靶向沉默甲基转移酶3对前列腺癌细胞增殖、侵袭和克隆能力的影响

靶向沉默甲基转移酶3对前列腺癌细胞增殖、侵袭和克隆能力的影响

论文摘要

目的探讨小干扰RNA靶向沉默甲基转移酶3(METTL3)基因对前列腺癌DU145、PC-3细胞增殖、侵袭、克隆能力的影响。方法将DU145、PC-3细胞随机设立空白对照组(无任何处理)、Mock组(仅加转染试剂)、阴性对照组(阴性siRNA干扰片段)、干扰组(METTL3-siRNA干扰片段),运用LipofectamineTM2000脂质体转染DU145、PC-3细胞,使用qRT-PCR,Western Blot实验分别检测METTL3的mRNA和蛋白表达情况,采用CCK-8、Transwell、平板克隆实验分别检测各组细胞增殖、侵袭、克隆能力。结果DU145、PC-3细胞干扰组转染siRNA-1400干扰片段48 h后,METTL3 mRNA的干扰效率分别为90%、72%(P <0.01),METTL3蛋白的干扰效率分别为87.2%、97.8%(P <0.01)。与空白对照组和阴性对照组比较,DU145、PC-3细胞干扰组细胞增殖、侵袭、克隆形成能力均显著下降(均P <0.05)。结论 METTL3基因下调后将明显抑制前列腺癌细胞的增殖、侵袭、克隆能力,可能是前列腺癌治疗的一个新型分子靶点。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 细胞培养
  •     1.2.2 METTL3 siRNA基因序列及其引物的设计和合成
  •     1.2.3 细胞分组和转染
  •     1.2.4 实时荧光定量聚合酶链反应
  •     1.2.5 Western印迹
  •     1.2.6 CCK-8增殖实验
  •     1.2.7 Transwell侵袭实验
  •     1.2.8 平板克隆形成实验
  •   1.3 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 实时荧光定量聚合酶链反应
  •   2.2 Western印迹
  •   2.3 CCK-8实验
  •   2.4 Transwell实验
  •   2.5平板克隆形成实验
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李显永,赵晖,顾鹏,崔庆鹏,李同海,陈印,官润云

    关键词: 前列腺癌,小干扰,增殖,侵袭,克隆

    来源: 实用医学杂志 2019年23期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 泌尿科学,肿瘤学

    单位: 昆明医科大学第一附属医院泌尿外科

    基金: 云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项资金项目[编号:2017FE467(-042)]

    分类号: R737.25

    页码: 3602-3607

    总页数: 6

    文件大小: 4118K

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