导读:本文包含了种间核移植论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,胚胎,体细胞,小鼠,白血,供体,水牛。
种间核移植论文文献综述
于鸿浩[1]（2013）在《动物种间核移植研究概况》一文中研究指出近年来,世界各地研究者正在努力完善异种体细胞核移植的技术环节和基础研究,本文就国外种间核移植的研究、我国哺乳动物种间核移植的研究情况进行整理分析。(本文来源于《生物技术世界》期刊2013年06期）
剧世强,赵雪璠,张妍婷,孔妍,李建珅[2]（2012）在《小鼠-猪种间核移植胚胎玻璃化冷冻保存》一文中研究指出以小鼠卵丘细胞为供核细胞,猪体外成熟去核卵母细胞为受体,构建小鼠-猪种间体细胞核移植(iSCNT)胚胎,并以猪体细胞核移植(pSCNT)胚胎为对照,采用开放式拉长细管(OPS)法对所获iSCNT胚胎进行冷冻保存,研究不同冷冻保护液(ES、EFS和EDFS)及胚胎不同发育阶段(2-、4-、8-细胞)对冷冻效果的影响。结果显示:小鼠-猪iSCNT胚胎卵裂率与猪pSCNT胚胎相比无显着差异(P>0.05),但其8-细胞发育率则明显较低(28.1%对56.8%,P<0.05)。采用ES液作为冷冻保护液,iSCNT胚胎冻后存活率与EDFS组相似,但显着高于EFS组(28.6%和22.7%对9.5%,P<0.05);与其他发育阶段相比,2-细胞期小鼠-猪iSCNT胚胎可获得最高的冻后存活率;小鼠-猪iSCNT各期胚胎的冻后存活率均低于pSCNT组,但无统计学差异(P>0.05)。结果表明,以ES液为冷冻保护液,选择2-细胞期小鼠-猪iSCNT胚胎进行OPS法冷冻保存,可获得相对较高的冻后存活率,但iSCNT胚胎的冻后存活率和体外发育能力均较pSCNT胚胎低。(本文来源于《南京农业大学学报》期刊2012年02期）
侯新高[3]（2009）在《大鼠白血细胞核移入去核小鼠卵母细胞的种间核移植囊胚生成效果观察》一文中研究指出异种体细胞核移植(interspecies somatic cell nuclear transfer,ISCNT)又称种间核移植,是指体细胞核移植构建克隆胚所用的供体细胞利受体卵母细胞来源于不同物种,即将某一物种动物的体细胞核通过显微操作移植到另一物种动物的去核卵母细胞中获得重编程,构建成异种核质复合体,并使之发育的过程,所形成的重构胚发育至正常的囊胚或棳椹胚阶段,可以将它们移植到受体母畜或供体母畜体内继续发育(异种妊娠),直至最后产生新生个体,其后代主要表现为供体核物质的遗传性状。种间核移植技术在濒危动物保护、新品种培育、人类胚胎干细胞及生物基础学科研究等方面已经展现出美好的前景。近年来随着多莉羊的成功克隆,人们尝试了黄牛和水牛间、小鼠一家兔、小鼠一猪、小鼠一牛、大鼠一小鼠、大鼠一牛、绵羊一黄牛、猪一牛、羚羊一牛、人一牛、人一山羊、人一兔、人一猪等动物种间体细胞核移植的研究,除了野生北山羊一山羊、野生盘羊一绵羊获得个体,野生大熊猫一家兔种间发生早期妊娠以外,其他动物间也都分别得到了体外发育阶段不同的早期的胚胎,尤其是人一牛、人一山羊、人一兔和人一猪等人核胚胎均有报道发育至囊胚阶段。显然,异种重组胚对于受体母畜来说都具有一定程度的异质性,也即重组胚细胞核和细胞质中遗传物质的来源不可能同时与受体母畜的完全一致,异种妊娠的免疫排斥问题目前阶段仅依靠异种重组胚与受体母亲的自然亲和而维持其妊娠、产生出后代的结果是难以实现的,而且动物间亲缘关系越远这种自然亲和就会越困难,因此有人将力图克隆出大熊猫个体的研究抨击为违背自然科学规律的“伪科学”。