盐穗木提取物对瘤胃微生物影响及抑菌成分鉴定

论文摘要

项目组前期进行体外抑菌筛选试验发现盐穗木对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌抑菌效果明显,因此本试验将盐穗木作为研究材料,评定其营养价值,筛选其抑菌成分,测定其抑菌谱和抑菌效价,分离抑菌活性单体,同时对得到的生物碱单体进行了瘤胃细菌体外抑菌试验,具体内容及结论如下:试验一:盐穗木不同时期的营养价值分析本试验旨在对新疆阿拉尔市周边团场半荒漠地和塔克拉玛干沙漠边缘荒漠地上生长的盐穗木进行营养价值评定,采用概略养分分析法,对返青期、生长旺盛期、枯萎期的盐穗木样品进行营养成分分析。结果表明,盐穗木三个时期常规营养成分含量差异较大,半荒漠地粗蛋白含量显著高于荒漠地（P<0.05）,返青期含量显著高于其他时期（P<0.05）;在同一时期内,粗灰分含量荒漠地均显著高于半荒漠地（P<0.05）;粗脂肪含量旺盛期显著高于其他时期（P<0.05）,最高达10.39%,含量变化上均呈现先升高后降低的趋势;酸性洗涤纤维在三个时期变化差异不显著,但在返青期,含量半荒漠地显著高于荒漠地（P<0.05）;中性洗涤纤维含量半荒漠地显著高于荒漠地（P<0.05）,最高达45.35%;钙、磷含量三个时期差异均显著（P<0.05）,但同一时期,荒漠地与半荒漠地的、含量并无较大差异,钙、磷在三个时期内变化均呈现先升高后降低的趋势。通过对比,在土壤较为肥沃的半荒漠区,返青至生长旺盛时期营养价值较高,可用于粗饲料的利用开发。试验二:盐穗木化学成分分析本试验采用系统预试法对盐穗木中含有的化学成分进行预试验,通过试管反应、滤纸片反应、多种指示剂和显色剂的显色反应、或沉淀反应对盐穗木水提液、95%乙醇提取液、石油醚提取液进行化学成分预试,初步探索盐穗木的化学种类。结果表明,盐穗木中含有氨基酸、多肽、蛋白质、糖类、有机酸、皂苷类、生物碱、挥发油及油脂类、甾体或三萜类、黄酮类、酚类、鞣质、蒽醌类、萜类内酯化合物等成分,为进一步研究盐穗木的生物活性及其开发利用提供了理论指导。试验三:盐穗木抑菌成分的提取分离鉴定本试验旨在对盐穗木抑菌单体进行研究,对盐穗木样品进行粗提、柱层析进行分离纯化、抑菌试验进行活性测定、薄层层析进行单体检验、气质联用进行单体鉴定、生物碱单体进行抑菌效果测定。结果表明,柱层析分离得到26个组分,正丁醇组分具有抑菌活性,其中组分3-6抑菌效果最好,其次是组分3-5,气相色谱-质谱鉴定单体3-5结构为氧化槐果碱,单体3-6结构为麻黄碱。盐穂木生物碱单体（麻黄碱）的最低抑菌浓度（MIC）为0.025 g/mL,最低杀菌浓度（MBC）为0.05 g/mL,抑菌效果显著。试验四:盐穗木抑菌单体对瘤胃微生物的抑制效果分析试验旨在研究盐穗木生物碱单体对瘤胃细菌的抑制效果,采用体外抑菌试验方法,对其抑菌性作一个评价。从瘤胃中共分离出6株瘤胃细菌,通过形态学观察、革兰氏染色以及生理生化鉴定,鉴定细菌A和细菌C为瘤胃球菌属,细菌B和细菌F为乳杆菌属,细菌D为短小杆菌属,细菌E为瘤胃双歧杆菌属。生物碱单体对D菌抑制作用最强,最小抑菌浓度为0.025 g/mL,对B菌、F菌和E菌最低抑菌浓度为0.05 g/mL,对A菌和C菌抑制作用弱,其最小抑菌浓度为0.1 g/mL。表明盐穗木生物碱单体对瘤胃细菌具有抑制作用。

