导读:本文包含了堆型艾美耳球虫论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:艾美,核酸,蛋白,抗体,疫苗,基因,免疫。
堆型艾美耳球虫论文文献综述
华恩玉,朱玉,汪飞燕,孔令明,刘丹丹[1]（2019）在《鸡堆型艾美耳球虫gam56基因的克隆及其表达产物的免疫原性分析》一文中研究指出为了研究堆型艾美耳球虫gam56基因的功能,提取堆型艾美耳球虫(扬州株)卵囊DNA,应用PCR扩增gam56基因,克隆至pGEM-T-Easy载体;测序、密码子优化后连接至pET-28a质粒,构建pET-28aEagam56表达载体,转化至大肠杆菌BL21;重组菌经酶切和测序鉴定后诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定。结果显示:gam56基因全长1 323 bp,编码440个氨基酸;重组蛋白大小约49 ku,以可溶蛋白形式为多,能被组氨酸单抗特异性识别;该重组蛋白能被小鼠抗重组蛋白多克隆抗体以及鸡抗堆型艾美耳球虫、鸡抗毒害艾美耳球虫、鸡抗巨型艾美耳球虫和鸡抗柔嫩艾美耳球虫的阳性血清特异性识别。本研究结果为进一步探析堆型艾美耳球虫gam56基因功能与研制鸡球虫病基因工程疫苗奠定了基础。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2019年12期）
康慧鑫,王丽,郑明学,白瑞,张黎[2]（2019）在《鸡堆型艾美耳球虫早熟株免疫效力分析及安全性评价》一文中研究指出选择不同首免日龄(1,2,4,6日龄)、不同免疫间隔期(间隔3,5,7,9,11 d)进行一次单剂量、单剂量重复和一次超剂量接种安全试验,计算相对增质量率、卵囊减少率、抗球虫指数(ACI)及病变记分、病变记分减少率(RLS),以确定堆型艾美耳球虫疫苗虫株最小首免日龄、免疫间隔期及安全性。结果表明,于4日龄以上首免组鸡攻毒后,十二指肠平均病变记分<1、RLS≥70%、死亡率为0、相对增质量率≥80%、卵囊减少率≥75%和ACI≥180,获得了良好的免疫效果,表明该疫苗虫株的最小首免日龄为4日龄;免疫间隔7,9,11 d的免疫攻毒鸡相对增质量率在90%以上、ACI到达185以上,表明二次免疫间隔7 d即可达到免疫效果;一次单剂量、单剂量重复和一次超剂量接种安全试验均发现,鸡肠道损伤较轻,病变记分均≤1,相对增质量率达到80%以上,表明鸡球虫病弱毒活疫苗(早熟株)符合疫苗安全性要求。(本文来源于《山西农业科学》期刊2019年09期）
康茜,任志军,唐欣浩,王雪伟,陈颖彬[3]（2018）在《天然鼠源噬菌体抗体库的构建及抗鸡堆型艾美耳球虫裂殖子单链抗体的筛选（英文）》一文中研究指出从未经主动免疫的BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR扩增鼠抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,将轻链和重链可变区基因经重迭延伸拼接PCR反应,构建成单链抗体(ScFv)基因。将ScFv基因克隆到噬菌体载体PCANTAB-5E,转化入大肠杆菌TG1中,筛选出阳性克隆,接种于LB培养基,经辅助噬菌体M13KO7拯救,构建天然鼠源噬菌体抗体库,并进行抗体库滴度测定,通过DNA finger printing技术及单链抗体基因序列分析鉴定抗体库的多样性。以堆型艾美耳球虫裂殖子为靶抗原,对构建的噬菌体抗体库进行亲和筛选,将强阳性重组噬菌体克隆感染大肠杆菌HB2151,经IPTG诱导表达可溶性ScFv抗体,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot鉴定,用ELISA法鉴定其对堆型艾美耳球虫裂殖子抗原的结合活性。结果表明,天然鼠源噬菌体抗体库成功构建,库容量约为2.50×10~(11) CFU/mol,单链抗体库具有一定的多样性。经过4轮亲和筛选,携带抗鸡堆型艾美耳球虫裂殖子表面抗原的特异性噬菌体抗体得到了富集。特异性ScFv抗体在E.coli中分泌表达,表达产物具有免疫活性。筛选出5个与鸡堆型艾美耳球虫裂殖子抗原结合活性较高的克隆,构建的单链噬菌体抗体库的有效表位具有多样性。本研究为进一步认识鸡球虫的各个发育阶段奠定理论基础,为鸡球虫病免疫控制研究提供参考。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2018年11期）