然而,已知胚胎干细胞主要来源于囊胚,利用多种动物的去核卵母细胞生成人核囊胚用于人类胚胎干细胞建系的研究能够为异种体细胞核移植技术开辟新的意义重大的研究方向。利用这种异种核移植技术获得人的多潜能干细胞系后,再结合组织工程技术的应用,理论上能够形成治疗和修复人类疾病与所需要的各种组织和器官,有望解决目前因组织和器官来源短缺,许多患者未能得到很好治疗的难题。在人类利用克隆性治疗途径进行组织工程和细胞替代疗法的研究中,治疗血癌病人将是最迫切的研究内容之一。大量研究表明,脐血干细胞具有比骨髓及外周血更好的移植优势,但由于每份脐血所含的造血细胞数量较少,主要用于治疗体重小于45kg的患者,故而脐血移植用于成人受到了较大的限制。为了使脐血移植用于成人,探求体外扩增脐血干细胞的方法就显得尤为迫切,异种核移植途径不失为未来最值得探索的、并有望能够解决这一根本问题的一个重要研究课题。然而,目前尚未见到选择血液细胞进行异种核移植的报道,选择白血细胞作为异种核移植的核供体不但在人医上临床意义比较大,而且白血细胞易于采集获得,胞核比较大,有望代替其他终端分化细胞成为囊胚生成效率比较高的用于异种核移植的核供体细胞。大鼠和小鼠同科而不同属,亲缘关系较近,但在自然条件下,种间公母畜不会进行交配。已经证明大鼠.小鼠的重构胚可以发育到囊胚阶段,这种囊胚不能在对方的子宫中与粘膜建立正常的接触而导致受妊困难。我们实验室在设计用于治疗性克隆胚胎干细胞的囊胚生成途径时将异种核移植作为一个新的研究方向,利用体细胞核移植技术路线,在本实验室以大鼠卵丘颗粒细胞为核供体建立了大鼠-小鼠种间核移植技术研究平台,并对大鼠白血细胞核移入去核小鼠卵母细胞的种间核移植囊胚生成途径进行了初步的探索。本研究旨在通过实验动物模型探索白血细胞作为核供体细胞进行异种核移植的可能性及其囊胚生成的效率,为进一步应用人的白血细胞进行异种核移植生产囊胚实验、探索用于治疗血癌病人脐血干细胞体外诱导生成新途径奠定基础。试验总结如下:1小鼠卵母细胞快速去核方法的研究本实验采用蔗糖预处理去核法、显微荧光染色、蔗糖预处理+显微荧光染色去核法对小鼠卵母细胞进行去核处理,统计利用每种去核方法进行核移植后重构胚的卵裂率(2-细胞率),旨在确定一种有效的去核方法。结果表明:利用蔗糖预处理-显微荧光染色去核法进行核移植所得到的2-细胞率最高,达到了为41.86%,与其他两组差异显着(P＜0.05)。由此可知,在对卵母细胞进行去核时采用蔗糖预处理.显微荧光染色去核法会达到较好的去核效果。2不同激活剂对大鼠卵丘颗粒细胞.小鼠去核卵母细胞重构胚激活效果的观察本实验采用了四种化学激活方法,对大鼠颗粒细胞—小鼠去核卵母细胞重构胚进行激活处理,观察统计利用每种激活方法进行激活处理所得到的卵裂率(2-细胞率),旨在寻找一种比较合理的激活方式。处理组1:含7%乙醇的mM16对卵母细胞激活处理5min;处理组2:含10mmol/L放线菌酮的mM16对卵母细胞激活处理4h;处理组3:含7%的乙醇对卵母细胞激活处理5min后,再用2.5 mmol/L 6-DMAP处理4h;处理组4:含10mmol/L SrC12的mM16对卵母细胞激活处理处理4h后,再用2.5mmol/L 6-DMAP处理4h。