抗原区论文_刘琪

导读:本文包含了抗原区论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,病毒,抗原,猪瘟,裂谷,结构,抗原性。

抗原区论文文献综述

刘琪^[1]（2019）在《猫泛白细胞减少症病毒的分离鉴定及VP2蛋白优势抗原区的原核表达》一文中研究指出猫泛白细胞减少症(feline panleukopenia,FP)是由猫泛白细胞减少症病毒(feline panleukopenia virus,FPV)引起的高度接触性传染病,以白细胞的严重减少和出血性肠炎为典型特征。该病呈世界范围流行,对宠物猫及野生猫科动物构成巨大威胁。FPV是一种无囊膜的单链DNA病毒,基因组两端含有发卡结构,中间部分编码两种蛋白:非结构蛋白(NS1、NS2)和结构蛋白(VP1、VP2)。本研究分离了一株FPV,并进行了生物学特性、基因组分析及VP2优势抗原区的原核表达,为研究北京地区FPV毒株的流行变异奠定基础。本研究从某动物医院一例FPV胶体金试纸条检测为强阳性的患病猫的粪便中分离到一株病毒,在CRFK细胞上盲传5代后,可以观察到明显的病变。经间接免疫荧光试验(IFA)、电镜观察及分子生物学等试验鉴定后,证实为FPV,命名为BJ04株。经动物感染试验证实该毒株能引起典型的临床症状和组织病理学变化。对病毒的全基因组进行克隆和序列测定,利用DNAstar软件对BJ04株与GenBank上公布的FPV、犬细小病毒(CPV)和水貂细小病毒(MEV)共28株细小病毒的VP2基因进行分析,发现BJ04株与其余27株的核苷酸同源性为98.3%~99.9%,氨基酸同源性为97.3%~100%;其中BJ04株VP2蛋白上的6个关键氨基酸与其他FPV毒株一致,也证实BJ04株的宿主为猫;利用DNAstar软件对BJ04株与GenBank上登录的FPV、CPV和MEV共26株细小病毒的NS1基因序列比较,显示核苷酸同源性为98.5%~99.9%,氨基酸同源性为98.1%~99.9%。使用生物信息学软件对BJ04株的VP2蛋白进行了抗原表位预测,确定了VP2蛋白上的第307~408位氨基酸为优势抗原区域,对该区域的基因进行原核表达。蛋白纯化后,进行Western blot试验,结果表明表达的重组蛋白具有很好的反应活性。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2019-05-01）

刘妍,徐东平^[2]（2018）在《再谈乙型肝炎病毒反转录酶区/表面抗原区基因变异的临床发生特点及意义》一文中研究指出在我国,拉米夫定(LAM)、阿德福韦酯(ADV)和恩替卡韦(ETV)长期广泛用于临床抗乙型肝炎病毒(HBV)治疗,导致恩替卡韦耐药患者累积增加,耐药变异形式复杂多样,其挽救治疗也成了临床关注的重点问题。HBV聚合酶/反转录酶(RT)区/表面抗原(HBsAg)S区基因重迭,核苷(酸)类似物引起的耐药变异可同时造成S区基因变异,其中rt A181T变异可同时引起sW172终止突变,形成截短型HBsAg,影响疾病进展;rt A181T有时还可引起sW172非终止变异,其临床发生特点和意义尚不明确;HBsAg阴转是慢性乙型肝炎功能性治愈的重要标志,但临床上有少数患者可同时检出血清HBsAg和HBs Ab阳性,其意义与机制尚未完全明确。我们的研究发现,发生在HBsAg主要亲水区(MHR)的免疫逃逸相关变异多见于隐匿性HBV感染患者和HBsAg/HBs Ab双阳性的HBV感染患者,其中如发生新增N-糖基化变异,则进展为肝细胞癌的风险显着增加;从患者分离的免疫逃逸变异株可显着降低HBsAg的抗原性和反应性。上述研究有助于深入认识HBV RT/S基因变异发生的临床特点、机制和意义,帮助临床合理制定抗病毒治疗方案,预测疾病进展风险。(本文来源于《解放军医学杂志》期刊2018年05期）