阎晓菲,孔苗,韩红玉,董辉,黄兵[4]（2019）在《堆型艾美耳球虫ATP酶基因的生物信息学分析及原核表达》一文中研究指出为研究堆型艾美耳球虫阳离子转运ATP酶(Eimeria acervulina Na+-K+-ATPase,Ea NKA)蛋白的生物学功能,根据Ea NKA基因(GenBank登录号:EU590120.1)设计1对特异性引物,以堆型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库为模板,对Ea NKA基因进行PCR扩增,将PCR扩增产物克隆入pUCM-T载体并进行测序鉴定,将测序获得的Ea NKA基因编码蛋白进行生物信息学分析。Ea NKA基因全长1157 bp,位于第81-368 bp之间,编码236个氨基酸,分子量约为25 kDa。编码蛋白主要位于内质网,不具有信号肽,编码蛋白主要位于内质网,不具有信号肽,有12个结构功能域,2个跨膜区,位于多肽N端的7个抗原表位。Blast分析显示其编码蛋白与堆型艾美耳球虫阳离子转运ATP酶相关蛋白序列(XP013248919、ACB97673)的同源性为100%。构建重组质粒p ET32a(+)-Ea NKA并进行测序鉴定,然后将重组质粒转化到大肠杆菌BL21感受态细胞,进行SDS-PAGE和Western blot表达鉴定。结果显示,构建的重组质粒可在原核细胞中成功表达45 kDa的融合蛋白。本研究成功获得Ea NKA基因的全长序列,并在原核细胞中成功表达,为今后研究该基因的功能及筛选基因工程疫苗候选分子奠定基础。(本文来源于《中国动物传染病学报》期刊2019年03期）
郭衍冰,曹利利,姚新华,董航,姜旭[5]（2017）在《堆型艾美耳球虫cSZ1基因重组卡介苗的抗球虫保护效果》一文中研究指出本试验将已构建的含有堆型艾美耳球虫cSZ1基因的重组卡介苗p MV361-cSZ1分别以滴鼻、口服和颈部皮下注射的方式免疫雏鸡,经检测各组体液和细胞免疫水平、OPG、相对增重率及ACI等指标,对重组卡介苗的抗球虫保护效果做出评价,为制备相关疫苗的研究奠定基础。(本文来源于《吉林畜牧兽医》期刊2017年10期）
黄艺华[6]（2016）在《鸡堆型艾美耳球虫Rhomboid增强型核酸疫苗构建及免疫保护作用》一文中研究指出鸡球虫病(Coccidiosis)是由艾美耳球虫属7种球虫引起的肠道寄生虫疾病,其中堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)是其主要病原之一。鸡球虫子孢子入侵到肠道上皮细胞并增殖使其严重受损从而导致饲料转化率降低、增重降低,这给养禽生产业造成极大的损失。过去,鸡球虫病主要靠药物防治,但是由此引发球虫耐药株的产生和药物残留等严重问题,现在球虫疫苗免疫防治逐渐替代药物防治,其中筛选有效的免疫抗原是制备高效新型球虫疫苗的基础和关键。Rhomboid属于广泛分布的丝氨酸蛋白酶家族,在球虫发育和信号转导中执行各种各样功能,特别是在球虫入侵过程中发挥着重要的作用,可能是其潜在的免疫性抗原。根据GenBank柔嫩艾美耳球虫Rhomboid基因序列(DQ323509.1)设计特异性引物,以堆型艾美耳球虫c DNA为模板PCR扩增包含Rhomboid基因ORF片段。抗原表位分析后设计表达区域特异性引物,PCR扩增后连接于pGEX-6p-1原核表达载体并成功构建重组质粒pGEX-Rhomboid。将此质粒转入E.coli Rosetta中IPTG诱导表达,SDS-PAGE显示有36 ku预期蛋白表达。纯化后的蛋白免疫新西兰大白兔制备兔抗Rhomboid多抗。ELISA检测多抗效价达216,Western-blot检测表明制备的多抗具有良好的反应性和特异性。本试验同时构建pc DNA-Rhomboid及pc DNA-IFN-γ-Rhomboid重组真核表达质粒,体外瞬时转染表明Rhomboid及IFN-γ均可在BHK21细胞内表达,可用作免疫动物DNA疫苗使用。