牛妊娠相关糖蛋白BoPAG1的制备及生物信息学分析

论文摘要

[目的]获得高效表达并且抗原性较好的Bo PAG1（bovin Pregnancy associated glycoproteins 1）蛋白,并分析其生物信息学功能。[方法]扩增荷斯坦奶牛Bo PAG1基因,并将其连接在表达载体p ET-30a,并转化至大肠杆菌（DE3）中表达,用SDS-PAGE和Western Blot检测其免疫学特性,采用生物信息学方法对Bo PAG1基因编码蛋白的蛋白修饰、结构、线性B细胞抗原表位进行预测分析。并对不同物种间的PAG1以及荷斯坦奶牛Bo PAG的氨基酸做同源性分析。[结果]成功克隆Bo PAG1基因并表达相应蛋白,大小与预期结果相符,预测Bo PAG1蛋白具有18个B细胞抗原表位,其N端具有15个氨基酸组成的信号肽,并且有4处N连接糖基化,不同物种间PAG1氨基酸的同源性为95. 1%～97. 9%,Bo PAG蛋白家族氨基酸的同源性为86. 4%～97. 2%。[结论]成功表达并纯化获得了Bo PAG1蛋白。Bo PAG1蛋白N连接糖基化有4处并且预测出18个B细胞抗原表位以及15个氨基酸组成的信号肽。不同物种间PAG1及Bo PAG蛋白家族同源性较高。为Bo PAG1蛋白抗体的制备和功能的研究提供了基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 实验材料
•     1.1.2 试剂
•     1.1.3 仪器
•   1.2 方法
•     1.2.1 BoPAG1蛋白生物信息学分析
•     1.2.2 目的基因的获取
•     1.2.3 pET30a-BoPAG1及表达菌株的构建
•     1.2.4 目的蛋白的诱导表达
•     1.2.5 Western Blot检测
• 2 结果与分析
•   2.1 boPAG-1蛋白的生物信息学分析
•   2.2 BoPAG1基因的克隆
•   2.3 PET-30a-BoPAG1表达载体的构建
•   2.4 BoPAG1重组蛋白的诱导表达与纯化
•   2.5 Western Blot检测
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨亚军,王震,张洁,徐明国,陈创夫

关键词: 妊娠相关糖蛋白,原核表达,生物信息学分析

来源: 生物技术 2019年01期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 新疆石河子大学生命科学学院,新疆石河子大学动物科技学院

基金: 国家自然科学基金项目(31760668)

分类号: Q78;S823

DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.01.0006

页码: 29-34+89

总页数: 7

文件大小: 4545K

下载量: 117