导读:本文包含了人源性噬菌体抗体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:抗体,噬菌体,技术,甲状腺,大容量,全人,可溶性。
人源性噬菌体抗体论文文献综述
刘冬兰[1]（2017）在《人源特异性抗3型、7型腺病毒Fab噬菌体抗体库的构建及筛选》一文中研究指出【目的】构建人源特异性抗3型、7型腺病毒Fab噬菌体抗体库,筛选人源抗3型、7型腺病毒中和活性抗体。【方法】从含有抗3型和7型腺病毒高中和效价(﹥1:1000)抗体的志愿者全血中分离外周血单个核细胞(PBMC),提取总RNA后经逆转录PCR(RT-PCR)制备c DNA,然后以cDNA为模板分别扩增抗体轻链、重链可变区序列,再以pComb3噬菌体质粒为模板分别扩增轻链恒定区(Cκ/λ)和重链恒定区(CH1),将轻链可变区和轻链恒定区进行重迭延伸PCR(SOE-PCR),重链可变区和重链恒定区进行SOE-PCR,分别形成κ/λ轻链和Fd重链,再以κ/λ轻链和Fd重链为模板进行SOE-PCR,最终形成完整的Fab基因,Fab基因连接至p Comb3噬菌体质粒中,电转化大肠杆菌XL1-Blue,以辅助噬菌体M13KO7进行超感染,构建人源特异性抗3型、7型腺病毒Fab噬菌体抗体库。以纯化的3型、7型腺病毒完整病毒颗粒作为抗原进行亲和筛选,经过4轮筛选,富集特异性结合抗3型、7型腺病毒噬菌体抗体。化学发光酶免分析法(CLEIA)鉴定每一轮筛选后的总噬菌体以及第四轮筛选后的噬菌体单克隆,同时对获得的阳性克隆进行型别(Adv14、Adv55)特异性检测。获得的阳性单克隆进行DNA测序,然后将抗体序列IMGT/V-QUEST数据库中进行抗体序列分析,确定其CDR区和重轻链型别。从阳性克隆中提取质粒Pcomb3-Fab作为模板,分别扩增特异性轻链、重链可变区基因,并利用同源重组方法分别将轻、重链可变区基因克隆至真核表达载体Igk和IgH。共转染293T细胞进行瞬时表达,转染72h后收取细胞上清先用化学发光酶免分析法(CLEIA)、SDS-PAGE鉴定抗体的表达,然后再用CLEIA鉴定与腺病毒的结合活性。【结果】由于轻链的不同,分别构建了容量为3.0×109(轻链是κ)和1.8×109(轻链是λ)的抗3型、7型腺病毒的Fab噬菌体抗体库,Fab(Κ)和Fab(λ)基因插入率均接近100%。用纯化的3型腺病毒颗粒作为抗原从Fab库中筛选抗体,未筛选到与3型腺病毒特异性结合的阳性克隆;用纯化的7型腺病毒颗粒作为抗原从Fab库中筛选抗体,获得了4株与7型腺病毒特异性结合的阳性克隆,分别是5C、5D、9F、9H,型别特异性检测表明4株阳性克隆与3型、14型、55型腺病毒也有结合活性。阳性克隆进行DNA测序后在IMGT/V-QUEST数据库中进行分析比对,结果显示4株克隆序列各不相同,其中5C、9H的轻链型别是Κ,5D、9F的轻链型别是λ。4株阳性克隆的重链可变区、轻链可变区分别与人胚系免疫球蛋白基因有高度的同源性。5C、9H的Κ轻链可变区成功克隆入Igκ,5C、9F和9H重链可变区成功克隆入Ig H,2条轻链和3条重链组合成6个抗体,并在293T细胞表达。表达的细胞上清经CLEIA鉴定,6个抗体均得到表达,其中抗体组合2和组合5表达量相对较好,CLEIA鉴定结果显示与Adv7有结合活性。表达量相对较好的上清经SDS-PAGE鉴定,在还原和非还原状态下均未见目的条带,说明抗体表达量较低。全抗体型别特异性检测结果表明,表达量较好的抗体组合2和组合5与Adv3、Adv14、Adv55也有结合活性。【结论】成功构建了全人源特异性抗3型、7型腺病毒Fab噬菌体抗体库,筛选到4株与7型腺病毒特异性结合的抗体,并且抗体与3型、14型、55型腺病毒有结合活性。抗体序列转染293T细胞进行全抗体表达,由于抗体表达量较低,抗体活性需要进一步验证。本研究对抗腺病毒噬菌体抗体库的建立和筛选进行了各方面的探索,为未来抗3型、7型腺病毒治疗性抗体的研发提供参考和借鉴。(本文来源于《广州医科大学》期刊2017-03-01）