结果表明:在几中激活方案中,处理组4的激活效果最好,达到了40.42%,与其他组差异均显着(P＜0.05)。因此,在对重构胚进行激活时以乙醇(7%,5min)+CB(5μg/ml)+6-DMAP(2.5mmol/L,4h)进行处理会得到较好的激活效果。3不同培养液对大鼠卵丘颗粒细胞-小鼠去核卵母细胞重构胚的体外培养的影响根据2.2.2中实验结果,在确定比较合理的激活方式后,试验分1、2、3、4组,重新构建一定数量大鼠颗粒细胞—小鼠去核卵母细胞重构胚,激活的2-细胞进行体外培养,培养液分别为KSOM、M16、mM16、mCZB,观察过2-细胞阻滞发育到囊胚的情况,以探讨重构胚的体外培养条件。结果表明:在2-细胞胚的几中培养方案中,在mCZB培养液培养囊胚的发育率最高,为4.34%,与其他组差异显着(P＜0.05)。由此可知在对异种核移植2-细胞胚进行体外培养时以采mCZB较为合适。4大鼠白血细胞核移入去核小鼠卵母细胞的种间核移植囊胚生成效果观察采用蔗糖预处理-显微荧光染色去核法对小鼠卵母细胞进行去核处理,然后用显微注射法将白血细胞进行注核处理,对形成的重构胚采用乙醇(7%,5 min)+CB(5μg/ml)+6-DMAP(2.5mmol/L,4h进行激活处理,然后对激活胚采用mCZB进行体外培养,观察重构胚的体外发育情况,同时与以大鼠颗粒细胞为核供体、小鼠去核卵母细胞为核受体的重构胚发育情况做比较,旨在以大鼠卵丘颗粒细胞为核供体建立的大鼠-小鼠种间核移植技术研究平台的基础上,对大鼠白血细胞核移入去核小鼠卵母细胞的种间核移植囊胚生成途径进行探索性的研究。结果表明:在以大鼠卵丘颗粒细胞为核供体建立的大鼠-小鼠种间核移植技术研究平台的基础上,对以大鼠白血细胞为核供体进行异种体细胞核移植,可以获得囊胚,囊胚率为2.04%,比以大鼠颗粒细胞为核供体进行异种核移植所得到的囊胚率(4.34%)低,且差异显着(P＜0.05)。结论:(1)本实验中大鼠的供核细胞无论是卵丘细胞还是白血细胞,其核受体异种小鼠卯母细胞的去核方法以采用蔗糖预处理-显微荧光染色去核法去核效果较好。(2)在对重构胚进行激活时以乙醇(7%,5min)+CB(5μg/ml)+6-DMAP(2.5 mmol/L,4h)联合激活方法效果较好。(3)在对异种核移植重构胚进行体外培养时以采用mCZB作为胚胎体外培养基较为合适。(4)与大鼠卵丘颗粒细胞为核供体的试验结果相比,大鼠白血细胞为核供体进行异种体细胞核移植的效果比较差,但是可以获得囊胚,囊胚率为2.04%,与对照组4.34%的囊胚生成率相比差异显着(P＜0.05)。(本文来源于《西南大学》期刊2009-05-28）
张爱民,陈建泉,沙红英,陈娟,徐旭俊[4]（2007）在《继代核移植能成倍提高来自奶山羊卵胞质体的异种间核移植重构胚的发育率(英文)》一文中研究指出为了提高异种间核移植重构胚的发育率,本研究以体内排放的奶山羊成熟卵为供胞质的受体细胞,以人、兔、波尔山羊等的异种或亚种体细胞的原代核移植(Primary Somatic Cell Nuclear Transfer,PSCNT)重构早胚(8-16细胞期)的卵裂球作供核体,观察经亚种或异种卵胞质体短期"修饰"的核再移植产生的继代(Secondary SCNT,SSCNT)重构胚的着床前发育潜能。