸类螯合剂的测定方法几乎全部依靠测定其金属络合物来对络合剂进行定量。用于络合的金属种类、反应温度、pH、反应时间以及络合物的热力学稳定性均对络合物产率产生很大影响。待测物需要在较高温度下与适合的金属离子反应较长时间才能完全转化成同一种形式以供测定;此外这些方法液相分离多基于平衡时间较长、重现性较差的离子对色谱。本文选择耐酸、耐水且对极性和非极性化合物都有良好保留的Agilent Zorbax SB Aq柱作为分析柱,使用脉冲梯度色谱法并在流动相中加入甲酸和待测物的结构类似物EDTA,克服了金属络合剂分析中常出现的保留弱,峰形差,精密度、准确度和回收率低的问题,建立放射性核素铀的促排剂CBMIDA的快速、简便的体外LC-MS/MS测定方法。在流动相和样品溶液中加入EDTA可以掩蔽样品基质和分析系统中金属离子对络合剂测定的干扰,流动相中的酸可以抑制CBMIDA的解离,增加色谱保留,削弱金属配位能力,因而该方法可以直接测定CBMIDA原型药物,与现有螯合剂定量方法相比,具有更明显的简便性。应用该方法对CBMIDA的原料药和制剂进行含量测定,定量下限为25 ng?mL~(-1),方法在25~2500 ng?mL~(-1)范围内具有良好的线性,精密度和重现性考察RSD分别为1.31%和1.27%。由于CBMIDA能够与血浆蛋白中的金属离子发生络合,血浆样品前处理蛋白沉淀剂中同样需要加入EDTA才能提高CBMIDA在血浆中的回收率。将体外分析方法直接应用于血浆样品分析时,由于部分CBMIDA能够与色谱柱上沉积的血浆基质发生结合,导致色谱峰拖尾,峰后基线高于峰前;通过增加甲酸浓度进一步抑制CBMIDA的解离,减少其在络合过程提供的配位原子的数量,同时提高掩蔽剂EDTA的浓度,可以使CBMIDA和沉积于色谱柱上的生物基质作用变弱,从而解决生物基质引起的色谱峰拖尾和峰后基线高于峰前的问题。在血浆样品分析方法学考察时,针对多氨羧酸类螯合剂的金属络合和代谢特性,增加考察了抗凝剂对待测物血浆浓度的影响、酰基葡糖苷酸代谢产物对动物体内原型药物含量测定的干扰以及待测物37℃全血温孵稳定性。所建立Beagle犬和SD大鼠血浆样品分析方法专属性、精密度和准确度高,在0.1~10μg?mL~(-1)范围内呈良好线性,可成功应用于CBMIDA在Beagle犬体内的药代和毒代动力学研究以及SD大鼠体的药代动力学研究。本文所建立血浆样品分析方法与现有金属络合剂分析方法相比具有样品前处理条件温和、操作简单、样品通量高、定量线性范围较宽且耐用性强的特点,此外,针对儿茶酚多氨羧酸类螯合剂的特点,增加方法学考察的内容,因而该方法对儿茶酚多氨羧酸类螯合剂的生物样品分析方法优化具有实际参考价值。二、基于NBD捕获探针的H_2S供体药物制剂含量测定和药物动力学研究H_2S是继NO和CO之后的第叁类气体信号分子,已被证实能够参与多种疾病的进程,可用于心血管疾病、消化道疾病、急慢性炎症、帕金森病和阿尔茨海默病等疾病的治疗,因而H_2S供体也成为新药研发的候选药物。目前公认的专属性强、灵敏度高的H_2S定量分析方法以价格昂贵的单溴二胺(MBB)作为衍生化试剂,反应条件复杂苛刻,且生物样品定量分析的标准校正样品均为以缓冲溶液配制的反应产物(SDB)标准溶液,未考虑待测样品的基质效应和基质提取回收率对分析准确度的影响,不同课题组优化所得的最佳反应条件不一致,测得的同种动物体内H_2S的基线水平差别较大。开发反应简单,精密度、准确度和重现性好,成本低的新分析方法可推动H_2S生理病理机制研究的深入和H_2S供体药物的研发。本文基于NBD醚的硫解反应,选择常用的色谱改性剂4-Cl-NBD和以之为原料合成的四个探针NBDOMe、NBDOEt、NBDOTFE和NBDOCMR作为捕获剂对还原性、挥发性较强的H_2S进行LC-MS/MS定量。本文首先建立探针、探针与H_2S反应的产物和可能的副产物以及探针水解产物的LC-MS/MS检测方法,对上述五个探针与H_2S的最佳反应条件进行优化,并对探针的稳定性、选择性、反应速度和与H_2S定量反应的灵敏度和线性进行考察。