论文摘要
新西兰匍柄霉（Stemphylium eturmiunum）是一种重要的丝状真菌,是能够进行有性生殖的少数匍柄霉属真菌之一。前人研究表明,asf1在DNA复制、DNA损伤修复和基因转录激活等生物学过程具有重要作用。然而关于asf1在生物发育方面的功能还鲜有报道。（1）本研究通过农杆菌介导的遗传转化方法将asf1基因从新西兰匍柄霉野生型基因组中敲除,得到asf1基因的缺失突变体,并对突变体进行了回补实验,获得asf1基因的回补转化子;asf1缺失突变体表型发生变化,asf1基因的回补转化子的表型基本与野生型一致。（2）为了验证asf1基因功能的保守性,将asf1基因转入大孢粪壳菌（Sordaria macrospora）asf1基因缺失突变体中,并获得asf1基因异源转化子,转化子表现出有性型特征,与野生型表型一致。（3）对匍柄霉野生型和asf1基因缺失突变体的转录组进行测序并分析,并初步界定了6个关键调控基因,分别为04320（脯氨酸脱氢酶）、10206（尿囊酸透性酶）、01950（热激蛋白）、03521（GTP结合蛋白gtr1）、10302（胆碱脱氢酶）和02026（转录调控因子）。将这6个关键调控基因沉默,得到单基因的沉默突变体,突变体表型发生变化。（4）对初步界定的6个关键调控基因,与ASF1、组蛋白H3和H4酵母双杂交实验和pull down实验,最后获得ASF1互作蛋白02026（转录调控因子）、03521（GTP结合蛋白gtr1）,组蛋白H4互作蛋白02026（转录调控因子）、04320（脯氨酸脱氢酶）、03521（GTP结合蛋白gtr1）、10302（胆碱脱氢酶）、01950（热激蛋白）。为了确定ASF1、组蛋白H3和H4与6个基因的互作情况,本研究正在做CO-IP实验,做进一步互作验证。通过转录组分析界定6个关键调控基因对新西兰匍柄霉典型种有性或无性发育的调控作用,还需要深入研究。研究asf1基因通过介导组蛋白的组装与解凝对其它基因的表达进行调控,进而对新西兰匍柄霉的有性及无性发育产生非常重要的影响,为深入研究匍柄霉属真菌的有性及无性发育提供了理论指导。
论文目录
文章来源
类型: 国内会议
作者: 王石,高素素,刘小缦,张修国
关键词: 新西兰匍柄霉,转录组分析,组蛋白,有性发育
来源: 多彩菌物 美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会 2019-08-03
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学,生物学
单位: 山东农业大学植物保护学院
分类号: Q949.32
DOI: 10.26914/c.cnkihy.2019.001963
页码: 43
总页数: 1
文件大小: 781k
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