任鹏举^[3]（2018）在《猪瘟病毒E2蛋白抗原区可溶性表达及鉴定》一文中研究指出猪瘟(Classical swine fever,CSF)是危害猪健康的重要传染病之一,具有急性、热性和高度接触性等特性,给世界养猪业造成了巨大的经济损失。猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)在裂解酶的作用下能够形成4种结构蛋白和8种非结构蛋白。其中,囊膜糖蛋白E2蛋白是免疫优势蛋白,能诱导机体产生中和性抗体,保护动物免受猪瘟感染。对E2蛋白的深入研究发现,A、B、C、D区域是E2基因中的主要抗原区,对含有A、B、C、D区域的E2主要抗原区的表达纯化对猪瘟疾病的研究和检测具有重要研究意义和应用价值。本研究利用原核表达系统对E2蛋白中含有A、B、C、D区域的主要抗原区基因(531bp)进行表达,将E2抗原区基因与PET-28a-SUMO表达载体连接,构建表达载体PET-28a-SUMO-E2。用SUMO作为促溶标签增加蛋白的可溶性,,设置诱导温度37℃、28℃、16℃和IPTG浓度0.1、0.3、0.5、0.7、1 mmol/L,进行优化。结果显示,目的蛋白SUMO-E2在低温条件16℃时以可溶性形式表达,在IPTG浓度为0.7 mmol/L时,可溶性蛋白的表达量最多。经镍柱二次亲和层析后,得到浓度为0.7 mg/mL的目的蛋白。Western-blot分析和ELISA试验证明可溶性E2蛋白具有良好的反应原性,可以作为抗原应用于猪瘟抗体检测。E2蛋白的获得为后期猪瘟血清学检测方法的建立奠定基础。(本文来源于《郑州大学》期刊2018-04-01）

邓海君,黄勇,龙泉鑫,黄爱龙^[4]（2016）在《重庆地区乙肝疫苗免疫无效儿童病毒基因组表面抗原区变异研究》一文中研究指出目的 :探讨重庆地区乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)疫苗免疫失败儿童患者体内病毒表面抗原(surface gene)基因主要亲水区(major hydrophilic region,MHR)及a决定簇变异情况。方法:收集乙型肝炎病毒疫苗免疫保护失败患儿及未接种疫苗的乙型肝炎病毒感染患儿血清样本,通过扩增HBV S基因并测序,与相应基因型的标准序列进行比对分析。结果:243例免疫保护失败患儿体内病毒a决定簇突变检出率明显高于20例未经疫苗免疫组患儿(31.7%vs.10.0%,P=0.044);免疫失败组儿童体内病毒MHR突变率数值也高于未接种组儿童,在统计学上差异不显着(49.8%vs.30.0%,P=0.106)。在疫苗免疫失败儿童病例中,MHR和a决定簇突变发生与病毒低水平复制相关:突变组患儿DNA滴度均明显低于无突变组患儿(log106.9±1.8vs.log107.7±1.8,P=0.000;log107.1±1.6 vs.log107.6±1.9,P=0.000)。免疫失败儿童病例中,MHR突变组儿童谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)数值也明显高于未突变组(67.1±58.8 vs.56.5±51.8,P=0.018)。在243例疫苗免疫保护失败儿童体内病毒MHR区域中共检出145个变异氨基酸,热点变异类型主要包括I110L(6例)、K122R(15例)、T126A(18例)、I126T(14例)、M133L(7例)、G145R(6例)及Y161F(12例)等。进一步分析各类型突变与临床表型间差异,发现含G145R及Y161F突变病例体内血清病毒DNA水平明显低于无突变组(log106.8±1.1 vs.log107.5±1.8,P=0.048;log105.0±2.6 vs.log107.3±1.8,P=0.000)。结论:疫苗免疫保护失败儿童病例体内病毒a决定簇及MHR具有较高的突变率,且该区段的突变与病毒较低的复制水平及及较高的ALT相关。(本文来源于《重庆医科大学学报》期刊2016年01期）

李文良,韩林晓,毛立,杨蕾蕾,张纹纹^[5]（2015）在《猪Viperin主要抗原区的原核表达及多克隆抗体的制备》一文中研究指出采用PCR方法扩增猪Viperin蛋白主要抗原区基因,克隆入原核表达载体p ET32a,转化大肠杆菌BL21构建重组表达菌,经IPTG诱导表达重组蛋白,SDS-PAGE鉴定蛋白得到表达,分子质量约为40 ku。进一步优化蛋白表达条件为:IPTG终浓度为0.6 mmol/L,诱导5 h。采用His标签单抗对重组蛋白进行Western blot鉴定表明蛋白具有良好的抗原性。将蛋白质纯化后免疫新西兰大白兔,间隔14 d免疫4次,并采集血清。用间接ELISA方法测定血清抗体效价,结果表明,经过4次免疫血清抗体效价达到1∶409600,间接免疫荧光检测出现特异荧光,表明其能与Viperin蛋白发生反应。本试验为研究Viperin的功能、建立特异的检测方法奠定了基础。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2015年10期）