钮敏红,闫晓霏,吕卫东,万晓春[2]（2016）在《人噬菌体抗体库的构建及人源性IL-17单链抗体的筛选》一文中研究指出目的通过噬菌体展示技术构建人源单链抗体库,筛选抗IL-17的特异性抗体并鉴定。方法通过采集35位类风湿关节炎患者的外周血淋巴细胞,提取总RNA,逆转录合成c DNA,PCR扩增人H链和L链可变区抗体基因。利用SOE-PCR法将VH和VL片段拼接成Sc Fv片段并插入噬菌体载体p CANTAB5E中,构建人源噬菌体单链抗体库。通过固相化的抗原对抗体库进行3轮筛选后,挑取单克隆进行phage-ELISA鉴定,筛选与抗原具有较强结合性的噬菌体克隆。结果成功构建库容为3.5×10~8的噬菌体抗体库,从中筛选到5株阳性克隆,ELISA证实其对抗原IL-17具有较强的结合性及中和活性。结论成功构建了人源噬菌体单链抗体库,从中获得具有抗IL-17的人源Sc Fv抗体片段,为进一步的研究和应用提供实验基础。(本文来源于《中国临床研究》期刊2016年05期）
李楠[3]（2016）在《人源性阿尔茨海默病噬菌体抗体库的构建及Aβ单链抗体的筛选与初步效价研究》一文中研究指出阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种与年龄相关度较高的神经变性疾病,是老年期痴呆的主要原因,其引起的并发症是导致老年人死亡的最常见原因之一。临床表现以记忆障碍、认知障碍和精神障碍为主。由聚集在神经细胞外的以β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)为主要成分的老年斑(Senile plaques,SP),和聚集在神经细胞内的由过度磷酸化的Tau蛋白形成的纤维缠结(Neurofibrillary tangles,NFT)共同构成AD的重要病理改变。在AD的相关研究中,基于AD发病病因的多个假说被相继提出:例如胆碱能假说、Aβ假说、Tau蛋白假说和炎性因子假说等。最近的研究通常采用最普遍接受的Aβ假说,但Aβ假说对这种束手无策的疾病复杂的病理生理过程还是无法完美的解释。做为老年斑主要构成成份的Aβ在体内的生成是由淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)通过β和"-分泌酶剪切得来,APP属于跨膜蛋白,其跨膜胞外部分可以被#-分泌酶或β-分泌酶(BACE1)切割,从而产生两类N端具有可溶性的APP大片段,即APPs#和APPsβ,其相对应的残留在细胞膜上的C端APP片段分别为CTF#和CTFβ。然后CTF#和CTFβ可以分别由"-分泌酶(PS1)水解剪切产生Aβ片段。AD患者体内形成的Aβ蛋白有多种存在形式:可溶性Aβ单体、寡聚体、不可溶的Aβ纤维等,无论何种形式的Aβ蛋白对神经细胞都具有毒性,会导致神经细胞变性,继而发生凋亡,其中关键的问题是哪种结构的aβ类型与ad的发病机理联系最密切。在既往很长一段时间人们认为在细胞外异常沉积的aβ蛋白是ad的病理标记物,它也被认为是启动神经细胞变性和程序性死亡的重要病因。