一种用于调整口腔菌群的中药组合及其活性提取物的制备论文和设计-刘志勇

全文摘要

本发明涉及中药口腔护理技术领域，具体公开了一种用于调整口腔菌群的中药组合及其活性提取物的制备方法。所述的中药组合以质量份数计包括：江香薷20‑30份、黄芪20‑25份、杭菊10‑20份、金银花5‑10份。本发明选用药食两用中药材的江香薷、杭菊花、金银花，与黄芪一起配伍，作为防治口腔异味、治疗口腔溃疡或缓解牙周炎的中药组合物，并根据中医病因辩证理论，江香薷利水消肿、和中化湿、消炎；黄芪利水消肿、除毒生肌；杭菊清热解毒抗菌；金银花宣散风热、清解血毒、芳香透达又可祛邪。诸味原料通过配伍，共同发挥预防和调整口腔菌群的作用。使用本中药组合或中药复方，能有效防治因口腔细菌失调或某些致病菌导致的口腔疾病，口腔护理效果显著。

主设计要求

1.一种用于调整口腔菌群的中药组合，为中药原料的直接混合物或活性提取物，其特征在于，所述的中药组合以质量份数计包括：江香薷20-30份、黄芪20-25份、杭菊10-20份、金银花5-10份。

设计方案

1.一种用于调整口腔菌群的中药，其特征在于：由江香薷、黄芪、杭菊、金银花制成，以质量份数计，为江香薷20-30份、黄芪20-25份、杭菊10-20份、金银花5-10份；该中药制备包括以下步骤：S1、中药组合中各中药原料的粉碎；S2、按照中药组合配比，将粉碎后的各中药原料混合均匀；S3、将混合后的中药原料加水浸泡；S4、中药原料煎煮；S5、过滤得煎煮滤液；S6、煎煮滤液的浓缩；S7、灭菌分装、贮存备用。

2.根据权利要求1所述的用于调整口腔菌群的中药，其特征在于，所述的调整口腔菌群为：消除因口腔有害细菌引起的口腔异味、防治口腔溃疡或缓解牙周炎。

3.根据权利要求1所述的用于调整口腔菌群的中药，其特征在于：用于制备具有调整口腔菌群、改善口腔卫生作用的医用制剂、保健食品、日化产品。

4.根据权利要求1所述的用于调整口腔菌群的中药，其特征在于：步骤S3所述加水浸泡的时间为0.5-2 h。

5.根据权利要求1所述的用于调整口腔菌群的中药，其特征在于：步骤S4所述中药原料煎煮为2-3次，每次0.5-1h。

6.根据权利要求1所述的用于调整口腔菌群的中药，其特征在于：步骤S6所述浓缩为在真空<-0.08MPa条件下进行减压浓缩。

设计说明书

技术领域

本发明属于中药口腔护理技术领域，具体涉及一种用于调整口腔菌群的中药组合及其活性提取物的制备。

背景技术

很多人感觉自己或对方有口腔异味，使双方在沟通上产生一定的隔阂和距离，对生活和工作产生很大影响，使正常社会交往出现障碍。口腔定植的微生物在不同部位共栖、竞争和拮抗，与宿主口腔的健康和疾病关系密切，在口腔中，微生物之间、微生物与宿主口腔之间只有保持动态的生态平衡，口腔才能保持健康状态，如果口腔有外来生物或口腔微生态中固有的个别或几种微生物比例明显增高成为定植部位的优势菌，口腔微生态系平衡被打破，将会出现菌群失调，导致口腔疾病。口腔异味患者口腔菌群分布和总数与正常人群存在显著的差异，与口腔疾病有关的致病菌数量明显高于正常人群，致病的优势菌分解口腔内的物质，产生挥发性的硫化物和脂肪酸，异常口气中挥发性硫化物明显增多，出现了口腔异味。

针对口腔微生态失衡导致的口腔异味，目前的解决方法为解决菌群失调。常见的是治疗口腔疾病，消除口腔有害气体的产生，调整饮食结构，改善卫生习惯，抗生素治疗疾病等，而使用口香糖等物质，加强口腔卫生每天刷牙，使用口腔漱口液等措施也是有一定效果的。然而现在抗生素的使用受限，而且很多种类的漱口液往往功效单一，或者效果差。现有的中药成分的口腔护理产品在具有掩蔽口腔异味的同时，不具有对于口腔微生物的调整的作用，或者对口腔有害菌有一定的杀灭作用，但不能提供清新口腔的作用。

