导读:本文包含了体外试验论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:软骨,体外,干细胞,细胞,弯曲,溶酶体,纤维。
体外试验论文文献综述
黄婧,车琳,郭倪君,吴自力,林锦贤[1](2019)在《PLIN2介导脂滴与溶酶体互话调节AFB1诱导肝细胞中脂自噬的体外试验研究》一文中研究指出目的围脂滴蛋白家族(PLINs)作为调控脂滴(LD)形态和功能关键蛋白,介导LD与多细胞器接触通讯(如:LD-溶酶体依赖性脂自噬)参与调控脂质代谢稳态。外源物诱导的代谢性肝疾病已日益成为公共卫生领域关注焦点,但是,LD动态平衡介导的多细胞器通讯是否参与调控脂代谢紊乱关联性肝毒性转归新机制尚待阐明。因此,本研究拟探讨PLIN2介导的LD与溶酶体互话在外源物(如:黄曲霉毒素B1(AFB1))诱导脂滴动态调节中的作用。材料和方法采用人肝HepaRG和HepG2细胞给予AFB1(1.25μmol·L~(-1)、48 h)处理,建立人肝细胞暴露诱导LD动态变化模型;采用雷帕霉素(Rapa,20μmol·L~(-1)、12 h)干预,建立溶酶体活化介导自噬发生的模型。电子显微镜(TEM)观察LD结构及形态,用BODIPY标记活细胞成像(Live Cell Imaging)观察LD形态及与溶酶体互话动态变化情况;免疫印迹(WB)检测总蛋白中PLIN2和自噬相关蛋白(LC3B、p62)水平;免疫荧光(IF)检测LD探针(BODIPY)标记LD动态、及其与溶酶体探针(Lysotracker)共定位情况;油红O染色观察细胞中LD数量和分布,试剂盒法检测细胞总胆固醇(TC)和甘油叁酯(TG)水平。结果①与对照组细胞相比,AFB1处理组细胞中,TEM可见LD单层膜结构和内腔中性脂质;活细胞成像随时间延长(30s-135 min),细胞中绿色荧光LD数量增加、较大直径(>5μm)比例增加(增长10%),呈现生长扩张现象;油红O染色可见LD数量增加、分布面积增大,较大直径(>5μm)比例增高(HepaRG,13±0.2%;HepG2,23±0.3%。P<0.05);细胞中TC、TG水平增高。②PLIN2蛋白增加,且p62增高、LC3B降低;活细胞成像可见红色荧光数量减少,且LD和溶酶体距离增加;IF可见绿色荧光LD增加,红色荧光溶酶体减少,提示LD和溶酶体互话减少。③与AFB1处理组细胞相比,Rapa干预AFB1处理组细胞中,PLIN2蛋白降低,且p62降低、LC3B升高;IF可见BODIPY标记绿色荧光LD减少,Lysotracker标记红色荧光溶酶体增加,提示LD和溶酶体互话增加;油红O染色LD数量减少、分布面积降低,细胞内TC、TG水平下降。④与AFB1处理对照细胞相比,AFB1处理的siPLIN2干预组细胞中,PLIN2蛋白降低,且p62降低、LC3B升高;油红O染色可见LD数量减少、分布面积降低。结论 AFB1诱导肝细胞LD动态增长介导脂毒性,与经由PILN2调节LD与溶酶体互话抑制脂自噬及介导LD生长扩张有关;为探明PLIN2依赖性LD质量控制调控脂自噬的分子机制和靶向干预外源物诱导肝细胞脂毒性转归提供靶点和线索。(本文来源于《中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集》期刊2019-09-17)