论文目录

• 摘要
• abstract
• 英文缩略表（Abbreviations）
• 第1章 概述
•   1.1 研究背景
•   1.2 盐穗木概述
•     1.2.1 盐穗木简介
•     1.2.2 盐穗木研究进展
•   1.3 盐穗木化学成分提取方法
•     1.3.1 水提取法
•     1.3.2 有机溶剂提取法
•     1.3.3 碱提酸沉法
•     1.3.4 微波辅助提取法
•     1.3.5 超声波辅助提取法
•   1.4 天然产物分离纯化方法
•     1.4.1 大孔树脂吸附法
•     1.4.2 薄层色谱法
•     1.4.3 柱层析法
•     1.4.4 高效液相色谱法
•   1.5 盐穗木抑菌单体化合物结构鉴定方法
•     1.5.1 高效液相色谱—质谱联用法（LC-MS）
•     1.5.2 核磁共振法（NMR）
•     1.5.3 红外光谱法
•     1.5.4 紫外光谱法
•     1.5.5 气相色谱—质谱联用（GC-MS）
•   1.6 瘤胃微生物的研究进展
•     1.6.1 瘤胃微生物种类
•     1.6.2 瘤胃微生物的功能
•     1.6.3 抑菌药物对瘤胃微生物影响研究
•   1.7 研究的目的和意义
•   1.8 研究内容
•   1.9 技术路线
• 第2章 盐穗木不同时期的营养价值分析
•   2.1 材料和方法
•     2.1.1 试剂和仪器
•     2.1.2 试验地点概况
•     2.1.3 常规营养成分的测定
•     2.1.4 统计分析
•   2.2 结果与分析
•   2.3 讨论
•   2.4 结论
• 第3章 盐穗木提取物成分分析
•   3.1 材料与方法
•     3.1.1 材料
•     3.1.2 试剂与仪器
•     3.1.3 样品制备
•   3.2 结果与分析
•   3.3 讨论
•   3.4 结论
• 第4章 盐穗木抑菌成分的提取分离鉴定
•   4.1 材料与方法
•     4.1.1 样本的采集
•     4.1.2 试剂与仪器
•     4.1.3 盐穗木中的抑菌成分的提取
•     4.1.4 柱层析分离
•     4.1.5 菌液浓度的制备
•     4.1.6 盐穗木生物碱组分抑菌活性的测定
•     4.1.7 薄层层析
•     4.1.8 抑菌单体结构鉴定
•     4.1.9 盐穗木抑菌生物碱单体的抑菌效果测定
•   4.2 结果与分析
•     4.2.1 柱层析分离结果
•     4.2.2 盐穗木生物碱组分抑菌活性的测定结果
•     4.2.3 薄层层析结果
•     4.2.4 生物碱单体鉴定结果
•     4.2.5 盐穗木抑菌生物碱单体的抑菌效果测定
•   4.3 讨论
•   4.4 结论
• 第5章 盐穗木抑菌单体对瘤胃微生物的抑制效果分析
•   5.1 材料与方法
•     5.1.1 试验材料
•     5.1.2 试验方法
•     5.1.3 瘤胃细菌抑制试验
•   5.2 结果与分析
•     5.2.1 形态学观察
•     5.2.2 革兰氏染色镜检结果
•     5.2.3 生理生化试验结果
•     5.2.4 盐穗木麻黄碱和氧化槐果碱混合物的最低抑菌浓度
•   5.3 讨论
•   5.4 结论
• 第6章 全文结论及创新点
•   6.1 总体结论
•   6.2 创新点
•   6.3 有待进一步研究的问题
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 刘强

导师: 陶大勇

关键词: 盐穗木,粗饲料,活性成分,抑菌,单体,瘤胃微生物

来源: 塔里木大学

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 塔里木大学

基金: 国家自然科学基金项目“盐穗木正丁醇提取物及目标单体对St.aureus细胞壁作用机制研究”的部分研究成果(项目编号:31560711)课题主持人:陶大勇教授(塔里木大学)

分类号: S852.6

DOI: 10.27708/d.cnki.gtlmd.2019.000009

总页数: 71

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