导读:本文包含了滋阴泻火中药合剂论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:合剂,滋阴,中药,性早熟,疗法,引物,中药学。
滋阴泻火中药合剂论文文献综述
王世冉[1](2013)在《雌性性早熟大鼠下丘脑NKB/NK3R的表达及滋阴泻火中药合剂对其表达的影响》一文中研究指出目的: 以达那唑诱导的雌性性早熟大鼠模型为研究对象,观察性早熟大鼠青春期发育过程中下丘脑NKB及其受体NK3R的表达规律,以探讨NKB/NK3R通路在性早熟大鼠青春期发育中的作用;给予性早熟模型大鼠滋阴泻火中药合剂进行治疗,观察滋阴泻火中药合剂对性早熟大鼠下丘脑NKB和NK3R表达的影响,以进一步揭示滋阴泻火中药合剂治疗性早熟的作用机制。方法: (1)将SD大鼠随机分为正常组(N)、模型组(M)、生理盐水组(MS)和中药组(TCM),M、MS、TCM组大鼠在出生后第五天给予皮下注射达那唑3001μg(溶于250μ1乙醇乙二醇等体积溶液),N组不做任何处理;从出生后第15天开始,TCM组给予滋阴泻火中药合剂(生药量3.3g/ml,1.29ml/100g体重)灌胃,MS组给予等量生理盐水,至取材时为止。(2)大鼠从出生后20天开始,每天观察阴门开启情况,阴门开启后每天做阴道涂片观察大鼠动情周期变化,至取材为止。(3)取材分叁个时间点,青春期启动前(21天断奶时),青春期启动时(阴门开启时),青春期启动后(建立两个规律性周期,即第二个动情间期),以模型组为标准同时选取相应数量的其他叁组一并取材。用4%多聚甲醛心脏灌流取脑或直接断头法,留取大鼠外周血、下丘脑、子宫、卵巢等标本,子宫、卵巢称重计算器官系数。(4)放免法检测外周血血清中E2、FSH、LH、T的水平(5)HE染色观察大鼠子宫、卵巢发育情况(6)应用免疫组化ABC法及免疫荧光法观察大鼠下丘脑NKB及NK3R的表达情况(7)采用Real-time PCR法检测大鼠下丘脑NKB及NK3R mRNA的表达变化。(8)采用western-blot观察下丘脑NK3R的蛋白表达情况。结果:(1)模型组大鼠阴门开启及建立两个规律性周期的时间明显早于正常组,给予滋阴泻火中药后可明显延迟其阴门开启及建立两个规律性周期的时间。(2)青春期启动时模型组动物血清中E2、FSH和T的水平升高,与正常组相比(P<0.05);而中药组与模型组相比,血清中E2, FSH水平明显降低(P<0.05)。(3)青春期启动前各组大鼠子宫和卵巢的器官系数无明显差异;青春期启动时模型组大鼠子宫和卵巢的器官系数明显高于正常组(P<0.05),中药组与模型组相比器官系数显着降低(P<0.05);青春期启动后,也表现相似趋势,表现为中药组与模型组相比子宫和卵巢器官系数显着降低(P<0.05)。HE染色发现,青春期启动时,模型组大鼠子宫壁厚度以及成熟卵泡的数量明显高于正常组,而给予滋阴泻火中药合剂后明显降低了子宫壁的厚度及成熟卵泡的数量。(4)青春期启动前,各组大鼠下丘脑ARC和MPO的NKB及NK3R表达无明显差异;青春其启动时,各组大鼠下丘脑ARC和MP0的NKB、NK3R表达与青春期前相比都有所上升;模型组明显高于正常组(P<0.05);与模型组相比,中药组下丘脑ARC和MPO的NKB、NK3R表达明显下调(P<0.05)。青春期启动后,在ARC,模型组NKB与NK3R的表达高于正常组(P<0.05);与模型组相比,中药组大鼠下丘脑ARC的NKB.NK3R表达明显下调(P<0.05);在MPO,模型组NKB的表达要低于正常组(P<0.05),与模型组相比,中药组上调了NKB的表达;MP0区NK3R的表达变化与青春期启动时基本一致,模型组高于正常组(P<0.05),与模型组相比,中药组表达下调(P<0.05)。(5)青春期启动时,与正常组相比,模型组大鼠下丘脑NKB及NK3R mRNA的表达显着上升(P<0.01),给予滋阴泻火中药合剂后,中药组大鼠下丘脑NI(B(P<0.01)及NK3R(P<0.05) mRNA的表达明显降低。(6)青春期启动时,与正常组相比,模型组大鼠下丘脑NK3R蛋白的表达明显升高(P<0.05),与模型组相比,中药组大鼠下丘脑NK3R蛋白的表达明显下调(P<0.05)。结论:滋阴泻火中药合剂对性早熟有明显的治疗作用:滋阴泻火中药合剂可显着改善雌性性早熟大鼠的症状。雌性性早熟大鼠模型青春期启动时,其下丘脑NKB及其受体NK3R的表达明显高于正常组,提示NKB/NK3R通路可能参与了青春期启动过程。给予大鼠滋阴泻火中药合剂后,下丘脑NKB和NK3R mRNA和蛋白的表达明显下调,从而影响了下丘脑GnRH的分泌,进而抑制HPGA功能,延缓青春期启动,这可能是滋阴泻火中药发挥治疗性早熟作用的又一重要途径。(本文来源于《复旦大学》期刊2013-05-01)