但最近的研究数据显示,最早生成于细胞内的具有可溶性的aβ单体及寡聚物往往是真正启动ad发病过程的关键所在,与aβ纤维相比具有更强烈的神经毒性,其中可溶性的寡聚体被认为与ad的发病,病情进展密切相关,可溶性aβ寡聚体的水平被认为在疾病的发病过程中尤其重要。最近的研究也特别强调了aβ寡聚体在突触的损伤中占主导地位,在ad病理性标记物中是仅有的参与到大脑功能损伤的信号。而且它也构成淀粉样斑块、启动和促进了ad的病情发展。aβ片段生成后,aβ缩氨酸自发地聚集成为可溶性的aβ寡聚体,这些寡聚物形成的纤维,继而形成不溶的片状结构而最终堆积成为弥漫性斑块。aβ1-42寡聚体是由神经元和相关联的星型胶质细胞的共同作用下产生,它能够引起氧化应激损伤,加速tau蛋白的过度磷酸化,从而造成对突触和线粒体的毒性作用。aβ1-42寡聚体拥有对富含胆固醇的膜表面持久的损伤能力,这些主要存在于少突胶质细胞和神经髓鞘中。目前的研究提示aβ1-42寡聚体在ad的损伤中占主要地位。针对于aβ1-42寡聚体的靶向免疫治疗可能是解锁ad治疗困境的有力钥匙。抗体库技术是筛选不同生物抗体的有力工具,具体是将外源性多肽表达于噬菌体的表面。抗体库技术被用来筛选及鉴定人源化治疗性抗体。约30%用于临床治疗性抗体是应用抗体库技术开发所得。除去治疗的价值,抗体库技术正逐渐在研究领域被用于识别及鉴定的目的。表达在抗体库表面的抗体或外源性多肽通常是依赖于目的基因的核酸序列与噬菌体外壳蛋白融合而实现的。在抗体库技术中,噬菌体是包含外来目的多肽核苷酸序列的展示系统。从抗体库中筛选抗体有多次的生物淘选过程。每一次的淘选都使抗体得到进一步的富集,可通过增加淘选的次数使抗体得到有效富集。高亲和力的抗体保留,低亲和力的抗体被洗脱掉。多次生物淘选后,仅有高亲和力的特异性抗体被保留下来。这使快速简便筛选单克隆抗体成为可能。特异性抗体基于不同的特性而被筛选出来,这使抗体库技术成为抗体筛选和工程化的有效途径。噬菌体抗体库技术是生产特异性抗体的重要来源,为ad的单克隆抗体治疗提供了基础和保障。本系列研究以此为切入点,分叁个部分探讨ad的单克隆抗体治疗的机制。第一部分,目的:构建人源性阿尔茨海默病噬菌体抗体库。方法:抽取20例ad病人的外周血,提取总rna,应用rt-pcr法得到人抗体vh和vl基因。将vh和vl连接,制备出scfv片段,然后将其酶切,再克隆到pcantab5e噬菌体载体上,电转化tg1感受态菌,辅助噬菌体m13k07超感染,构建出噬菌体单链抗体库。结果:从ad病人的外周血中成功提取总rna,逆转录pcr扩增vh,vl可变区基因,连接形成单链抗体,最终构建了库容为2.0$108的单链抗体库。bstnⅠ酶切鉴定构建的抗体库具有良好的多样性。结论:成功地构建了噬菌体展示的抗人阿尔茨海默病单链抗体库,为进一步筛选抗体,继而为ad治疗的进一步研究奠定了基础。第二部分,目的:筛选anti-aβ1-42特异性抗体。方法:以aβ1-42寡聚体为抗原,经过4轮“吸附-洗脱-扩增”叁步骤的生物淘选过程,并且在每轮结束时用洗脱得到的噬菌体来再次重复感染大肠杆菌,将其均匀涂布与sobag平板上,统计收获的百分率。在第四轮中,用筛选富集得到的阳性重组噬菌体来感染tgl,将其均匀涂布于sobag平板上。遵循随机化原则来挑取克隆,在辅助噬菌体m13k07的挽救下,分别生产出重组噬茵体抗体,用elisa方法对筛选到的阳性克隆进行诱导表达,sds-page和westernblot应用于特异性鉴定。