核糖体工程技术选育阿维拉霉素高产菌株

论文摘要

阿维拉霉素是一种新型的代谢调节剂和消化促进剂,被广泛应用于国内外畜禽养殖中。菌种产素能力低、发酵工艺不成熟等因素限制了阿维拉霉素在国内的工业化生产。本研究通过核糖体工程技术,采用链霉素对实验室保藏的绿色产色链霉菌菌株（Streptomyces viridochromogenes gs 77）进行抗性选育,以获得阿维拉霉素高产突变菌株。经过药敏试纸法和高效液相色谱法（HPLC）筛选获得一株阿维拉霉素高产突变菌株S. viridochromogenes gs 77-54,摇瓶第8天时阿维拉霉素产量达到最大,为出发菌株的1.80倍,传代实验表明突变菌株高产性能遗传稳定。对突变前后菌株的形态特征和rpsl基因（编码核糖体蛋白S12）分析,结果显示突变菌株的气生菌丝长直形、较为粗壮,孢子为直径约1.1μm×0.6μm的椭圆形,与出发菌株存在明显区别。rpsl基因序列分析结果发现,该基因片段出现点突变,第356位的G突变为A,由精氨酸突变为谷氨酰胺。本研究筛选到阿维拉霉素高产突变菌株,为绿色产色链霉菌菌种选育提供了新的参考资料。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 菌种来源
•   1.2 培养基
•   1.3 主要试剂与仪器
•   1.4 孢子悬液制备
•   1.5 链霉素抗性突变菌株的获得
•   1.6 摇瓶发酵
•   1.7 高产阿维拉霉素的链霉素抗性突变菌株筛选
•   1.8 高产阿维拉霉素的链霉素抗性突变菌株稳定性实验
•   1.9 高产阿维拉霉素的链霉素抗性突变菌株与原始菌株形态特征比较
•     1.9.1 生长曲线的测定
•     1.9.2 形态观察
•   1.1 0 菌株突变前后rpsl基因分析
• 2 结果与分析
•   2.1 链霉素浓度对S.viridochromogenes gs 77的影响
•   2.2 阿维拉霉素高产菌株的筛选
•     2.2.1 链霉素抗性突变菌株筛选
•     2.2.2 阿维拉霉素高产突变菌株稳定性实验
•   2.3 S.viridochromogenes gs 77与S.viridochro-mogenes gs 77-54的表型特征比较
•     2.3.1 菌株发酵生长曲线的测定
•     2.3.2 形态观察
•   2.4 S.viridochromogenes gs 77与S.viridochrom-ogenes gs 77-54的rpsl基因分析
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘华华,陈宇航,陈敏

关键词: 阿维拉霉素,核糖体工程,菌株选育,链霉素抗性

来源: 农业生物技术学报 2019年07期

年度: 2019

分类: 农业科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业,畜牧与动物医学

单位: 浙江工商大学食品与生物工程学院

基金: 浙江省基础公益研究计划项目(No.LGN18C010001)

分类号: S816.7;TQ920.1

页码: 1322-1330

总页数: 9

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