论文摘要
糖基化修饰是最常见、最重要的蛋白质翻译后修饰之一。但是,由于其复杂程度高、丰度低;难于富集分离;质谱分析灵敏度差等原因,规模化的糖蛋白分析面临巨大技术挑战。针对上述问题,我们发展了一系列糖蛋白、糖肽富集新材料、新试剂和质谱鉴定新方法,显著提高了富集效率和鉴定规模。（1）合成了多种糖肽和糖簇混合抗原,制备出亲和性高、非肽段序列依赖的O-GlcNAc糖基化修饰广谱性抗体,在HeLa细胞中鉴定超过5000个O-GlcNAc糖肽,获得了目前最大规模的数据集,并成功应用于营养代谢调控转录因子O-GlcNAc修饰及其转录活性的研究。（2）发展了多种新型糖链标记试剂,可对糖肽实现一步法高选择性富集和高效衍生化,在特异性富集糖肽的同时提高了质谱分析灵敏度。（3）针对传统固态富集材料存在固液界面传质阻力,严重抑制富集反应的技术瓶颈,创新性的提出了基于可溶性环境响应材料的类均相反应富集新策略。通过调节溶液体系的温度或pH值,可对该类材料的溶解性实现精确控制,实现了"均相反应"富集和"异相沉淀"回收,该策略成功应用于小鼠脑组织和HeLa细胞的N、O-糖蛋白、糖肽富集。（4）将所发展新方法用于受体蛋白、转录因子糖基化修饰的规模化鉴定,为营养代谢对EGFR、Yap等蛋白的糖基化修饰和功能调控研究提供有力工具。
论文目录
文章来源
类型: 国内会议
作者: 秦伟捷
关键词: 糖蛋白质组,分离富集,生物质谱,转录因子,受体
来源: 中国生物化学与分子生物学会2019年全国学术会议暨学会成立四十周年 2019-10-24
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学,生物学
单位: 军事医学研究院生命组学研究所国家蛋白质科学中心(北京)
分类号: Q51;Q503
页码: 72
总页数: 1
文件大小: 480k
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