结果:人、兔、波尔山羊的继代桑椹/囊胚发育率均显着地高于其PSCNT胚胎(人,14.81%VS.7.79%;兔,23.53%VS.12.50%;波尔羊,55.35%VS.24.53%);这些早胚的各阶段发育时程仍遵循供核体动物正常受精卵的发育时程。结果启示:奶山羊成熟卵胞质对异种体细胞核亦具一定的去分化能力,能支持重构胚发育到囊胚;异种重构胚的发育特征是由供体核所决定的;继代核移植几乎能够成倍提高异种间重构胚的着床前发育率,提示核的去分化完全是在母型信息主导的调控之下完成的,而进一步发育的时序似乎是由核决定的;成倍延长在含母型信息主导调控环境中的时间能成倍提高SCNT重构胚的着床前发育率。(本文来源于《分子细胞生物学报》期刊2007年05期）
王艳多,李钟淑,张柏维,方南洙[5]（2007）在《动物种间核移植技术研究的历史、现状与展望》一文中研究指出种间核移植技术在动物遗传学和动物胚胎学上是一项重大突破,自20世纪60年代两栖类和鱼类获得成功,种间核移植技术不断发展先后在小鼠、牛、山羊、猪、猴、大鼠、大熊猫、兔等物种间进行了种间核移植,并在近几年产生了种间核移植出生个体,如印度野牛,欧洲盘羊,我国新疆北山羊、盘羊等。而且在近两年种间核移植技术应用于医学治疗性克隆,分别进行了人-兔种间核移植、人-山羊种间核移植等的初步研究。种间核移植技术研究不仅为核质关系、细胞核的分化和重新编程等基础问题奠定了理论基础,而且也是野生、濒危动物保护的有力工具,在农业和医学领域更是优良家畜品种选育繁殖的手段和为组织器官移植医疗保健提供帮助,从而造福全人类。(本文来源于《中国畜禽种业》期刊2007年05期）
李煜,梁琳,王振飞,旭日干[6]（2006）在《小鼠-牛体细胞种间核移植》一文中研究指出探讨了小鼠-牛异质胚构建的简便方法及小鼠体细胞核在牛卵母细胞中重新编程的可能性。以牛的卵母细胞为细胞质供体,用去除透明带及徒手切割的方法去核,设定电压1．5 KV／cm,脉冲时间40μs,与小鼠皮肤成纤维细胞进行电融合的融合率为67．44％,卵裂率为30．23％。融合细胞经离子酶素-6-DMAP激活,用微滴内压制做窝的方法培养小鼠皮肤成纤维细胞异质胚,异质胚的最终发育阶段为8细胞期。结果表明,去透明带牛卵母细胞经切割法去核,可用于小鼠异质胚构建;微滴内做窝的体外培养方法可避免无透明带胚胎的聚合。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2006年07期）
刘亚[7]（2002）在《黄牛体细胞-家兔卵母细胞种间核移植研究》一文中研究指出本试验以黄牛耳成纤维细胞为核供体，以超排家兔卵母细胞为受体，进行了牛体细胞种间核移植研究，并进行了供体细胞的冷藏和冷冻研究。试验中以经过五种方法处理过的牛耳成纤维细胞(新鲜及冷藏的非休眠期细胞、新鲜及冷藏的接触抑制细胞和冷藏的血清饥饿细胞)为核供体，同436枚超排兔卵构建重构卵，获得202枚重构胚，重构卵融合率为46.3％。180枚重构胚经体外培养后，112枚(62.2％)发育到2-细胞期，26枚(14.4％)发育到桑椹胚，最后获得20枚囊胚，重构胚囊胚发育率为11.1％。