试验雏鸡分为5组,分别为两个真核质粒免疫组即pc DNA-Rhomboid质粒免疫组(Rho组)和pc DNA-IFN-γ-Rhomboid质粒免疫组(IFN-γ-Rho组),两个攻虫对照组即PBS注射攻虫组(PBS组)和pc DNA3.1空白质粒注射组(pc DNA组)和不攻虫对照组(Control组)。在14及21日龄时,除Control组每只鸡分别胸部肌肉注射100μL PBS或100μg pc DNA3.1、pc DNA-Rhomboid或pc DNA-IFN-γ-Rhomboid,在28日龄时,感染组雏鸡口服接种孢子化卵囊1×105个。分别在14、21、28、35及42日龄时,检测每组雏鸡淋巴细胞增殖功能、血清中抗Rhomboid IgG抗体变化及体增重变化,35日龄时,检测各组的十二指肠病变计分、克粪便卵囊数量(OPG)值并计算抗球虫指数(ACI)。结果表明,Rho组与IFN-γ-Rho组的淋巴细胞增殖活性及特异性IgG抗体随着免疫次数增加显着或极显着高于对照组;Rho组与IFN-γ-Rho组ACI分别为166.35和172.40,起到较好的抗球虫保护作用。综上,Rhomboid可以作为一种抗球虫的潜在候选基因,鸡IFN-γ可以起到免疫佐剂作用。本研究为研制抗球虫病疫苗提供了理论和物质基础。(本文来源于《东北农业大学》期刊2016-06-01）
张振超[7]（2016）在《鸡堆型艾美耳球虫微线蛋白在侵入部位特异性中的作用》一文中研究指出艾美耳属球虫具有明显的寄生部位特异性,而寄生部位特异性取决于侵入部位特异性,但这些特异性机制至今尚不完全明了。本项研究拟选取十二指肠部位寄生的堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina,,E.acervulina),根据虫体配体与细胞表面受体相结合的原理,提取虫体子孢子全虫可溶性蛋白,与鸡十二指肠上皮细胞结合,提取结合后细胞总蛋白,并用子孢子蛋白高免血清识别,进行蛋白组分析确认虫体配体分子。再观察配体重组蛋白抗血清阻断虫体侵入和配体重组蛋白对攻虫的免疫保护作用,确定虫体配体。在此基础上,构建鸡十二指肠上皮细胞的cDNA文库,用酵母双杂交确认细胞受体分子,从而确定鸡球虫部位特异性的关键分子。除此之外,我们还对EaMIC2、EaMIC3和EaMIC5抗E.acervulina球虫的免疫保护作用进行了评估,并对免疫后实验动物的抗体、细胞因子及CD4+、CD8+变化水平进行了监测。本项研究对阐明鸡球虫部位特异性的分子机理有重要意义,对研究顶复门其他虫体的部位特异性也有重要借鉴意义。1与鸡十二指肠上皮细胞结合的E.acervulina子孢子可溶性蛋白的鉴定及功能分析通过免疫蛋白组、蛋白质质谱鉴定等方法筛选了堆型艾美耳球虫中与侵入相关的蛋白质分子,并且对这些筛选到的蛋白进行Gene Ontology(GO)分析。结果显示,虫体全蛋白可以与鸡十二指肠上皮细胞结合,其中85个艾美耳属蛋白被鉴定到。这85个蛋白中有16个是艾美耳属中与侵入相关的蛋白,剩余的69个蛋白是被鉴定到唯一肽段大于2。根据GO注释,16个蛋白中有9个蛋白和69中的41个蛋白被注释。在这9个与侵入相关的蛋白中大部分蛋白具有结合活性、催化活性和细胞过程等功能;而在41个唯一肽段大于2的蛋白中,29 (70.73%)个蛋白具有结合活性、20(48.78%)个蛋白具有催化活性。此外,结合到鸡十二指肠上皮细胞的E.acervulina MIC蛋白分子为EaMIC3。这些研究发现为我们进一步了解球虫在侵入过程中与宿主细胞间的相互作用提供了依据,同时也为更好的阐明鸡球虫的致病机制提供了分子基础。2 EaMIC2的分子特征和免疫保护作用的鉴定本章研究中,我们通过cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆了 EaMIC2的全长基因,并对其分子特性进行鉴定。序列分析表明EaMIC2的开放阅读框(ORF)长882bp,编码293个氨基酸,编码蛋白的分子量29.81kDa。EaMIC2 大部分的成熟蛋白(mpmEaMIC2)的基因序列(base: 82-882bp,amino acid: 28-293aa)被插入到原核表达载体pCold TF中表达重组mpmEaMIC2蛋白。Western Blot分析指出重组的mpmEaMIC2蛋白能够被自然感染E.acervulina鸡血清识别,并且子孢子中的天然EaMIC2蛋白也可被抗mpmEaMIC2重组蛋白的大鼠血清识别。