口腔溃疡是常见口腔疾患，随着生活学习的节奏变快，很多人容易经常处于紧张、精神压力大状态；或者由于不良生活习惯，口腔溃疡这种“文明病”时有发生，口腔溃疡已经和感冒一样常见。它通常长在嘴唇、舌头或口腔其它部位，会经常复发，时好时坏，不分男女老少。口腔中菌群与宿主共生，一般情况系处于平衡状态，若这个平衡的口腔菌群被破坏，包括口腔溃疡在内的口腔疾患就会出现，口腔溃疡中链球菌群、韦荣氏菌群和奈瑟氏菌群，这三种细菌含量的变化会直接影响口腔微生态平衡。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：针对现有的调整口腔菌群，从而防治口腔异味、治疗口腔溃疡或缓解牙周炎产品作用单一，效果不尽如人意的缺陷与不足，本发明提供一种用于调整口腔菌群的中药组合及其活性提取物的制备方法。本发明选用药食两用中药材的江香薷、菊花、金银花，与黄芪一起配伍，作为防治口腔异味的中药组合物，并根据中医病因辩证理论和中药配伍用药规律对中药进行组合配伍，以加强口腔护理效果，诸味原料通过君臣佐使的配伍理论，共同发挥预防和调整口腔菌群的作用，从而改善口腔状况。使用本中药组合或中药复方，能有效防治因口腔细菌失调或某些致病菌导致的口腔疾病如口腔溃疡和牙周病的发生，口腔护理效果显著。

本发明采用如下技术方案，来实现发明目的。

首先，本发明公开了一种用于调整口腔菌群的中药组合，为中药原料的直接混合物或活性提取物。

该中药组合以质量份数计包括：江香薷20-30份、黄芪20-25份、杭菊10-20份、金银花5-10份。

香薷为唇形科植物石香薷 MoslachinensisMax-imak<\/i>或江香薷M.chinensis-<\/i>jiangxiangru．<\/i>的干燥地上部分。始载于《名医别录》，列为中品，其味辛微温，具有发汗解表、利水消肿、和中化湿等功效。江香薷作为香薷的道地药材，具有很大的临床药用价值，现代研究表明，江香薷中含有多种化学成分，具有解热和抗炎等药理作用。江香薷是为本中药组合物的重要组分，江香薷中含有芳香物质，该芳香物质不仅对口内细菌、厌氧菌、病毒及产酸酶有直接的杀灭作用，而且能抑制细菌、病毒、厌氧菌和产酸酶的活性，符合当今提出的调牙菌斑微生态平衡理论（周学东,胡涛,李继遥.牙菌斑生态防治新概念[J].国外医学.口腔医学分册,1997(06):323-326;胡涛.牙菌斑微生态学及其在口腔疾病中的意义[J].国外医学.口腔医学分册,1996(02):104-105.），并具有很好的口腔卫生护理作用。

黄芪，又名王孙、百药棉、箭芪，为豆科植物黄芪或内蒙黄芪的干燥根。性味甘、微温，有补中益气、止汗、利水消肿、除毒生肌的作用。黄芪在中医临床上应用十分广泛。

杭菊，辛、甘、苦，微寒，疏散风热、平肝明目、清热解毒，对大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、变形菌以及绿脓杆菌和霍乱弧菌等细菌具有完全的抑制作用，对人体的结核杆菌也有一些抑制效果。

金银花，性甘寒气芳香，甘寒清热而不伤胃，芳香透达又可祛邪。金银花既能宣散风热，还善清解血毒，用于各种热性病，如身热、发疹、发斑、热毒疮痈、咽喉肿痛等症，均效果显著。