结果:噬菌体抗体收获百分率呈上升趋势。大部分克隆产生的重组噬菌体都有较高的抗原结合活性。结论:4轮筛选后单克隆抗体得到有效富集。我们挑选活性最高的11a5进行下一步的研究。第叁部分,目的:所筛选出的anti-aβ1-42抗体11a5进行初步效价研究。方法:将11a5、商品化抗体6e10分别与aβ1-42寡聚体混合后脑定位注射于sd大鼠,对照组仅注射aβ1-42,30天后行morris水迷宫实验。将11a5,6e10分别经腹膜内注射于app-ps1模型鼠,每两周一次。分别于治疗后1,2,3月分析外周血中aβ的水平,脑组织中aβ的水平。结果:30天后水迷宫实验显示抗体混合组的sd大鼠较抗体注射组的大鼠行为学改变不明显;app-ps1小鼠治疗后1,2,3月的外周血的aβ水平上升,脑组织中aβ下降,水迷宫实验显示学习记忆能力有明显改善。以治疗后1个月最明显。结论:11a5能够结合aβ1-42使其失活,并且降低app-ps1模型鼠脑组织内aβ的水平,外周血中aβ的升高提示单克隆抗体对脑内的aβ有驱除致其外流的作用。本系列研究成功构建了人源性阿尔茨海默病噬菌体抗体库,并通过4轮“吸附-洗脱-扩增”生物淘选使阳性克隆达到有效富集,挑选出活性最高的人源性单克隆抗体11a5。通过动物实验证明11a5不仅能够直接与aβ1-42寡聚体结合使其失活,而且能使脑内的Aβ外流到外周,同时降低脑内Aβ的水平,使Aβ的聚集受限。本系列研究为AD的单克隆抗体治疗提供了初步的理论基础。(本文来源于《郑州大学》期刊2016-03-01）
蒋效,何立东,王欲晓,丁立,吴成林[4]（2015）在《利用大型天然噬菌体抗体库筛选抗死亡受体5人源抗体》一文中研究指出目的从大容量天然噬菌体抗体库中筛选抗人死亡受体5(DR5)单链抗体(sc Fv)并对其抗原结合活性进行鉴定。方法以前期真核表达纯化的DR5-Fc蛋白包被筛选管,从自主构建的大容量天然噬菌体抗体库中,通过4轮筛选过程获得噬菌体抗体,采用免疫细胞化学染色、ELISA鉴定其抗原结合活性;DNA指纹图谱分析和序列测定确定其抗体类型。结果经过4轮筛选,获得26株与DR5特异性结合的阳性克隆,DNA指纹分析有4种不同的可变区片段;经过基因测序,分析可变区基因的亚群,并将其制备成可溶性的抗体,进一步用免疫细胞化学技术证实所获得的抗体可特异性结合SW480细胞的DR5蛋白。结论利用噬菌体抗体库技术成功获得了特异性抗DR5的人源性sc Fv。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2015年06期）
余艳琼[5]（2014）在《人源抗EV71病毒Fab噬菌体抗体库的构建和筛选》一文中研究指出目的本研究采用噬菌体表面展示技术进行人源抗EV71病毒Fab噬菌体抗体库的构建和筛选，目的在于获得特异性针对EV71病毒、具有中和活性的人源性单克隆抗体，为EV71感染引起的手足口病的临床防治提供备择方案。方法采集16名志愿者外周血，利用间接免疫荧光（IFA）法检测血清抗体，并利用中和实验检测血清EV71病毒中和抗体滴度，筛选出EV71病毒血清中和抗体效价为1:128的成人的外周血，分离其淋巴细胞，提取总RNA并逆转录为cDNA。以cDNA为模板，运用人源抗体Fab段基因引物扩增出人源抗体轻链及重链Fd区，分步克隆至pComb3载体，并验证轻、重链插入率。使用辅助噬菌体VCSM13感染重组大肠杆菌XL1-Blue，对Fab噬菌体抗体库进行包装。