李婧[2](2012)在《雌性性早熟大鼠下丘脑GABA_A受体α亚基的表达及滋阴泻火中药合剂对其表达的影响》一文中研究指出目的:观察GABAA受体α亚基在性早熟模型大鼠下丘脑中的表达规律,并初步探讨GABAA受体α亚基在性早熟发病机制的作用;通过观察滋阴泻火中药合剂对性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α亚基表达的影响,探讨滋阴泻火中药合剂的作用机制,为该药治疗性早熟提供新的科学实验依据。方法:实验共分为两部分,我们首先观察了达那唑诱导的性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α1-3亚基mRNA的表达。将雌性SD大鼠随机分为正常组,对照组和模型组。模型组大鼠在出生后第5天给与皮下注射达那唑300μg(溶于250μ1乙醇乙二醇等体积溶液);对照组则注射等体积的乙醇乙二醇混合液;正常组不作任何处理。在前一部分的基础上,我们观察了滋阴泻火中药合剂对性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α亚基表达的影响:5日龄雌性SD大鼠分为正常组,模型组,生理盐水组,滋阴泻火中药合剂组(以下简称“中药组”)。后叁组在出生后第5天皮下注射达那唑进行造模,正常组不作任何处理;从第15天开始中药组给予滋阴泻火中药合剂灌胃,生理盐水组给予等量生理盐水灌胃,模型组不作其他处理。滋阴泻火中药合剂每毫升含3.3克生药,每天灌胃量为1.29ml/100g体重,至取材时为止。各组实验动物均于生后22天开始观察阴门开启情况;记录每只动物阴门开启的时间。取材时断头处死,迅速取下丘脑-80℃保存,取子宫和卵巢称重,计算子宫和卵巢系数;取血检测雌激素、促性腺激素水平,应用RT-PCR和realtimePCR以及Western Blot观察下丘脑GnRH、GABAA受体α亚基、雌激素α受体以及谷氨酸脱羧酶mRNA的表达变化。结果:实验一1.模型组大鼠阴门开启时间显着早于正常组和对照组(P<0.01),在出生后25天模型组大鼠子宫和卵巢的发育比正常组和对照组显着提前(P<0.05);但在生后32天和44天,叁组之间子宫和卵巢的器官系数无显着差异。2.模型组大鼠下丘脑GABAA受体α1和α3亚基mRNA表达水平显着下调,与正常组和对照组相比,有显着差异(P<0.05),而叁组动物下丘脑GABAA受体α2亚基mnRNA的表达则无显着差异(P>0.05)。实验二1.生后第22天,模型组大鼠子宫和卵巢的器官系数显着高于正常组(P<0.05),而中药组大鼠子宫和卵巢的器官系数显着低于模型组(P<0.05);模型组和生理盐水组大鼠子宫和卵巢的器官系数无显着差异(P>0.05)。2.模型组大鼠血清E2, LH和FSH水平明显高于正常组和对照组(P<0.01),中药组叁种激素水平比模型组和生理盐水组有下降,FSH水平有差异(P<0.05),E2和LH水平差异尤为明显(P<0.01)。3.模型组性早熟大鼠下丘脑GnRH mRNA的表达显着上调,与正常组相比有显着差异(P<0.01);中药组大鼠下丘脑GnRH mRNA表达水平显着下降,与模型组相比有显着差异(P<0.01)。4.模型组大鼠下丘脑GABAA受体α1和α3mRNA表达水平显着下调,与正常组相比有显着差异(P<0.01);中药组大鼠下丘脑GABAA受体α1l和α3mRNA表达水平显着升高,与模型组相比,有显着差异(P<0.01)。而其他四个亚基mRNA的表达在各组之间没有差异(P>0.05)。模型组大鼠下丘脑GABAA受体α1亚基蛋白表达下降,与正常组相比有显着差异(P<0.01);中药组大鼠下丘脑GABAA受体α1蛋白表达水平显着升高,与模型组相比有显着差异(P<0.01)。