张冰清,段梦园,张保中,龙波,王冬梅[2](2019)在《葡萄糖转运子9和尿酸转运子1在软骨细胞中表达的体外试验》一文中研究指出目的观察在软骨细胞中葡萄糖转运子(GLUT)9和尿酸转运子(URAT)1的表达,探讨软骨细胞中是否存在尿酸转运。方法选择2017年11月至2018年4月5例外伤性股骨颈骨折患者(排除痛风性等关节炎和病理性骨折)的软骨组织作为对象,用Western blot和免疫组化法测定软骨组织中GLUT9和URAT1蛋白表达水平,并以Ⅱ型胶原蛋白作为阳性对照。结果 Western blot结果表明,5例标本Ⅱ型胶原蛋白均为阳性,Ⅱ型胶原蛋白是软骨细胞的特征性蛋白,其染色阳性证实取材标本中包含软骨细胞。5例标本在59 kDa和70 kDa均有阳性条带,分别对应兔抗人GLUT9和兔抗人URAT1;免疫组化结果表明,软骨细胞样本中可见特征性的软骨窝结构;软骨细胞经Ⅱ型胶原蛋白抗体染色后细胞质均显现为褐色,URAT1和GLUT9两种抗体染色下,软骨细胞的细胞膜可见均一的褐色染色,细胞质内亦有褐色染色分布。结论 GLUT9和URAT1在软骨组织中呈高表达,可能存在尿酸转运过程,其是否参与痛风性关节炎的发生、发展,有待进一步研究。(本文来源于《中国临床研究》期刊2019年07期)
谭敏敏[3](2019)在《Gutta-percha和Resilon充填根管后牙齿的抗折性能的评估比较—体外试验的Meta分析》一文中研究指出背景:根管治疗后的牙齿相比于健康牙而言更加容易发生牙根纵折(vertical root fracture,VRF)。有研究表明使用Gutta-percha或Resilon充填根管可以增强根管治疗牙的抗纵折能力,而另有一些研究则呈现相反的结果,这些不一致的研究结果不利于临床医生做出最佳的决策。因此,本Meta分析的目的是采取循证医学的方法评估和比较Gutta-percha和Resilon充填根管后牙齿的抗纵折性能,为临床决策提供依据。方法:两名研究员独立检索PubMed,ScienceDirect,Cochrane Library,Embase,和Web of Science等数据库中发表的所有相关文献。并由该两名研究员独立阅读文献题目及摘要,根据既定的纳入和排除标准选择研究。提取纳入文献的数据,评价纳入研究的偏倚风险,采用Review Manager 5.3软件及Stata 12.0软件进行Meta分析。以标准化均差(SMDs)及95%置信区间(CIs)作为效应量,显着性水平设定为p≤0.05。I~2检验检测研究间异质性。结果:共有14篇随机对照体外试验纳入Meta分析。Meta分析结果表明未根管预备且未充填的根管其抗纵折性能显着强于Gutta-percha/AH plus(SMD=-0.69,95%CI=-1.34 to-0.04,p=0.04)或Resilon充填的根管(SMD=-0.54,95%CI=-1.07 to-0.00,p=0.05)。Gutta-percha/AH plus充填的根管与预备后但未充填的根管抗纵折性能无显着差异,而该两组根管的强度均显着弱于充填有Resilon的根管。结论:本Meta分析表明Gutta-percha/AH plus充填根管不能增强根管治疗牙的抗纵折性能,而Resilon可以。由于本Meta分析的结果基于体外试验,所以应谨慎将本结论直接应用于临床实践。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01)