本发明选用药食两用中药材的江香薷、杭菊花、金银花，与黄芪一起配伍，作为调整口腔菌群、防治口腔异味的中药组合物，其中江香薷利水消肿、和中化湿、消炎，是为君药；黄芪利水消肿、除毒生肌，是辅助君药江香薷加强治疗主病和主证的药物，并针对兼病或兼证起治疗作用的药物，比如它可以改善因为炎症导致的牙槽骨的过度吸收的问题；杭菊清热解毒抗菌，是协助君药江香薷、臣药黄芪加强治疗作用和直接治疗次要兼证的作用；金银花宣散风热、清解血毒、芳香透达又可祛邪，是本方中引经药，引方中诸药直达病所的药物，并能调和诸药，使其合力祛邪。诸味原料通过配伍，共同发挥预防和调整口腔菌群的作用，从而改善口腔状况。使用本中药组合或中药复方，能有效防治因口腔细菌失调或某些致病菌导致的口腔疾病如口腔溃疡和牙周病的发生，口腔护理效果显著。

进一步地，所述的调整口腔菌群为：消除因口腔有害细菌引起的口腔异味、防治口腔溃疡或缓解牙周炎。

进一步地，所述中药组合的直接混合物，用于制备调整口腔菌群、防治口腔异味、防治口腔溃疡或缓解牙周炎的医用制剂。

进一步地，所述中药组合的活性提取物，用于制备调整口腔菌群、改善口腔卫生作用的医用制剂、医用用品、食疗产品、日化产品。

更进一步地，所述的医用制剂有散剂、粉剂、粒剂、胶囊等。

更进一步地，所述的医用用品有漱口液、咀嚼片、含片、泡腾片、跳跳糖等。

更进一步地，所述的食疗产品有饮料、饼干、酸奶、果冻等。

更进一步地，所述的日化产品有药物牙膏等。

其次，本发明还公开了一种用于调整口腔菌群的中药组合活性提取物的制备方法。

该制备方法包括以下步骤：S1、中药组合中各中药原料的粉碎；S2、按照中药组合配比，将粉碎后的各中药原料混合均匀；S3、将混合后的中药原料加水浸泡；S4、中药原料煎煮；S5、过滤得煎煮滤液；S6、煎煮滤液的浓缩；S7、灭菌分装、贮存备用。

进一步地，步骤S3所述加水浸泡的时间为0.5-2 h；步骤S4所述中药原料煎煮为2-3次，每次0.5-1h；步骤S6所述浓缩为在真空<-0.08MPa条件下进行减压浓缩。

有益效果：

（1）本发明根据中医病因辩证理论，江香薷利水消肿、和中化湿、消炎；黄芪利水消肿、除毒生肌；杭菊清热解毒抗菌；金银花宣散风热、清解血毒，芳香透达又可祛邪。江香薷是为本中药组合物的重要组分，江香薷中含有芳香物质，该芳香物质不仅对口内细菌 、厌氧菌和病毒及产酸酶有直接的杀灭作用 ,而且能抑制细菌 、病毒 、厌氧菌和产酸酶的活性 ,符合当今提出的调牙菌斑微生态平衡理论，并具有很好的口腔卫生护理作用。江香薷与黄芪，金银花和杭菊配伍，能更好发挥清热解毒，抗炎效果，抑制牙菌斑改善牙周炎，从而减缓牙周炎导致的牙槽骨过度过快吸收。诸味原料通过配伍，共同发挥预防和调整口腔菌群的作用，从而改善口腔状况。

（2）本发明通过选用安全性很高的药食两用中药材，并经过大量的安全性及药效性试验进行对比分析，不断优化筛选产品配方及配方比例；产品已进行多项检测分析和实验，调整口腔菌群、抑制细菌的效果明显，安全性高，无明显副作用，市场推广价值极高。

附图说明

图1为中药组合活性提取物A对牙周炎大鼠牙槽骨影响的显微照片。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明并不限于以下实施例。所述方法如无特别说明均为常规方法。所述原材料如无特别说明均能从公开商业途径获得。

实施例1：中药组合活性提取物A的制备

按照下述质量配比：江香薷25份、黄芪22.5份、杭菊15份、金银花7.5份，首先将各中药原料（干品）进行粉碎；其次将粉碎后的各中药原料混合均匀并加水浸泡1 h；对浸泡后的中药原料加水煎煮3次，三次煎煮时间分别为1h、0.5h、0.5h，过滤得煎煮滤液；然后合并煎煮滤液，并在真空<-0.08MPa条件下进行减压浓缩，至药液中含生药 10 g\/ml时停止浓缩；最后灭菌分装、贮存备用，得到中药组合活性提取物A。