在此基础上，以EV71病毒结构蛋白VP1上的中和线性表位SP70为抗原对Fab噬菌体抗体库进行富集筛选，经过叁轮“吸附-洗脱-富集”的过程后，将获得的重组噬菌体感染大肠杆菌XL1-Blue并诱导表达，利用SP70包被高吸附96孔板，对诱导表达后的菌上清进行筛选。结果（1）所构建的重组载体的轻、重链插入率均接近100%，所构建的Fab噬菌体抗体库的库容可达到108，满足抗EV71病毒Fab抗体筛选所需。（2）经过叁轮“吸附-洗脱-富集”的过程，共获得51株表达具有SP70多肽特异性结合活性及Fab活性重组蛋白的克隆，通过序列测定确定其基因序列，与Internet V-Base基因库比对确定IgG家族，与IMGT/V-QUEST数据库比对，确定51株阳性克隆的抗体轻、重链型别。结果显示共获得了3株轻、重链基因组合序列不相同的克隆株。ELISA实验进一步证明了这3株Fab抗体可特异性结合SP70多肽。结论本研究运用噬菌体抗体库技术，成功构建了人源抗EV71病毒Fab噬菌体抗体库，并从中筛选出了3株特异性针对EV71病毒结构蛋白VP1上的中和线性表位SP70的人源Fab抗体。(本文来源于《福建医科大学》期刊2014-05-01）
胡小丽[6]（2014）在《人源甲状腺髓样癌噬菌体抗体库的构建及初步鉴定》一文中研究指出目的：应用噬菌体抗体展示技术,构建大容量天然人源甲状腺髓样癌噬菌体单链抗体库。方法：提取甲状腺髓样癌病人癌周淋巴结总RNA,通过RT-PCR方法获得抗体可变区基因VH和VL基因片断，以它们为模板分别扩增VH-Linker和VL-Linker，再用SOE-PCR技术将之拼接组装成scFv基因片段后引入酶切位点sfiI和NotI。将scFv基因克隆入噬菌粒栽体pCANTAB-5E后经电转入大肠杆菌Ecoli TG1，之后经辅助噬菌体M13K07超感染，构建人源甲状腺髓样癌噬菌体单链抗体库。PCR鉴定scFv片段阳性插入率，1.0%琼脂糖凝胶电泳鉴定阳性克隆双酶切产物。结果：甲状腺髓样癌周围淋巴结总RNA的琼脂糖电泳结果可见清晰的28S、18S条带；VH基因的大小约为370bp，VL基因为350bp，组装后的scFv基因约为750bp。用pUC19标准质粒测定转化效率达到108cfu/μg，scFv的阳性插入率为87.5％(21/24)。结论：成功地构建了人源甲状腺髓样癌噬菌体展示文库，为进一步筛选具有甲状腺髓样癌细胞特异性的人源噬菌体单链抗体奠定了实验基础。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2014-05-01）
胡小丽,王政杰,庞华[7]（2013）在《人源甲状腺髓样癌噬菌体抗体库的构建及初步鉴定》一文中研究指出目的:应用噬菌体抗体展示技术,构建大容量天然人源甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)噬菌体单链抗体库。方法:提取MTC病人癌周淋巴结总RNA,通过RT-PCR方法获得抗体可变区基因V H和V L基因片断,以它们为模板分别扩增V H-Linker和V L-Linker,再用剪切重迭延伸PCR技术将之拼接组装成单链抗体可变区基因片段(single chain fragment variable,scFv)后引入酶切位点SfiⅠ和NotⅠ。将scFv基因克隆入噬菌粒栽体pCANTAB-5E后经电转入大肠杆菌Ecoli TG1,之后经辅助噬菌体M13K07超感染,构建人源MTC噬菌体单链抗体库。PCR鉴定scFv片段阳性插入率,1.0%琼脂糖凝胶电泳鉴定阳性克隆双酶切产物。结果:MTC周围淋巴结总RNA的琼脂糖电泳结果可见清晰的28 S、18 S条带;V H基因的大小约为370 bp,V L基因为350 bp,组装后的scFv基因约为750 bp。用pUC19标准质粒测定转化效率达到108cfu/μg,scFv的阳性插入率为87.5%(21/24)。结论:成功地构建了人源MTC噬菌体展示文库,为进一步筛选具有MTC细胞特异性的人源噬菌体单链抗体奠定了实验基础。(本文来源于《重庆医科大学学报》期刊2013年09期）