温磊[4](2019)在《直肋软骨与弯曲肋软骨来源的移植物弯曲度的动物体外试验》一文中研究指出在进行肋软骨隆鼻,肋软骨雕刻的过程中我们发现弯曲肋软骨雕刻成的移植物更容易弯曲,而直肋软骨雕刻成的肋软骨不易弯曲。因此为了避免肋软骨弯曲带来的手术并发症,临床工作中通常希望能得到更多的直肋软骨。然而众所周知,临床直肋软骨的获取非常困难。因此我们提出了问题:弯曲肋软骨和直肋软骨雕刻成的移植物差异到底有多大?如果将其雕刻成不同厚度的移植物时又有什么区别?基于此,设计如下动物体外试验来得到相应结论。目的:通过动物体外试验,比较不同厚度的弯曲肋软骨和直肋软骨移植物在体外弯曲度的异同,从而一定程度上避免鼻整形手术中因肋软骨弯曲造成的鼻部偏斜。方法:30分钟内快速将8头健康家猪肋软骨取出,将弯曲肋软骨和直肋软骨分类并筛选,然后对筛选后的肋软骨进行雕刻,雕刻的肋软骨片规格:长度4cm,宽度0.4cm,厚度为变量,分别为0.1cm,0.2cm,0.3cm,0.4cm,0.5cm。最终弯曲肋软骨雕刻而成的软骨片为A组,直肋软骨雕刻成的软骨片为B组,每组又根据软骨片厚度不同分成0.1cm、0.2cm、0.3mm、0.4mm、0.5mm组,每组重复8例。无论是弯曲肋软骨还是直肋软骨,在雕刻时取肋软骨的中心部分,完全去除软骨膜,雕刻完毕后,在第5min,15min,30min,1h,2h,3h,1天对软骨片进行拍照记录。然后使用图形处理软件(精确测量每一张照片的弯曲度),然后通过数据统计分析得出体外实验对比结果。结果:(1)A组中,1mm、2mm、3mm厚的肋软骨从5min到30分钟内翘曲度变化较大,30分钟时,其翘曲度变化平均值分别为:7.588°、4.844°、4.198°,而30分钟到1日时间段内,其翘曲度变化平均值小于2度。无临床意义。4mm及5mm厚的肋软骨在5min到1日的全部时间段的翘曲度变化较小,无临床意义。(2)B组中,1mm、2mm、3mm厚的肋软骨全部时间段内翘曲度变化平均值小于2度,无临床意义,4mm及5mm厚的肋软骨在全部时间段的翘曲度变化较小,无临床意义。结论:(1)直肋软骨中间部分雕刻而成的肋软骨片无明显翘曲;弯曲肋软骨雕刻而成的1-3mm厚的肋软骨片发生明显翘曲,且翘曲方向同供体肋软骨弯曲方向相同。(2)弯曲肋软骨雕刻而成的厚度在1-3cm的软骨片30分钟内平均翘曲度变化值大于2,该翘曲度有临床意义,肋软骨片越薄越容易弯曲。因此临床工作中需要薄且有一定弯曲度的移植物如外侧脚支撑杆移植物、鼻翼缘移植物,可使用弯曲肋软骨雕刻。(3)无论是弯曲肋软骨还是直肋软骨雕刻成的4cm与5cm厚肋软骨片全部时间段的翘曲度变化在2度以内,无临床意义。因此临床工作中当移植物厚度大于4mm厚时,如鼻背盖板移植物,用直肋软骨和弯曲肋软骨雕刻均可。(4)直肋软骨中间部分雕刻而成的肋软骨翘曲度变化随着体外时间的增加无明显变化。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-05-01)
高红豆,胡文忠,姜爱丽,管玉格,张艳慧[5](2019)在《体外试验法模拟芒果中主要抗氧化物的相互作用关系》一文中研究指出本文研究了芒果中所含的4种主要抗氧化物-没食子酸、芦丁、维生素C(Vc)、还原型谷胱甘肽(GSH)的抗氧化活性。应用体外试验法模拟芒果中的4种抗氧化物及其复配组合,通过分析各抗氧化物及其复配组合对羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O_2~-·)、1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)的清除能力大小来判断抗氧化能力的强弱。结果表明,·OH的清除率最高的是没食子酸+芦丁+GSH+Vc复配组,达99%,清除率最低组为单一抗氧物Vc组,较最高组低27%;O_2~-·清除率最高的是GSH+Vc复配组,达87%,而没食子酸+GSH+芦丁的复配组对O_2~-·清除率最低只有4%;DPPH清除率最高组为芦丁+GSH复配组合,为35%,Vc+没食子酸复配组对DPPH的清除率最低,为2.50%。综上所述,抗氧化物的抗氧化性可单独发挥作用,也可能是组合式发挥迭加作用,对自由基清除效果最佳的是GSH+Vc。(本文来源于《现代食品科技》期刊2019年03期)