免疫荧光染色结果表明EaMIC2可以被表达于E.acervulin 子抱子和裂殖子阶段。动物保护性实验指出重组mpmEaMIC2蛋白可以显着的提高实验动物的增重,降低平均病变计分和卵囊排出量。除此之外,EaMIC2还可以促使实验动物产生高水平的特异性 IgG 抗体、IFN-γ,IL-10,IL-17,CD4+ 和 CD8+。3 EaMIC5的分子特征和免疫保护作用的鉴定通过RACE技术获得EaMIC5基因的全长,然后对其分子特性进行鉴定。序列分析显示,EaMIC5的ORF是由336 bp个碱基组成,编码111个氨基酸。经推测EaMIC5蛋白的分子大小为12.18kDa。将此ORF克隆至原核表达载体pET-32a( + )中表达出重组蛋白EaMIC5。western blot分析,重组蛋白EaMIC5可以被人工感染Eacervulina的鸡血清所识别,而从子孢子提取的全蛋白中的天然的EaMIC5可以被免疫重组EaMIC5的大鼠血清检测到。免疫荧光分析到EaMIC5可以在子孢子和裂殖体阶段表达。动物实验的结果表明重组蛋白EaMIC5免疫鸡后能够显着的提高其增重、减少病变计分和卵囊排出,并且其抗球虫指数(ACI)为161.24。除此之外,EaMIC5还可以促使实验动物产生高水平的特异性IgG抗体、IL-4和sCD8。4 EaMIC3的分子特征和免疫保护作用的鉴定借助RACE技术获得EaMIC3的基因全长。序列分析揭示了 EaMIC3的开放阅读框(ORF )是2607bp,编码868个氨基酸组成的分子量为93.04kDa的蛋白。Western blot分析EaMIC3的免疫原性,结果表明重组的EaMIC3蛋白可以被感染E.acervulina的鸡血清识别,而子孢子可溶性全蛋白中的天然EaMIC3蛋白也可以被重组蛋白EaMIC3抗大鼠血清识别。免疫荧光分析指出EaMIC3蛋白可以表达于最acervulina的子孢子和裂殖子时期。动物保护性实验证实了重组蛋白EaMIC3能够显着的提高免疫EaMIC3组的增重、减少病变计分和卵囊排出,并且EaMIC3的抗球虫指数(ACI)为169.35。除此之外,EaMIC3还可以促使实验动物产生高水平的特异性IgG抗体、IFN-γ,IL-10,IL-17,TGF-β,CD4+ 和 CD8+。5 EaMIC3及其基序在E.acervulina子抱子侵入中的作用我们发现EaMIC3定位于E.acervulina子孢子的顶端并且能够和鸡的十二指肠上皮细胞结合。细胞ELISA分析表明EaMARRs均可以和鸡十二指肠上皮细胞结合,但是EaMARR3的结合能力最强。鸡肠道免疫组化实验结果表明EaMIC3可以特异性的与十二指肠结合,而不与其他肠段结合;据报道E.tenella微线蛋白3的MARR1b-1c-1d-1e (EtMIC3-MARR1b-1c-1d-1e,EtMARR1bcde)区域能够与盲肠特异性的结合,而我们用EaMARR3代替EtMARR1bcde中的EtMARR1b,融合蛋白EaMARR3-EtMARR1cde只能够与十二指肠特异性结合;EtMARR1b替代EaMIC3中的EaMARR3后,融合蛋白EaMARR12-EtMARR1b-EaMARR4-7变得只与盲肠特异性的结合。此外,我们发现EaMIC3的抗血清能够显着的抑制E.acervulin.子抱子侵入宿主细胞。因此,我们证实EaMIC3及其所包含的EaMARRs在E.acervulin.子孢子侵入过程中和寄生部位的特异性方面起着重要的作用。6 EaMIC3-鸡十二指肠上皮细胞酵母双杂交系统的构建及EaMIC3结合分子的筛选为了筛选EaMIC3在鸡十二指肠上皮细胞上的受体分子,在本章研究中我们构建了筛选所需的分裂-泛素酵母双杂交系统。从鸡的十二指肠中分离出上皮细胞,并提取其总RNA,构建均一化的cDNA文库。然后,构建酵母双杂交所需的诱饵质粒PDHB1-EaMIC3,并对其在酵母中的表达进行验证,确定所构建的诱饵株酵母菌可以用于酵母双杂交的筛选。实验结果表明:我们提取的鸡十二指肠上皮细胞的总RNA量多、纯度高、分子完整;插入重组文库质粒中的片段分布在500bp-2000bp,平均长度大约是1000bp。原始文库的滴度可以达到4×106cfu/mL,扩增过后的文库滴度可以达到4×109 cfu/mL,所构建的文库中各项指标均达到要求,可以用于EaMIC3结合鸡十二指肠上皮细胞蛋白分子的筛选。