与此相似,模型组大鼠下丘脑GABAA受体α3亚基蛋白表达下降,与正常组相比有显着差异(P<0.01);中药组大鼠下丘脑GABAA受体03蛋白表达水平显着升高,与模型组相比有显着差异(P<0.01)。5.模型组性早熟大鼠下丘脑ERα mRNA水平显着升高,与正常组相比有显着差异(P<0.05);中药组ERα mRNA表达水平显着降低,与模型组相比,有显着差异(P<0.05)。6.下丘脑GAD65和GAD67mRNA的表达在各组之间无统计学差异(P>0.05)。结论:滋阴泻火中药合剂可以显着缓解雌性性早熟大鼠的性早熟症状;性早熟大鼠下丘脑GnRH mRNA表达显着升高,滋阴泻火中药合剂可以显着下调GnRH mRNA的表达;性早熟大鼠下丘脑ERα受体mRNA表达显着升高,滋阴泻火中药合剂可以显着下调ERα受体mRNA的表达;性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α1和α3mRNA和蛋白表达水平显着降低,滋阴泻火中药合剂可以上调GABAA受体α1和α3亚基mRNA和蛋白的表达,进而抑制GnRH的合成释放,延缓性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴的启动。(本文来源于《复旦大学》期刊2012-05-01)
孙妍[3](2007)在《雌性性早熟大鼠脑内Kiss-1/GPR54的表达及滋阴泻火中药合剂对其表达的影响》一文中研究指出目的:本文以达那唑诱导的雌性性早熟大鼠为模型,通过观察脑内调控青春期发育的关键分子——Kiss-1基因衍生肽kisspeptin及其受体GPR54(G-proteincoupled receptor 54)在青春期发育进程中的表达规律,探讨kisspeptin/GPR54在性早熟发病中的作用;观察滋阴泻火中药合剂对kisspeptin/GPR54表达的影响以及kisspeptin/GPR54在滋阴泻火中药合剂治疗性早熟中的作用,进一步认识滋阴泻火中药合剂的作用机制。方法:(1)出生后3天的SD雌性大鼠,随母鼠共同饲养,随机分为正常组(Normal)、载体组(Vehicle)和模型组(Model)。模型组大鼠在出生后5日龄给予皮下注射300μg达那唑。采用免疫组织化学、Westernblot、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别观察青春期启动前(出生后20日龄)、青春期启动(阴门开启为标志)、青春期启动后(建立2个规则的性周期)大鼠脑内Kiss-1/GPR54 mRNA及蛋白的表达规律。(2)采用免疫荧光双标技术观察GPR54和GnRH的共存情况,并运用侧脑室微量注射GPR54抗体中和法,观察性早熟模型大鼠在青春期启动前给予不同剂量GPR54抗体(1:50、1:100、1:200)后,阴门开启时间的变化及免疫组织化学法检测脑内kisspeptin及内侧隔核(rostral medial septum,MS)、Broca斜角带核(Broca diagonal band nucleus,DBB)和内侧视前区(medial preoptic nucleus,MPOA)促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)的表达变化,进一步探讨kisspeptin/GPR54在大鼠性早熟发病过程中的作用。(3)采用免疫组织化学、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,观察喂饲滋阴泻火中药合剂后,性早熟模型大鼠脑内Kiss-1、GPR54、GnRH mRNA及蛋白的表达变化,探讨滋阴泻火中药合剂对Kiss-1/GPR54表达的影响及kisspeptin/GPR54在滋阴泻火中药合剂治疗性早熟中的作用;并观察预先喂饲性早熟模型大鼠(出生后14日龄)滋阴泻火中药合剂(3ml/次、1次/日、喂药7天)后,在青春期启动前(出生后20日龄)运用药理学方法侧脑室1次性微量注射kisspeptin多肽2nmol、4nmol的方法,观察大鼠阴门开启时间的变化及脑内GPR54和GnRH蛋白的表达变化,进一步探讨滋阴泻火中药合剂治疗性早熟的机制。