实施例2：中药组合活性提取物B的制备

按照下述质量配比：江香薷30份、黄芪20份、杭菊20份、金银花5份，首先将各中药原料（干品）进行粉碎；其次将粉碎后的各中药原料混合均匀并加水浸泡2h；对浸泡后的中药原料加水煎煮2次，二次煎煮时间分别为1h、1h，过滤得煎煮滤液；然后合并煎煮滤液，并在真空<-0.08MPa条件下进行减压浓缩，至药液中含生药 10 g\/ml时停止浓缩；最后灭菌分装、贮存备用，得到中药组合活性提取物B。

实施例3：中药组合活性提取物C的制备

按照下述质量配比：江香薷20份、黄芪25份、杭菊10份、金银花10份，首先将各中药原料（干品）进行粉碎；其次将粉碎后的各中药原料混合均匀并加水浸泡0.5 h；对浸泡后的中药原料加水煎煮2次，二次煎煮时间分别为1h、0.5h，过滤得煎煮滤液；然后合并煎煮滤液，并在真空<-0.08MPa条件下进行减压浓缩，至药液中含生药 10 g\/ml时停止浓缩；最后灭菌分装、贮存备用，得到中药组合活性提取物C。

实施例4：中药组合活性提取物A对 9种标准菌株的抑菌实验

将实施例1所得到的中药组合活性提取物A，用氯化钠注射液稀释成所需要的浓度，采用试管对倍稀释法, 考察不同浓度组合物的提取物对 9种标准菌株（金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、具核梭杆菌、变形链球菌、黏性放线菌、中间型普氏菌）的抑菌情况, 并测出其最低抑菌浓度。同时选用甲硝唑注射液和口腔炎喷雾剂（黑龙江天龙药业有限公司）做对照。结果如表1所示：

表1：对需氧菌的抑菌效果比较

从表1实验结果可知：中药组合活性提取物A对需氧和厌氧菌都有较显著的抑菌作用。其中对大肠埃希氏菌、白色念珠菌、肺炎克雷伯氏菌的抑菌效果要明显好于口腔炎喷雾剂；对变形链球菌、中间型普氏菌的抑菌效果要明显好于甲硝唑注射液；而对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的抑菌效果与口腔炎喷雾剂基本一致；只有对具核梭杆菌和黏性放线菌的抑菌效果稍差于甲硝唑注射液。

实施例5：中药组合活性提取物A对实验性口腔溃疡的愈合实验

将实施例1所得到的中药组合活性提取物A，用氯化钠注射液稀释成所需要的浓度，对实验性口腔溃疡愈合进行实验。其实验设计、过程实施与实验结果具体为：

将 40 只大鼠随机分为模型对照组、白云山汤阴东泰药业有限责任公司冰硼含片组（阳性对照组）、本组合大剂量组、本组合小剂量组4 组，每组 10 只。各组大鼠分别用乙醚麻醉，仰卧固定于鼠板。取一根直径为 4 mm 的玻璃管;将一个小棉球置于其一端，使之与管口平齐;将玻璃管的棉球端浸在质量分数为 900 g\/L 的 苯酚溶液中，使药液浸透棉球;将其置于大鼠一侧颊黏膜上灼烧约60 s。移去玻璃管即可见该区域有直径 4～6 mm 的白色损害;次日肉眼可见大鼠口唇边潮湿，流口水，颊黏膜处红肿，即口腔溃疡造模成功。

本组合大剂量组:给本组合1250μL\/100g 体质量(相当于临床人日用量的 15倍)，平均分 5 次滴入大鼠颊黏膜溃疡处，间隔 2 h。

本组合小剂量组:给本组合 415μL\/100g 体质量(相当于临床人日用量的5 倍)，平均分 2 次滴入大鼠颊黏膜溃疡处，间隔4 h。

冰硼含片组：给冰硼含片粉末1.5 mg\/g，平均分 5 次置于大鼠颊黏膜溃疡处，间隔2 h。

模型对照组不给药。

对于上述的大剂量组、小剂量组、冰硼含片组，每次用药后禁食、禁水 30 min，连续给药 6 d。每日给药前观察大鼠口腔溃疡愈合情况，记录给药 6 d 后口腔溃疡面直径的大小(以 mm 表示)及大鼠口腔溃疡愈合的时间和数量。愈合标准:溃疡直径 ＜1mm 为愈合，溃疡直径≥1 mm 为未愈合。结果见表 2。与模型对照组对比，连续给药 6 d，本组合大、小剂量组大鼠口腔溃疡面直径减小，口腔溃疡愈合大鼠数量增加，差别均有统计学意义(P＜0.01或 P ＜0.05)，结果如表2所示：