通过酵母双杂交技术从鸡十二指肠上皮细胞cDNA文库中钓取EaMIC3的结合分子,经营养缺陷培养基的筛选,我们获得了 43个阳性克隆。然后,我们对阳性克隆进行返板验证,之后再经过测序、分析,最终得到7个蛋白可以和EaMIC3结合。它们分别是:Epithelial cell adhesion molecule(EPCAM), Vesicle-associated membrane protein-associated protein B and C (VAPB ),Adaptor-related protein complex 3 delta l subunit ( AP3D1 ),Epoxide hydrolase 1(LOC421447 ) , Cb1 proto-oncogene E3 ubiquitin protein ligase ( CBL ),Ubiquitin-conjugating enzyme E2F( UBE2F )和 PDZ domain containing 1( PDZK1 X NCBI accession number : NM_001012564.1, NM_001006296.1, XM_004948765.1,XM_419497.4, XM_010723678.1,XM_013178750.1 和 XM_416669.5 )。对鸡十二指肠上皮细胞中EaMIC3蛋白分子的受体研究有助于阐明E.acervulina侵入和寄生部位特异性的机制。(本文来源于《南京农业大学》期刊2016-05-01）
黄艺华,冯俪,刘鹏,从培君,黄小丹[8]（2016）在《鸡堆型艾美耳球虫Rhomboid蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备和鉴定》一文中研究指出为了研究堆型艾美耳球虫Rhomboid蛋白的生物学功能及其作为潜在免疫抗原蛋白的可能性,根据Gen Bank上柔嫩艾美耳球虫Rhomboid基因序列(DQ323509.1)设计特异性引物,以堆型艾美耳球虫c DNA为模板PCR扩增包含Rhomboid基因ORF的片段。根据测序结果及抗原表位分析,设计表达区域特异性引物,PCR扩增后连接于p GEX-6P-1原核表达载体成功构建p GEX-Rhomboid表达质粒。将此质粒转入大肠杆菌Rosetta感受态细胞中进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析显示有36 ku的预期蛋白表达。蛋白纯化复性后免疫新西兰大白兔制备兔抗Rhomboid多克隆抗体。ELISA方法检测该多克隆抗体效价达到216,Western-blot及瞬时转染pc DNA-Rhomboid质粒表明,制备的多克隆抗体与堆型艾美耳球虫子孢子目的蛋白和真核质粒瞬时转染BHK21细胞表达蛋白均具有良好的反应性。本试验结果为进一步研究堆型艾美耳球虫Rhomboid蛋白的生物学活性奠定了基础。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2016年04期）
张黎,郑明学,马晋东,白瑞,蔡秀敏[9]（2016）在《鸡堆型艾美耳球虫早熟株的最小免疫剂量研究》一文中研究指出为确定堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)早熟株的最小免疫剂量,设立了6个早熟株1次免疫组、6个早熟株2次免疫组、2个空白对照组、2个攻毒组。SPF鸡4日龄时以200、300、400、500、600、1 000个/羽的剂量接种早熟株卵囊进行第1次免疫,于14日龄使用1次免疫2倍的剂量进行第2次免疫。一次/二次免疫组及各不免疫攻虫组分别于18或28日龄以2×105个/羽的同源强毒株进行攻毒,以相对增重率、病变记分、病变记分减少率、卵囊抑制率和抗球虫指数(ACI)等指标评价免疫效果,确定最小免疫剂量。结果显示,本次试验使用的早熟株具有良好的免疫原性,不同免疫剂量均能诱发雏鸡产生保护力,且随着免疫剂量的增加保护力逐渐提高。一次免疫剂量为1 000个/羽和二次免疫的首次免疫剂量大于等于400个/羽、第二次免疫800个/羽,可达到良好免疫效果,可分别定为E.acervulina早熟株一次免疫和二次免疫的最小免疫剂量。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2016年02期）