结果:(1)5日龄雌性大鼠皮下注射达那唑后,阴门开启和建立两个规则的性周期时间明显提前,卵巢和子宫的脏器系数较正常组大鼠明显增加,青春期启动时下丘脑GnRH mRNA和蛋白表达水平较正常组显着升高。性早熟模型大鼠青春期启动前未见下丘脑特异性kisspeptin/GPR54阳性细胞表达,青春期启动时室周核(periventricular nucleus,PeN)、弓状核(arcuate nucleus,ARC)、视前区(preoptic area,POA)kisspeptin/GPR54免疫阳性细胞呈特异性表达。ARC、PeN的kisspeptin免疫阳性细胞数在青春期启动后表达减少,POA的kisspeptin细胞数在青春期启动后表达增加;ARC、PeN的GPR54免疫阳性细胞数在青春期启动后表达增加,POA的GPR54免疫阳性细胞数在青春期启动后表达减少。性早熟模型大鼠在青春期发育进程中,均观察到下丘脑组织Kiss-1/GPR54 mRNA的表达;青春期启动时Kiss-1/GPR54 mRNA表达水平达峰值并明显高于正常大鼠,青春期启动后其表达水平有所下降。(2)免疫荧光双标技术显示GPR54和GnRH在性早熟大鼠POA存在共存现象。青春期启动前侧脑室给予1:50、1:100 GPR54抗体的性早熟大鼠,阴门开启时间较模型组明显延迟,kisspeptin免疫阳性细胞表达未见明显变化,MS、DBB和MPOA的GnRH免疫阳性细胞数却明显增加。(3)免疫组织化学及RT-PCR技术观察到滋阴泻火中药合剂可下调性早熟模型大鼠下丘脑Kiss-1、GPR54及GnRH mRNA的表达,抑制ARC、PeN和POA的kisspeptin和GPR54蛋白的释放,诱导MS、DBB和MPOA的GnRH免疫阳性细胞数增加。(4)性早熟模型大鼠喂饲滋阴泻火中药合剂后在20日龄时侧脑室微量注射kisspeptin多肽2nmol、4nmol,22日龄时均出现阴门开启。结论:(1)性早熟大鼠青春期启动时ARC、PeN和POA的kisspeptin/GPR54的表达异常,下丘脑Kiss-1/GPR54 mRNA的表达水平增高,可能参与促进大鼠青春期提前启动,导致大鼠性早熟的发生。(2)侧脑室注射GPR54抗体可能抑制性早熟大鼠GnRH的表达,使性早熟大鼠的性发育延迟,kisspeptin可能直接通过其受体GPR54介导性早熟大鼠青春期的提前启动。(3)滋阴泻火中药合剂可通过下调下丘脑Kiss-1/GPR54 mRNA及蛋白的表达,抑制GnRH的释放,延缓性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamic-pituitary-gonad axis,HPGA)的启动。(本文来源于《复旦大学》期刊2007-04-12)
及金宝,李嫔[4](2006)在《滋阴泻火中药合剂对青春期大鼠垂体生长激素和长骨干骺端胰岛素样生长因子1基因表达的调节》一文中研究指出目的:观察滋阴泻火中药合剂对青春期大鼠垂体生长激素、长骨干骺端胰岛素样生长因子1基因表达的影响,探讨中药对垂体、长骨干骺端促生长机能的调节作用。方法:实验于2002-09/2003-03在上海瑞金医院完成。将青春期SD雌性大白鼠共22只分为对照组和实验组,每组11只。对照组:喂饲生理盐水1个月,5mL/次,1次/d;实验组:喂饲滋阴泻火中药合剂(由生地12g,炙龟板12g,黄柏9g,知母9g等组成;均由上海复旦大学附属儿科医院中药制剂室煎制成浓缩合剂,每毫升约含生药3g。)1个月,5mL/次,1次/d。疗程结束后,动物处死,取出垂体及左后肢骨干骺端,提取总mRNA。采用实时荧光RT-PCR定量检测技术,检测垂体生长激素mRNA,长骨干骺端胰岛素样生长因子1mRNA表达水平。实时荧光RT-PCR定量检测方法:①垂体、长骨干骺端总RNA提取采用一步法。并逆转录合成cDNA,PCR扩增产物经15g/L琼脂糖电泳后,纯化,制备标准曲线,并扩增。②垂体生长激素扩增条件:先94℃2min,然后94℃变性10s,58℃退火30s,72℃延长20s,3个步骤作为1个循环,共扩增40个循环。长骨干骺端胰岛素样生长因子1扩增条件:先94℃3min,然后94℃变性10s,60℃退火20s,72℃延长20s,3个步骤作为1个循环,共扩增40个循环。经过t检验处理,比较两组间垂体生长激素及长骨干骺端胰岛素样生长因子1基因表达水平的变化,观察滋阴泻火中药合剂对上述指标基因表达的影响。