何文丹,刘磊,杨舒颜,唐颖[6](2019)在《化妆品功效评价(Ⅺ)——体外试验技术在发用化妆品功效评价中的应用》一文中研究指出综述了针对头发纤维的生物物理学仪器分析技术和针对头皮的体外生物学模型在发用化妆品功效评价中的应用,为发用化妆品进行功效评价时体外方法的选择提供了参考和指导,并对目前发用化妆品体外评价技术的现状和发展趋势进行了总结和展望。(本文来源于《日用化学工业》期刊2019年01期)
张丽,张凯丽,张晓敏,孙雨晴,张苹[7](2018)在《乙硫氨酸对神经干细胞作用的体外试验研究》一文中研究指出神经管畸形(Neural tube defects,NTDs)是出生缺陷中发病率和死亡率最高的疾病,通常在0.6‰以下。中国是个人口大国,NTDs患者人群庞大,尤以山西省发生率最高,发生率已高达3.15‰,甚至个别地区已达到20‰,严重影响人口质量,也给社会医疗带来沉重压力。叶酸代谢障碍与NTDs以及神经系统严重畸形有关已被报道,叶酸通过甲基四氢叶酸,为S-腺苷蛋氨酸代谢提供甲基(SAM),SAM是体内DNA、RNA、蛋白甲基化和活性甲基化小分子的甲基供体。本课题利用乙硫氨酸诱导出NTDs模型作为实验组,并于E13.5提取正常以及干预后胚胎神经干细胞,以及于E7.5给予乙硫氨酸干预后E13.5提取的神经干细胞。分别采用western blot检测凋亡蛋白caspase-3和BCL-2、的蛋白表达量;TUNEL方法检测不同神经干细胞的凋亡水平;检测不同神经干细胞分化水平以及采用CCK-8观察其增殖水平。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议摘要集》期刊2018-10-25)
车琳,郭倪君,黄婧,潘虹,黎思鹏[8](2018)在《线粒体膜心磷脂参与调节Drp1靶向干预介导肝癌细胞转归的体外试验研究》一文中研究指出目的线粒体膜心磷脂(CL)作为新的脂质信号,线粒体动力相关蛋白1(Drp1)作为线粒体动态中线粒体分裂的关键因子,二者在线粒体定位和分布均对细胞能量代谢、线粒体动力学和凋亡等起关键作用,特别是二者之间蛋白质-脂质关联性参与线粒体质量控制(MQC)等调控的分子机制尚待阐明。本研究旨在探讨线粒体CL外化与Drp1互作调控线粒体自噬对肝癌细胞转归的影响。方法采用生物信息学分析TCGA数据库中肝细胞癌(HCC)病人癌和癌旁组织RNA-seq数据中Drp1编码基因(DNM1L)的转录水平,Kaplan-Meier生存分析其与病人生存期的关联性。体外试验采用人肝癌HepG2、MHCC97H细胞,并给予Mdivi-1或si DNM1L建立Drp1抑制模型,以及Mdivi-1联合CCCP处理建立线粒体自噬干预模型;qPCR检测DNM1L mRNA水平;透射电镜(TEM)观察线粒体结构;心磷脂探针(NAO)、TOM20和LC3B抗体的免疫荧光(IF)染色观察共定位分布;蛋白免疫印迹(WB)检测Drp1和细胞周期相关蛋白水平;流式细胞术检测细胞周期。结果数据库分析,与癌旁组织相比,HCC病例肿瘤组织中DNM1L mRNA水平显着上调;且肿瘤组织中DNM1L高表达(n=65)患者的5年总体生存率显着低于DNM1L低表达(n=65)患者(P<0.05)。与人正常肝L02和QSG7701细胞相比,HCC细胞中DNM1L m RNA水平高表达(P<0.05);TEM观察和半定量分析显示HCC细胞株中线粒体数目明显减少(P<0.05)。