试验结果表明：超排兔卵母细胞可使牛耳成纤维细胞重新程序化，并支持重构胚发育到囊胚；牛耳成纤维细胞在冷藏19d以内以及冻-融对细胞的贴壁和生长无明显影响，冷藏14d的体细胞仍可用作核供体；含细胞松弛素B(cytochalasinB，CB)的融合液所造成的死卵率显着高于不含CB的融合液(P＜0.05)；以源自青年兔的卵作受体与源自经产兔的卵作受体，其重构卵融合率无显着差异(P＞0.05)，但在融合过程中，以青年兔的卵作受体的重构卵死卵率极显着低于经产兔卵作受体的重构卵(P＜0.01)；以血清饥饿细胞作供体的重构胚，8～16-细胞胚的发育率及桑椹胚发育率显着高于以非休眠期细胞作供体的重构胚(P＜0.05)，两种重构胚在囊胚发育率上差异极显着(P＜0.01)。本试验为发展动物种间克隆技术提供了理论与实践依据。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2002-06-29）
张运海[8]（2002）在《山羊体细胞—兔卵母细胞种间核移植研究》一文中研究指出本试验探讨了以MⅡ期去核的家兔卵母细胞为受体，以波尔山羊体细胞为核供体，开展山羊一家兔种间核移植(Nuclear transfer，NT)研究的可行性。结果显示，用上述细胞构建的279枚重组卵经电融合，获得126枚重组胚，重组卵融合率为45.2％(126／279)；在5％CO_2，38℃，饱和湿度条件下体外培养重组胚113枚，有72枚发生卵裂，卵裂率为63.7％(72／113)；最终有11枚发育到囊胚；囊胚率9.7％(11／113)。本试验结果还表明，①以传代培养的第2代山羊体细胞作核供体时，重组卵融合率显着低于以第5代和第6代细胞构建的重组卵(分别为22.6％，52.3％和48.9％；p＜O.05)，而重组胚囊胚率却明显高于以第5代细胞构建的重组胚(分别为41.7％和6.38％；p＜0.05)，但在重组胚卵裂率上叁种核供体构建的重组胚之间无明显差异(分别是85.7％，60.3％和45.5％；p＞0.05)；②用添加细胞松弛素B(Cytochalasin，CB)的融合液处理重组卵其融合率与不加CB处理组比较，在重组卵融合率、重组胚卵裂率、囊胚率等方面没有显着差异(p＞0.05)。③以冷藏4d的山羊体细胞作供核体细胞时，重组卵融合率显着低于新鲜消化的、冷藏2d和3d的实验组(p＜0.05)，但在重组胚卵裂率及囊胚率上差异不显着(p＞0.05)，提示短期冷藏的细胞可用于核移植核供体，但以冷藏3d以内的细胞为宜。因此，可以认为，MⅡ期去核的兔卵母细胞可以使波尔山羊体细胞去分化、重新编程，并支持种间重组胚的早期发育；本试验的结果也支持了卵胞质使体细胞核去分化不具有种特异性，哺乳动物种间重组胚在早期发育中，种间细胞核与细胞质之间是相容的推论。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2002-06-29）
谭世俭,李雪峰,石德顺[9]（2001）在《黄牛和水牛种间核移植研究初报》一文中研究指出本实验探讨了将体外培养成熟的水牛卵母细胞去核后 ,作为体外受精生产的黄牛胚胎细胞核移植的受体进行种间核移植的可能性。结果表明 ,黄牛与水牛进行种间核移植的重组卵有 54.2 %的融合率 ,显着地低于黄牛种内核移植的结果 ( 75.0 % ,P<0 .0 5) ;而卵裂率两者之间差别不大 (分别为 65.4 %和 71 .2 % ,P>0 .0 5)。但来自种间核移植的早期胚胎体外发育潜能很低 ,体外囊胚发育率只有 5.9% ,很显着地低于种内核移植的结果 ( 50 .0 % ,P<0 .0 1 )。用作种间核移植受体的体外成熟水牛卵母细胞质量较差可能是造成重组胚体外发育能力低的主要因素之一。(本文来源于《广西农业生物科学》期刊2001年01期）