表2 各组大鼠口腔溃疡面直径对比 x ± s

^{※<\/sup>与模型组比较差异具有显著性（P＜0.05），﹟<\/sup>与阳性对照组比较差异具有显著性（P＜0.05）}

从表2实验结果可知：实验性大鼠口腔溃疡模型制作成功以后，应用药物进行治疗后，中药组合活性提取物A和阳性药组都减小了溃疡面积，差异显著（P＜0.05）。到第6天，中药组合组高剂量达到极显著性差异（P＜0.01），与阳性药差异显著（P＜0.05），说明本中药组合能明显促进大鼠实验性口腔溃疡的愈合。

实施例6：中药组合活性提取物A的体外抑菌试验

将实施例1所得到的中药组合活性提取物A，用氯化钠注射液稀释成所需要的浓度，采用平皿打孔灌药法，对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和白色念珠菌的体外抑菌进行试验。其实验设计、过程实施与实验结果具体为：

取灭菌试管 7 支，编号后排列于试管架上，按照无菌操作法，第 1 管加入 1000g\/L中药组合物A 3 mL，第 2 ～ 4 管各加无菌生理盐水3 mL，然后吸1000 g\/L中药组合物A 3 mL 加到第 2 管混匀后，吸出 3 mL 加到第 3 管混匀，第 3 管吸出 3 mL 加到第 4管，混匀。第 5 管加 2 mg\/mL 的诺氟沙星片水溶液，第 6 管加 1 mg\/mL 的酮康唑片水溶液，第7 管加无菌生理盐水。取标号灭菌平皿加热熔化后冷却到 40 ℃的牛肉膏汤琼脂培养基(白色念珠菌用沙氏培养基)20 mL 摇匀，待凝固后，用直径 6 mm的无菌打孔器在培养基上均匀打孔(3～4孔\/皿)，各孔分别加入以上配好的不同质量分数的药液和生理盐水(0．2 mL\/孔)，再将培养好的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌分别均匀接种各洞口四周，37 ℃孵育 24 h，观察并测出抑菌圈直径。重复上述操作两遍，即每管做3个平行，最后抑菌圈直径取三者的平均值，结果如表3所示：

表3 中药组合活性提取物A的体外抑菌直径结果（mm）

从表3实验结果可知：中药组合活性提取物A对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和白色念珠菌均有较明显的体外抑菌作用。

实施例7：中药组合活性提取物A对大鼠口腔黏膜的刺激性实验

将实施例1所得到的中药组合活性提取物A，用氯化钠注射液稀释成所需要的浓度，对大鼠口腔黏膜进行刺激性实验，观察多次给药对大鼠口腔黏膜的刺激性反应。其实验设计、过程实施与实验结果具体为：

将 20 只大鼠随机分为本中药组合组和正常对照组 2 组，每组 10 只。本中药组合组给本中药组合 2500μL\/100g 体质量(相当于临床人日用量的30倍)，在 4 h 内平均分5 次滴入大鼠两侧颊黏膜处。正常对照组不做任何处理。给药24 h后，观察记录给药部位充血和水肿情况，并进行评分;观察动物有无全身不良反应。每日给药并观察，共7d;停药后继续观察7d。黏膜充血、水肿评分标准见表4、表5所示，结果见表6；

表4 黏膜刺激性反应及评分标准

表 5 黏膜刺激强度评价标准

表6 各组多次给药后口腔黏膜刺激反应平均分值 n =10

从表6实验结果可知：中药组合活性提取物A对大鼠口腔黏膜无刺激性，是一个安全的中药组合。

实施例8：中药组合活性提取物A对口腔溃疡患者疗效及微生物菌群的影响

1.研究对象和筛选原则

以2018年 10月-2019 年 4 月期间收治的50例口腔溃疡患者为研究对象，随机分为观察组和对照组，每组 25 例。其中对照组男 15 例，女 10 例；年龄 27-58岁，平均年龄（41.8±15.4）岁；病程 20-47 天，平均病程（31.2±16.7）天。本中药组合观察组中男 13例，女12 例；年龄25-54 岁，平均年龄（42.9±13.2）岁；病程 23-50 天，平均病程（32.1±18.2）天。两组患者的一般资料无显著差异（P>0.05），具有可比性。（1）所有患者均符合《口腔粘膜病学》口腔溃疡的诊断标准者；（2）中医诊断符合卫生部《中药新药临床研究指导原则》中的口疮者；（3）近6个月未使用中药者；（4）近 6 个月未使用激素类药物者； （5）获得患者及其家属知情同意。