毕司英,毛晓燕,陈继军,秦海艳[8]（2012）在《人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库的构建及筛选》一文中研究指出目的构建人源抗狂犬病病毒单链抗体(Single-chain fragment variable,scFv)噬菌体抗体库,并进行筛选。方法以接种过狂犬病疫苗的21份高效价的健康人外周血为原料,提取淋巴细胞总RNA,PCR扩增VH、Vκ、Vλ基因,重迭延伸PCR扩增获得scFv基因,克隆入噬菌粒pS100,电转化E.coli TG1,建立scFv初级抗体库,并进行基因序列分析及鉴定。以灭活的狂犬病病毒为抗原,进行3轮scFv噬菌体抗体库的富集筛选,随机挑取单克隆,制备噬菌体抗体颗粒,并进行ELISA分析,阳性克隆进行序列分析,采用快速荧光灶抑制试验(Rapid fluorescent facus inhibition test,RFFIT)检测噬菌体抗体颗粒的中和活性。结果获得了库容为1.7×108的人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,该抗体库具有较好的序列正确率和多样性,经3轮筛选后,ELISA分析显示,共获得24个序列各不相同的针对狂犬病病毒的阳性克隆,对其中7个克隆的噬菌体抗体颗粒进行RFFIT检测,均具有中和活性。结论已成功构建了人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,并建立了筛选方法。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2012年12期）
董越华,胡占东,李常颖,畅继武,朱铁虹[9]（2012）在《人源Fab噬菌体抗体库的构建与抗精氨酸加压素抗体的筛选》一文中研究指出目的:构建人源天然Fab噬菌体抗体库,筛选抗精氨酸加压素特异性抗体并进行初步鉴定。方法:从18位健康成人的外周血淋巴细胞,提取总RNA。利用RT-PCR扩增人Fab抗体基因片段,将其克隆至噬菌粒载体pComb3XSS内,构建人源天然Fab噬菌体抗体库。以固相化的精氨酸加压素为靶抗原对抗体库进行五轮筛选后,随机挑取50个单克隆进行phage-ELISA检测,阳性克隆行DNA测序分析。结果:成功构建库容为2.4×10~8的噬菌体抗体库,从中筛选到6株阳性克隆能够与精氨酸加压素特异性结合,其中阳性值最高的C4克隆行DNA测序分析证实其重链属IgG亚类,轻链为λ链。结论:构建大容量人源天然Fab抗体库,从中获得了特异性抗精氨酸加压素人源Fab抗体片段,有望为临床上精氨酸加压素的快速检测技术的建立奠定基础。(本文来源于《5TH全国中西医结合内分泌代谢病学术大会暨糖尿病论坛论文集》期刊2012-11-02）