王敏康,廉莉,李劲松,陈大元[10]（1999）在《鼠、兔异种间的核移植及胚胎发育研究》一文中研究指出本项研究利用小鼠2-细胞胚胎作供体,兔卵母细胞作为受体,研究了异种核移植胚胎的体外发育及移入母体后的发育情况.经FSH超排处理的母兔在注射hCG14～16小时后采用活体或处死后从输卵管冲卵.卵团移入含300IU/ml透明质酸酶的M_2中处理5～8分钟,吹(本文来源于《中国动物科学研究——中国动物学会第十四届会员代表大会及中国动物学会65周年年会论文集》期刊1999-06-30）
种间核移植论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以小鼠卵丘细胞为供核细胞,猪体外成熟去核卵母细胞为受体,构建小鼠-猪种间体细胞核移植(iSCNT)胚胎,并以猪体细胞核移植(pSCNT)胚胎为对照,采用开放式拉长细管(OPS)法对所获iSCNT胚胎进行冷冻保存,研究不同冷冻保护液(ES、EFS和EDFS)及胚胎不同发育阶段(2-、4-、8-细胞)对冷冻效果的影响。结果显示:小鼠-猪iSCNT胚胎卵裂率与猪pSCNT胚胎相比无显着差异(P>0.05),但其8-细胞发育率则明显较低(28.1%对56.8%,P<0.05)。采用ES液作为冷冻保护液,iSCNT胚胎冻后存活率与EDFS组相似,但显着高于EFS组(28.6%和22.7%对9.5%,P<0.05);与其他发育阶段相比,2-细胞期小鼠-猪iSCNT胚胎可获得最高的冻后存活率;小鼠-猪iSCNT各期胚胎的冻后存活率均低于pSCNT组,但无统计学差异(P>0.05)。结果表明,以ES液为冷冻保护液,选择2-细胞期小鼠-猪iSCNT胚胎进行OPS法冷冻保存,可获得相对较高的冻后存活率,但iSCNT胚胎的冻后存活率和体外发育能力均较pSCNT胚胎低。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
种间核移植论文参考文献
[1].于鸿浩.动物种间核移植研究概况[J].生物技术世界.2013
[2].剧世强,赵雪璠,张妍婷,孔妍,李建珅.小鼠-猪种间核移植胚胎玻璃化冷冻保存[J].南京农业大学学报.2012
[3].侯新高.大鼠白血细胞核移入去核小鼠卵母细胞的种间核移植囊胚生成效果观察[D].西南大学.2009
[4].张爱民,陈建泉,沙红英,陈娟,徐旭俊.继代核移植能成倍提高来自奶山羊卵胞质体的异种间核移植重构胚的发育率(英文)[J].分子细胞生物学报.2007
[5].王艳多,李钟淑,张柏维,方南洙.动物种间核移植技术研究的历史、现状与展望[J].中国畜禽种业.2007
[6].李煜,梁琳,王振飞,旭日干.小鼠-牛体细胞种间核移植[J].中国生物工程杂志.2006
[7].刘亚.黄牛体细胞-家兔卵母细胞种间核移植研究[D].安徽农业大学.2002
[8].张运海.山羊体细胞—兔卵母细胞种间核移植研究[D].安徽农业大学.2002
[9].谭世俭,李雪峰,石德顺.黄牛和水牛种间核移植研究初报[J].广西农业生物科学.2001
[10].王敏康,廉莉,李劲松,陈大元.鼠、兔异种间的核移植及胚胎发育研究[C].中国动物科学研究——中国动物学会第十四届会员代表大会及中国动物学会65周年年会论文集.1999
论文知识图