2 治疗方法

2.1 对照组

采用左旋咪唑搽剂（福州辰星药业有限公司，国药准字 H20003344）隔天涂抹一次，500mg\/次，连用 2周；维生素C片（东北制药集团沈阳第一制药有限公司，国药准字H21022862）口服，0.2g\/次，每日 3 次。维生素 B 12 （上海信谊九福药业有限公司，国药准字H31022370）口服，10mg\/次，每日 3 次。

2.2 观察组

采用中药组合方进行治疗，浸膏焙干，研成粉末放入带有喷头的塑料小瓶中，轻喷溃疡创面，3 次\/d，喷完药物后至少 1h 内不要喝水或进食。

两组均治疗 14d 后评定疗效。

3 治疗结果

3.1 疗效判定标准

痊愈：所有临床症状全部消失；显效：溃疡创面愈合，疼痛感消失；有效：溃疡创面缩小≥1\/2，疼痛感不明显；无效：症状同前没有好转或溃疡面积缩小<1\/3，患者仍无法顺利进食。

3.2 观察指标

治疗前后分别评价两组患者的疗效，统计溃疡持续时间。治疗前后利用 PCR 荧光术测定两组患者口腔链球菌、奈瑟氏菌及韦荣氏菌的数量。

3.3 结果

3.3.1 两组患者疗效比较：见表7。

表 7 两组疗效比较（例）

*与对照组比较，P <0.05。

3.3.2 两组患者溃疡持续时间比较：见表8。

表 8 两组溃疡持续时间比较（d，x ± s）

*与对照组比较，P <0.05。

3.3.3 两组口腔微生物菌群比较：见表 9。

表 9 两组口腔微生物菌群比较（个，x ± s）

*与本组治疗前比较，P<0.05；#与对照组治疗后比较，P<0.05。

从人群的实验观察，可见中药组合活性提取物A对口腔溃疡有比较好的效果，表现在对溃疡的总有效比对照明显提高，且缩短溃疡的愈合时间，提升口腔溃疡相关的有益菌改善菌群失衡的状况。

实施例9：中药组合活性提取物A对牙周炎大鼠的牙槽骨的影响

选用48只牙体牙列完整，无龋坏及牙周病的5周龄SD大鼠，雌雄各半，体重200g±20g 。随机分成正常对照组，模型组，口泰组（阳性治疗组，所用药物为复方氯己定含漱液，江苏晨牌邦德药业有限公司，国药准字H20058018），中药组合物A组（按剂量分成低中高组）：组合物A低剂量组0.5mg\/kg，组合物A中剂量组1.5mg\/kg，组合物A高剂量组4.5mg\/kg，每组8只大鼠。以罗礼君文献方法加以改进（罗礼君,束蓉,李超伦,谢玉峰,乔伟伟.牙周炎动物模型的建立[J].口腔材料器械杂志,2005(03):120-122.）。以一把大镊子开口，以眼科用弯剪对两侧牙齿周围牙龈进行划割剥离，然后喂以用10%的白砂糖水、并喂白砂糖水浸泡的软饲料，造模结束改用正常饮食，并给予治疗，每只动物按0.1ml\/100g每天两次口腔内滴注各受试药物，用药后禁食4h后再喂食和水。试验结束取动物牙槽骨做病理切片观察牙槽骨状况（见附图1）。

从附图1可知：组合物A明显抑制了实验性大鼠牙周炎的牙槽骨的吸收。

同样地，将实施例2、3所得到的中药组合活性提取物B、C，依照实施例4-9所述的实验方法与实验步骤进行实验，实验结果表明：实验数据与实施例4-9相近、实验结论与实施例4-9一致。

以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都涵盖在本发明范围内。

设计图