夏鹏,魏建超,陆莹梅,武专昌,李蓓蓓^[6]（2015）在《裂谷热病毒Gn蛋白主要抗原区的表达、纯化及抗原性分析》一文中研究指出目的通过原核表达系统制备裂谷热病毒Gn片段主要抗原区蛋白,获取纯化蛋白,并分析抗原性。方法将合成的裂谷热Gn基因用PCR的方法扩增具有保护性抗原表位的两段Gn1和Gn2,并将其定向插入原核表达质粒pColdⅠ中,构建重组表达质粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2,并将重组质粒转化到BL21(DE3)感受态中,以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达蛋白和表达量,并利用His-tag Ni柱进行亲和层析纯化,Western-blot鉴定表达蛋白。结果所构建的质粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2序列正确,SDS-PAGE检测到目的蛋白,Western-blot显示截断的Gn蛋白具有很好反应原性。结论成功纯化了裂谷热病毒Gn主要抗原区的表达蛋白。(本文来源于《中国人兽共患病学报》期刊2015年07期）

赵朴,苏红辽,刘兴友,赵坤,胡建和^[7]（2015）在《NS1基因主要抗原区的可溶性表达及其Dot-ELISA检测方法的建立》一文中研究指出【目的】可溶性表达猪流感病毒(SIV)NS1基因主要抗原区(NS1′)蛋白,获得具有良好抗原性的NS1′蛋白,并初步建立检测NS1抗体的斑点酶联吸附试验(Dot-ELISA)方法,为鉴别诊断猪流感病毒感染猪与疫苗免疫猪奠定基础。【方法】以质粒pET28a-NS1为模板,PCR扩增NS1基因抗原性较好的区段NS1′,用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后插入pET-32a(+),构建pET32a-NS1′,经PCR、EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切及DNA测序鉴定后,转化大肠杆菌Rosetta,用IPTG诱导表达,纯化NS1′并免疫家兔制备多克隆血清,对其进行SDS-PAGE、Western blotting检测和免疫荧光分析,并以纯化的NS1′作为包被抗原初步建立Dot-ELISA检测方法。【结果】PCR扩增获得了长约250bp的H3N2SIV NS1′片段;成功构建了重组载体pET32a-NS1′;SDS-PAGE和Western blotting检测结果显示,融合蛋白NS1′大小约34ku,该蛋白可溶,能与感染SIV的猪血清特异性反应,并且用纯化蛋白NS1′制备的多克隆血清能识别293T细胞中表达的NS1,建立的Dot-ELISA检测方法可鉴别猪流感病毒感染猪与疫苗免疫猪。【结论】实现了H3N2SIV NS1′蛋白的可溶性表达,表达产物具有良好的抗原性,以NS1′作为包被抗原,建立了检测NS1抗体的Dot-ELISA方法。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2015年06期）

夏鹏,沈丽,魏建超,钟登科,陆莹梅^[8]（2015）在《裂谷热病毒Gc蛋白主要抗原区的表达、纯化及鉴定》一文中研究指出根据裂谷热病毒(Rift valley fever virus,RVFV)M基因(Gen Bank登录号:DQ380206)序列,用PCR方法扩增其主要抗原区,将目的基因克隆至原核表达质粒p ColdⅠ中,将重组质粒转化到BL21感受态细胞中,诱导表达重组蛋白,将表达蛋白利用His-tag Ni柱进行亲和层析纯化。纯化后的蛋白分别应用SDS-PAGE、Western blot方法鉴定,结果显示,本研究不仅成功表达出Gc蛋白的主要抗原区,而且具有良好抗原性,为后续裂谷热抗原ELISA试剂盒的研制奠定了物质基础。(本文来源于《中国动物传染病学报》期刊2015年01期）

阮涛,孙国鹏,王丽,李鹏,朱艳平^[9]（2015）在《新城疫病毒xx08株HN蛋白主要抗原区的原核表达及其在抗体检测中的应用》一文中研究指出为建立检测新城疫病毒(NDV)抗体的间接ELISA方法,构建了新城疫(ND)xx08株HN基因抗原表位集中区基因片段的重组表达质粒p ET28a-r HN,加入IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE鉴定表明,表达的重组蛋白大小约为28 ku。Western blot分析表明,该重组蛋白具有良好的反应性。以纯化的HN蛋白为包被抗原建立检测NDV抗体的间接ELISA方法,优化试验条件后,抗原最适包被浓度为5μg/m L,血清最适稀释比例为1∶80,与HI试验结果符合率较高,且与鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)、鸡传染性支气管炎病(IBV)、鸡禽流感病毒(AIV)和鸡马立克氏病毒(MDV)等标准阳性血清无交叉反应。表明建立的间接ELISA方法可以用于临床新城疫抗体的检测。(本文来源于《河南农业科学》期刊2015年01期）