然后选择与H_2S定量反应线性较好的NBDOEt和4-Cl-NBD对H_2S进行衍生化检测。这两个方法定量下限均为50 nM,标准曲线在50 n~5μM浓度范围线性良好,样品处理简单,精密度、准确度高,重现性好,被成功应用于Na_2S?9H_2O原料药和注射液中Na_2S的含量测定。采用NBDOEt和4-Cl-NBD对H_2S进行衍生化检测的灵敏度和线性与标准MBB法相当,但反应条件更加简单,且探针成本仅为MBB的十分之一。考察以NBDOEt和4-Cl-NBD探针对大鼠血浆中的H_2S进行捕获分析的回收率和灵敏度,结果发现,由于H_2S在体内主要以结合状态存在,以体外专属性较好、反应速度较快的NBDOEt探针对SD大鼠血浆中的H_2S进行测定的回收率小于30%,且精密度和重现性差,在血浆中加入抗氧化剂和巯基化合物常用还原剂并不能提高回收率。而专属性较差的4-Cl-NBD探针在pH为9.5左右可以和血浆中的硫化物(RSH)发生特殊反应而生成与H_2S反应相同的产物NBDSH。由于内源性硫化物的干扰,Na_2S血浆标准曲线线性无法达到生物分析要求,不能作为定量标准曲线。本文考察了H_2S全血和血浆稳定性、H_2S血浆标准曲线各浓度点的回收率以及NBDSH在血浆中的线性、精密度和回收率;结果,H_2S加入血浆和全血中之后10min内稳定;H_2S血浆标准曲线各浓度点绝对回收率在250%~500%范围内,但是同一浓度点回收率重现性良好,虽然标准曲线线性相关系数r~2小于0.99,但产物响应与Na_2S浓度呈正相关,标准曲线斜率重现性好;NBDSH血浆标准曲线在0.1~20μM范围内成良好线性,精密度考察LQC、MQC和HQC的平均绝对回收率分别为119.26%、86.75%和81.41%,RSD均小于15%;这些结果证实了以NBDSH的血浆标准曲线为定量校正曲线的合理性。此外,对每个实验对象采集多个空白点扣除平均背景值以消除内源性硫化物的干扰。最后,将血浆制备时间控制在10 min以内=并以NBDSH血浆标准曲线为定量校正曲线,本文可以准确测定SD大鼠尾静脉注射Na_2S注射液后体内H_2S的变化。本文所建立SD大鼠血浆中H_2S的测定方法样品前处理简单,充分考虑到反应回收率、基质效应和内源性干扰对分析准确度的影响,精密度和准确度高,重现性好。该方法为今后H_2S的病理生理机制和药代动力学研究提供新的技术思路。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
药物含量测定论文参考文献
[1].张倩茹,张艳,张建永,周卿,周旭美.“产-学-研”结合的药物分析实验教学改革——以山银花含量测定为例[J].广东化工.2019
[2].蓝丽爱.创新药物CBMIDA和H_2S的新型分析方法建立及其在制剂含量测定和药物动力学研究中的应用[D].中国人民解放军海军军医大学.2019
[3].张齐.关于药物分析实验教学方法的改进——以阿司匹林原料药含量测定为例[J].科技经济导刊.2019
[4].南沣,王影,张丹,米欣.片剂药物溶解方法对含量测定结果的影响[J].中国药业.2018
[5].曲耀成,姚雪静.重组蛋白类药物蛋白含量测定方法研究进展[J].药学研究.2018
[6].朱辰龙.高效液相色谱法在去甲氧基姜黄素纳米脂质载体中药物含量测定中的应用[J].浙江中医杂志.2017
[7].刘佳玉.药物代谢酶含量测定的液相色谱—平行反应监测质谱方法的建立及应用[D].郑州大学.2017
[8].美克古丽·艾买提.可调激光光源-微顺序注射联用技术在药物含量测定中的应用[D].新疆医科大学.2017
[9].王江红,尹晓莉,宋春丽,李琳丽.抗黑色素瘤新型药物Y731的含量测定及稳定性研究[J].华西药学杂志.2016
[10].郑海林,崔琳静,吕桂霞,沈永年,符美华.不同部位皮肤癣菌分泌的角蛋白酶含量测定及药物敏感性实验[C].2016全国中西医结合皮肤性病学术年会论文汇编.2016
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