体外试验中,Mdivi-1或si DNM1L处理组HepG2、MHCC97H细胞中Drp1、CDK2和Cyclin E1蛋白水平均降低(P<0.05)。CCCP处理组HepG2和MHCC97H细胞中线粒体碎片化和CL外化增加,NAO、TOM20和LC3B共定位增强;Mdivi-1联合CCCP干预组细胞中Drp1和LC3B蛋白降低、p62蛋白升高,线粒体碎片化和CL外化减少,叁者共定位减弱。结论 DNM1L基因(Drp1)高表达与肝细胞致癌和HCC患者预后有关;靶向Drp1干预经由调节HCC细胞周期和线粒体自噬影响细胞转归,与线粒体膜CL外化参与Drp1的互作和在线粒体的定位分布有关;为肝致癌过程中CL代谢通路的调控机制及其靶向干预提供新思路。(本文来源于《中国毒理学会第七次全国会员代表大会暨中国毒理学会第六次中青年学者科技论坛论文摘要》期刊2018-10-19)
赛福丁·阿不拉,阿依姑丽·买买提明,努尔艾力·麦提尼亚孜,阿得力江·吾斯曼,德力拜尔[9](2018)在《一枝蒿不同粗提物抗鸡新城疫病毒体外试验》一文中研究指出为研究一枝蒿的多糖、黄酮、多酚、生物碱、挥发油的抗鸡新城疫病毒的活性,多糖采用水煎醇沉法、黄酮采用浸提法、多酚采用超声法、生物碱采用超生辅助提取方法、挥发油采用水蒸气蒸馏法提取并测定含量。通过MTT法测定一枝蒿各成分对鸡成纤维细胞的安全浓度。在安全浓度以下5个浓度梯度范围内新城疫病毒(NDV)与药物以3种方式加到单层鸡成纤维细胞(CEF)上,即先加药后攻毒(阻断作用)、先攻毒后加药(抑制作用)、病毒和药物同时作用一段时间之后同时加入(直接杀灭作用),观察细胞的病变程度。细胞培养72h后用MTT法测定细胞D值的变化,用于评价药物对NDV感染细胞能力的影响。结果显示:多糖、多酚、黄酮、生物碱、挥发油均有一定程度的抗病毒活性,其中多糖对新城疫病毒的阻断作用及直接杀灭作用强于抑制作用。它们在抑制作用下的病毒抑制率分别为44.30%,11.00%,31.00%,12.94%和42.35%;直接杀灭作用下的病毒抑制率分别为27.27%,10.64%,22.85%,24.93%和10.38%;阻断作用下的病毒抑制率为33.33%,18.90%,35.19%,25.56%和40.74%。综上可知,多糖的抗鸡新城疫活性较好,其次是挥发油,可以作为进一步的研究材料。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2018年05期)
陈小莹,李欣然,王清,付霞霏[10](2018)在《CM-Dil标记示踪间充质干细胞可行性的体外试验》一文中研究指出目的探讨氯苯甲酰氨-1,1′双十八烷基-3,3′,3′,3′-四甲基吲哚羰基花青高氯酸盐(CM-Dil)体外标记骨髓间充质干细胞的可行性。方法分离培养并鉴定大鼠骨髓间充质干细胞,分别用1、2、4μg/mL的CM-Dil标记间充质干细胞,观察标记后15min、24h、48h、72h、传5代、传8代的标记率;用流式细胞仪检测标记前后细胞周期的变化;用细胞计数Kit-8(CCK8)法检测细胞增殖能力。结果采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞CD44、CD29表达阳性,CD34、CD45表达阴性。1、2、4μg/mL CM-Dil标记15min后标记率分别为(31.60±1.25)%、(88.73±1.79)%、(96.89±1.31)%,差异有统计学意义(F=1 757.21,P=0.000);4组间生长曲线趋势大致相同,且4组间G1期、S期及G2/M期细胞百分比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 4μg/mL CM-Dil细胞标记率高,无细胞毒性,可作为一种高效而稳定的体外标记间充质干细胞的方法。(本文来源于《重庆医学》期刊2018年11期)