王欲晓,解鹏,高荣凯,杨东玲,周丽君[10]（2012）在《从人源大容量噬菌体抗体库中筛选抗生存素抗体》一文中研究指出目的从大容量天然噬菌体抗体库中筛选抗生存素(survivin)的人源单链抗体(single chainfragment variable,scFv)并进行鉴定。方法以survivin为抗原,固化在抗原管上,通过吸附—洗脱—扩增过程,从大容量天然噬菌体抗体库中筛选特异性噬菌体抗体,并转染HB2151菌,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导制备成可溶性抗体,采用酶联免疫吸附测定法对其抗原结合活性进行检测,指纹图谱分析法分析抗体基因的种类。结果经过4轮筛选,共获得21个与survivin结合的阳性克隆,其中10个特异性结合的克隆,指纹分析有8种不同的抗survivin的scFv基因,在这8种中有5种获得可溶性表达。结论利用噬菌体抗体库技术获得了特异性的人源抗生存素抗体,为其在今后肿瘤治疗中的应用奠定基础。(本文来源于《转化医学杂志》期刊2012年02期）
人源性噬菌体抗体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的通过噬菌体展示技术构建人源单链抗体库,筛选抗IL-17的特异性抗体并鉴定。方法通过采集35位类风湿关节炎患者的外周血淋巴细胞,提取总RNA,逆转录合成c DNA,PCR扩增人H链和L链可变区抗体基因。利用SOE-PCR法将VH和VL片段拼接成Sc Fv片段并插入噬菌体载体p CANTAB5E中,构建人源噬菌体单链抗体库。通过固相化的抗原对抗体库进行3轮筛选后,挑取单克隆进行phage-ELISA鉴定,筛选与抗原具有较强结合性的噬菌体克隆。结果成功构建库容为3.5×10~8的噬菌体抗体库,从中筛选到5株阳性克隆,ELISA证实其对抗原IL-17具有较强的结合性及中和活性。结论成功构建了人源噬菌体单链抗体库,从中获得具有抗IL-17的人源Sc Fv抗体片段,为进一步的研究和应用提供实验基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人源性噬菌体抗体论文参考文献
[1].刘冬兰.人源特异性抗3型、7型腺病毒Fab噬菌体抗体库的构建及筛选[D].广州医科大学.2017
[2].钮敏红,闫晓霏,吕卫东,万晓春.人噬菌体抗体库的构建及人源性IL-17单链抗体的筛选[J].中国临床研究.2016
[3].李楠.人源性阿尔茨海默病噬菌体抗体库的构建及Aβ单链抗体的筛选与初步效价研究[D].郑州大学.2016
[4].蒋效,何立东,王欲晓,丁立,吴成林.利用大型天然噬菌体抗体库筛选抗死亡受体5人源抗体[J].细胞与分子免疫学杂志.2015
[5].余艳琼.人源抗EV71病毒Fab噬菌体抗体库的构建和筛选[D].福建医科大学.2014
[6].胡小丽.人源甲状腺髓样癌噬菌体抗体库的构建及初步鉴定[D].重庆医科大学.2014
[7].胡小丽,王政杰,庞华.人源甲状腺髓样癌噬菌体抗体库的构建及初步鉴定[J].重庆医科大学学报.2013
[8].毕司英,毛晓燕,陈继军,秦海艳.人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库的构建及筛选[J].中国生物制品学杂志.2012
[9].董越华,胡占东,李常颖,畅继武,朱铁虹.人源Fab噬菌体抗体库的构建与抗精氨酸加压素抗体的筛选[C].5TH全国中西医结合内分泌代谢病学术大会暨糖尿病论坛论文集.2012
[10].王欲晓,解鹏,高荣凯,杨东玲,周丽君.从人源大容量噬菌体抗体库中筛选抗生存素抗体[J].转化医学杂志.2012
论文知识图
