论文摘要
以人的骨髓间充质干细胞为种子,在体位构建体外细胞机械牵张应力模型,探究新型机械敏感性离子通道Piezo1在干细胞向皮肤成纤维细胞转化的作用。采用梯度离心与贴壁筛选相结合的方法,体外培养人的骨髓间充质干细胞,隔代培养后,取生长状态良好的第3代干细胞,进行后面的研究。根据预实验结果,将干细胞分成以下几组:0 h机械牵张应力组、6 h机械牵张应力组、12 h机械牵张应力组和48 h机械牵张应力组,以及Piezo1蛋白的抑制剂Gs MTx4组。将各组细胞种植在Flexcell公司的膜性6孔板中,待融合率在80%左右时,进行体外机械牵张应力的干预。然后采用RT-qPCR、Western-blotting以及激光共聚焦免疫荧光的实验方法检测各组细胞中Piezo1的表达水平,以及干细胞向表皮成纤维细胞的转化水平。原代骨髓间充质干细胞大多呈短梭形,Piezo1表达水平较低。在周期性机械牵张应力的干预下,细胞向成纤维细胞的长梭形的形态学上发展,并且随着时间的延长,变化越明显。RT-qPCR、Western-blotting以及激光共聚焦免疫荧光均发现Piezo1和Vimentin蛋白的表达水平随着干预时间的延长,其表达量也相应增加。机械敏感性离子通道Piezo1蛋白可以介导骨髓间充质干细胞向表皮成纤维细胞转化,为体外构建组织工程皮肤提供种子细胞。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 陈云,李丽莎,陈鹏
关键词: 组织工程皮肤,骨髓间充质干细胞,机械敏感性离子通道,种子细胞
来源: 基因组学与应用生物学 2019年12期
年度: 2019
分类: 基础科学,医药卫生科技
专业: 外科学
单位: 邢台市人民医院,河北省临城县中医院
分类号: R622
DOI: 10.13417/j.gab.038.005760
页码: 5760-5765
总页数: 6
文件大小: 1620K
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标签：组织工程皮肤论文; 骨髓间充质干细胞论文; 机械敏感性离子通道论文; 种子细胞论文;