体外试验论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的观察在软骨细胞中葡萄糖转运子(GLUT)9和尿酸转运子(URAT)1的表达,探讨软骨细胞中是否存在尿酸转运。方法选择2017年11月至2018年4月5例外伤性股骨颈骨折患者(排除痛风性等关节炎和病理性骨折)的软骨组织作为对象,用Western blot和免疫组化法测定软骨组织中GLUT9和URAT1蛋白表达水平,并以Ⅱ型胶原蛋白作为阳性对照。结果 Western blot结果表明,5例标本Ⅱ型胶原蛋白均为阳性,Ⅱ型胶原蛋白是软骨细胞的特征性蛋白,其染色阳性证实取材标本中包含软骨细胞。5例标本在59 kDa和70 kDa均有阳性条带,分别对应兔抗人GLUT9和兔抗人URAT1;免疫组化结果表明,软骨细胞样本中可见特征性的软骨窝结构;软骨细胞经Ⅱ型胶原蛋白抗体染色后细胞质均显现为褐色,URAT1和GLUT9两种抗体染色下,软骨细胞的细胞膜可见均一的褐色染色,细胞质内亦有褐色染色分布。结论 GLUT9和URAT1在软骨组织中呈高表达,可能存在尿酸转运过程,其是否参与痛风性关节炎的发生、发展,有待进一步研究。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
体外试验论文参考文献
[1].黄婧,车琳,郭倪君,吴自力,林锦贤.PLIN2介导脂滴与溶酶体互话调节AFB1诱导肝细胞中脂自噬的体外试验研究[C].中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集.2019
[2].张冰清,段梦园,张保中,龙波,王冬梅.葡萄糖转运子9和尿酸转运子1在软骨细胞中表达的体外试验[J].中国临床研究.2019
[3].谭敏敏.Gutta-percha和Resilon充填根管后牙齿的抗折性能的评估比较—体外试验的Meta分析[D].重庆医科大学.2019
[4].温磊.直肋软骨与弯曲肋软骨来源的移植物弯曲度的动物体外试验[D].吉林大学.2019
[5].高红豆,胡文忠,姜爱丽,管玉格,张艳慧.体外试验法模拟芒果中主要抗氧化物的相互作用关系[J].现代食品科技.2019
[6].何文丹,刘磊,杨舒颜,唐颖.化妆品功效评价(Ⅺ)——体外试验技术在发用化妆品功效评价中的应用[J].日用化学工业.2019
[7].张丽,张凯丽,张晓敏,孙雨晴,张苹.乙硫氨酸对神经干细胞作用的体外试验研究[C].中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议摘要集.2018
[8].车琳,郭倪君,黄婧,潘虹,黎思鹏.线粒体膜心磷脂参与调节Drp1靶向干预介导肝癌细胞转归的体外试验研究[C].中国毒理学会第七次全国会员代表大会暨中国毒理学会第六次中青年学者科技论坛论文摘要.2018
[9].赛福丁·阿不拉,阿依姑丽·买买提明,努尔艾力·麦提尼亚孜,阿得力江·吾斯曼,德力拜尔.一枝蒿不同粗提物抗鸡新城疫病毒体外试验[J].中国兽医学报.2018
[10].陈小莹,李欣然,王清,付霞霏.CM-Dil标记示踪间充质干细胞可行性的体外试验[J].重庆医学.2018