冯俪,聂思静,黄艺华,黄小丹,蔡皓璠[10]（2016）在《鸡堆型艾美耳球虫Hsp90克隆表达及其核酸疫苗的免疫保护作用》一文中研究指出利用RT-PCR方法从鸡堆型艾美耳球虫(E.acervulina)子孢子中成功克隆热休克蛋白90(Hsp90)基因,并构建其原核和真核表达质粒pET30a-Hsp90和pVAX-Hsp90。重组表达的89 kD可溶蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,间接ELISA和Western-Blot表明,其反应性和特异性良好。真核表达质粒pVAX-Hsp90体外瞬时转染间接免疫荧光检测可见成功表达。雏鸡真核表达质粒免疫后进行攻虫保护试验,结果表明,pVAX-Hsp90组较空载体组及PBS组增重极明显(P<0.01),且肠道病变减轻,OPG减少,抗球虫指数为166.17。综上初步评价了Hsp90核酸疫苗的免疫保护作用,表明Hsp90是一种潜在的鸡球虫保护性抗原。(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2016年01期）
堆型艾美耳球虫论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
选择不同首免日龄(1,2,4,6日龄)、不同免疫间隔期(间隔3,5,7,9,11 d)进行一次单剂量、单剂量重复和一次超剂量接种安全试验,计算相对增质量率、卵囊减少率、抗球虫指数(ACI)及病变记分、病变记分减少率(RLS),以确定堆型艾美耳球虫疫苗虫株最小首免日龄、免疫间隔期及安全性。结果表明,于4日龄以上首免组鸡攻毒后,十二指肠平均病变记分<1、RLS≥70%、死亡率为0、相对增质量率≥80%、卵囊减少率≥75%和ACI≥180,获得了良好的免疫效果,表明该疫苗虫株的最小首免日龄为4日龄;免疫间隔7,9,11 d的免疫攻毒鸡相对增质量率在90%以上、ACI到达185以上,表明二次免疫间隔7 d即可达到免疫效果;一次单剂量、单剂量重复和一次超剂量接种安全试验均发现,鸡肠道损伤较轻,病变记分均≤1,相对增质量率达到80%以上,表明鸡球虫病弱毒活疫苗(早熟株)符合疫苗安全性要求。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
堆型艾美耳球虫论文参考文献
[1].华恩玉,朱玉,汪飞燕,孔令明,刘丹丹.鸡堆型艾美耳球虫gam56基因的克隆及其表达产物的免疫原性分析[J].中国兽医科学.2019
[2].康慧鑫,王丽,郑明学,白瑞,张黎.鸡堆型艾美耳球虫早熟株免疫效力分析及安全性评价[J].山西农业科学.2019
[3].康茜,任志军,唐欣浩,王雪伟,陈颖彬.天然鼠源噬菌体抗体库的构建及抗鸡堆型艾美耳球虫裂殖子单链抗体的筛选（英文）[J].中国兽医学报.2018
[4].阎晓菲,孔苗,韩红玉,董辉,黄兵.堆型艾美耳球虫ATP酶基因的生物信息学分析及原核表达[J].中国动物传染病学报.2019
[5].郭衍冰,曹利利,姚新华,董航,姜旭.堆型艾美耳球虫cSZ1基因重组卡介苗的抗球虫保护效果[J].吉林畜牧兽医.2017
[6].黄艺华.鸡堆型艾美耳球虫Rhomboid增强型核酸疫苗构建及免疫保护作用[D].东北农业大学.2016
[7].张振超.鸡堆型艾美耳球虫微线蛋白在侵入部位特异性中的作用[D].南京农业大学.2016
[8].黄艺华,冯俪,刘鹏,从培君,黄小丹.鸡堆型艾美耳球虫Rhomboid蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备和鉴定[J].中国兽医科学.2016
[9].张黎,郑明学,马晋东,白瑞,蔡秀敏.鸡堆型艾美耳球虫早熟株的最小免疫剂量研究[J].中国兽医学报.2016
[10].冯俪,聂思静,黄艺华,黄小丹,蔡皓璠.鸡堆型艾美耳球虫Hsp90克隆表达及其核酸疫苗的免疫保护作用[J].中国兽医杂志.2016
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