刘建,汤德元,李春燕,曾智勇,罗险峰^[10]（2014）在《猪细小病毒NS1非结构蛋白和VP2结构蛋白主要抗原区间接ELISA方法的建立与联合应用》一文中研究指出为了建立猪细小病毒野毒抗体的NS1-i ELISA和猪群PPV免疫抗体水平的VP2-i ELISA方法,试验采用猪细小病毒NS1和VP2基因主要抗原区纯化后的原核表达重组蛋白作为包被抗原。结果表明:检测灵敏度为1∶12 800;批内、批间重复性试验变异系数均小于10%,NS1-i ELISA方法与HI试验的符合率为100%;VP2-i ELISA方法与HI试验的符合率为94.7%,且比HI试验具有更高的敏感性。用这两种方法同时检测猪伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪乙型脑炎病毒(JEV)和猪O型口蹄疫病毒(FMDV)6种常见猪病病毒的阳性血清结果均为阴性。说明所建立的NS1-i ELISA和VP2-i ELISA诊断方法具有良好的重复性、敏感性和特异性。这两种方法可联合应于PPV野毒感染的快速诊断、流行病学调查、猪群免疫疫苗后PPV抗体水平的检测以及猪群PPV的净化。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2014年21期）

抗原区论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

在我国,拉米夫定(LAM)、阿德福韦酯(ADV)和恩替卡韦(ETV)长期广泛用于临床抗乙型肝炎病毒(HBV)治疗,导致恩替卡韦耐药患者累积增加,耐药变异形式复杂多样,其挽救治疗也成了临床关注的重点问题。HBV聚合酶/反转录酶(RT)区/表面抗原(HBsAg)S区基因重迭,核苷(酸)类似物引起的耐药变异可同时造成S区基因变异,其中rt A181T变异可同时引起sW172终止突变,形成截短型HBsAg,影响疾病进展;rt A181T有时还可引起sW172非终止变异,其临床发生特点和意义尚不明确;HBsAg阴转是慢性乙型肝炎功能性治愈的重要标志,但临床上有少数患者可同时检出血清HBsAg和HBs Ab阳性,其意义与机制尚未完全明确。我们的研究发现,发生在HBsAg主要亲水区(MHR)的免疫逃逸相关变异多见于隐匿性HBV感染患者和HBsAg/HBs Ab双阳性的HBV感染患者,其中如发生新增N-糖基化变异,则进展为肝细胞癌的风险显着增加;从患者分离的免疫逃逸变异株可显着降低HBsAg的抗原性和反应性。上述研究有助于深入认识HBV RT/S基因变异发生的临床特点、机制和意义,帮助临床合理制定抗病毒治疗方案,预测疾病进展风险。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

抗原区论文参考文献

[1].刘琪.猫泛白细胞减少症病毒的分离鉴定及VP2蛋白优势抗原区的原核表达[D].中国农业科学院.2019

[2].刘妍,徐东平.再谈乙型肝炎病毒反转录酶区/表面抗原区基因变异的临床发生特点及意义[J].解放军医学杂志.2018

[3].任鹏举.猪瘟病毒E2蛋白抗原区可溶性表达及鉴定[D].郑州大学.2018

[4].邓海君,黄勇,龙泉鑫,黄爱龙.重庆地区乙肝疫苗免疫无效儿童病毒基因组表面抗原区变异研究[J].重庆医科大学学报.2016

[5].李文良,韩林晓,毛立,杨蕾蕾,张纹纹.猪Viperin主要抗原区的原核表达及多克隆抗体的制备[J].畜牧与兽医.2015

[6].夏鹏,魏建超,陆莹梅,武专昌,李蓓蓓.裂谷热病毒Gn蛋白主要抗原区的表达、纯化及抗原性分析[J].中国人兽共患病学报.2015

[7].赵朴,苏红辽,刘兴友,赵坤,胡建和.NS1基因主要抗原区的可溶性表达及其Dot-ELISA检测方法的建立[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2015

[8].夏鹏,沈丽,魏建超,钟登科,陆莹梅.裂谷热病毒Gc蛋白主要抗原区的表达、纯化及鉴定[J].中国动物传染病学报.2015

[9].阮涛,孙国鹏,王丽,李鹏,朱艳平.新城疫病毒xx08株HN蛋白主要抗原区的原核表达及其在抗体检测中的应用[J].河南农业科学.2015

[10].刘建,汤德元,李春燕,曾智勇,罗险峰.猪细小病毒NS1非结构蛋白和VP2结构蛋白主要抗原区间接ELISA方法的建立与联合应用[J].黑龙江畜牧兽医.2014

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