磷酸化调控泛素单体与Rad23A/Ubiquilin-1中泛素结合域互作的检测

论文摘要

泛素（ubiquitin,Ub）是一种广泛存在、高度保守的信号蛋白质,它能够特异性识别成千上万种靶蛋白,以非共价方式行使不同的功能,其中包含蛋白质降解.Ubiquilin-1（Ubql-1）和Rad23A作为两种蛋白降解的转运因子,都包含有与泛素结合的结构域,被称为泛素结合域（ubiquitin-associated domain, UBA）.2014年,泛素S65位磷酸化修饰的特异性激酶PINK1被发现,磷酸化使泛素在溶液中呈现舒展态与收缩态两种互相转换的构象.本文通过核磁共振（nuclear magnetic resonance, NMR）技术对UBA和磷酸化泛素之间的相互作用进行检测,观测磷酸化对UBA和泛素结合的影响.实验结果表明Rad23A-UBA2与Ubql-1 UBA都特异性的与磷酸化泛素的舒展态相互作用,但是磷酸化未改变泛素与UBA之间的亲和力.值得注意的是与Ubql-1 UBA相互作用时,磷酸化促进了泛素收缩态向舒展态的转换.

论文目录

• 引言
• 1 实验部分
•   1.1 样品制备
•     1.1.1 蛋白表达与纯化
•     1.1.2 磷酸化泛素蛋白样品制备
•     1.1.3 NMR滴定实验样品制备
•   1.2 NMR实验
• 2 结果与讨论
•   2.1 磷酸化对泛素与Rad23A-UBA2之间相互作用的调控
•   2.2 磷酸化对泛素与Ubql-1-UBA之间相互作用的调控
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 冉梦琳,覃凌云,唐淳,董旭

关键词: 泛素,磷酸化,核磁共振,蛋白质之间相互作用,泛素结合域

来源: 波谱学杂志 2019年01期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 波谱与原子分子物理国家重点实验室武汉磁共振中心(中国科学院武汉物理与数学研究所),中国科学院大学

基金: 国家重点研究计划资助项目(2017YFA0505400)

分类号: Q51

页码: 15-22

总页数: 8

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