结果:实验动物22只,生理盐水和中药灌胃时误灌入气管窒息而死,各1只,进入结果分析20只。①实验组生长激素cDNA的复制数明显低于对照组犤(7.08±1.20)×107,(19.38±6.69)×107;t=5.728,P<0.05犦,且扩增片段为1条长度为533bp的条带,未见其他非特异性条带。②实验组干骺端胰岛素样生长因子1cDNA复制数明显低于对照组犤(2.28±0.65×102),(21.41±5.85×102);t=10.268,P<0.05犦;电泳图显示干骺端胰岛素样生长因子1cDNA扩增片段为一条长度为202bp的条带,未见其他非特异性条带。结论:滋阴泻火中药合剂可在转录水平调节腺垂体生长激素及长骨干骺端软骨细胞胰岛素样生长因子1的基因表达,从而调整生长激素-胰岛素样生长因子1轴的功能活动。(本文来源于《中国临床康复》期刊2006年07期)
田占庄[5](2003)在《性早熟差异表达基因的克隆和鉴定及滋阴泻火中药合剂对差异基因的影响》一文中研究指出性早熟差异表达基因的克隆和鉴定及滋阴泻火中药合剂对差异基因的影响 性早熟是一种生长发育异常性疾病,男女儿童中本病的发病率约为0.6%。但真性性早熟的病因仍不清楚。本实验应用分子生物学、免疫组织化学等实验方法,在达那唑诱导的性早熟大鼠模型上,克隆和鉴定性早熟大鼠下丘脑差异表达的基因,并初步观察了模型鼠和患儿外周血单个核细胞中差异基因的表达,以探讨性早熟的发病机制和中药治疗性早熟的机理。实验结果如下: 1.5日龄雌性大鼠皮下注射达那唑后,大鼠阴门开启和出现第一个性周期的时间分别为25.97±2.24天和32.43±0.75天,比正常组的34.00±0.98天和41.26±2.35天及载体组的34.33±1.09天和40.00±0.19天均显着提前(P<0.01):模型组大鼠出现第一个动情周期时,卵巢和子宫的脏器系数也分别比正常组和载体组的明显增加(P<0.01)。另外模型组大鼠阴道脱落上皮细胞的形态学周期性变化和正常成熟大鼠的相似。结果提示,达那唑可诱导雌性大鼠的性发育显着提前,该模型是一种较理想的真性性早熟大鼠模型。 2.应用随机引物PCR(RNA arbitrarily primed PCR,RAP-PCR)方法从达那唑诱导的性早熟模型大鼠下丘脑共分离得到5条差异表达基因的cDNA片段,其中包括生殖调控体系的关键分子GnRH的cDNA。本文应用Dot blot鉴定了GnRHmRNA在大鼠下丘脑的表达,发现模型组下丘脑GnRHmRNA的表达呈上调趋势。另外一条差异表达基因,我们将其命名为IPP-1(idiopathic precocious puberty),Blast检索GeneBank发现,其与homo sapiens KIAA1538基因的同源性达84%,应用Dot blot和Northern blot分析发现,IPP-1mRNA在模型组大鼠下丘脑的表达下调。 3.应用RT-PCR方法观察到,滋阴泻火中药合剂可下调下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达。应用免疫组织化学研究发现,滋阴泻火中药合剂可以诱导性早熟模型大鼠下丘脑GnRH免疫阳性细胞数增加,我们推测滋阴泻火中药合剂可能通过抑制下丘脑GnRH的释放,缓解提前启动的下丘脑—垂体—性腺轴(hypothalamic-pituitary-gonad axis, HPGA)功能。另外,滋阴泻火中药合剂可显着上调性早熟差异基因IPP-1的表达。提示滋阴泻火中药合剂可在分子水平通过调整异常的基因表达,使HPGA的异常功能趋于正常化。性旱熟差异表达基因的克隆和鉴定及滋阴泻火中药合剂对差异基因的影响4.应用RT一PCR的方法观察到,在大鼠及不同年龄和性早熟儿章外周血单个核,细胞内均有GnRJlmRNA的表达,模型组大鼠其表达增加,性早熟患儿(,1=2)外周血单个核细胞内GnRHmRNA的表达较正常发育儿童(4岁、6岁、8岁)有升高趋势。我们推测外周组织细胞产生的GnRH可能通过旁分泌作用J几垂体之外的组织细胞上的GnRH受体,调节卵巢卵泡的发育和性街体激素的产生。虽然在外周血单个核细胞内观察到了KIAA1538mRNA的表达,但儿童及大鼠各组之间表达水平无显着差异。 总之,儿童性早熟可能是一种涉及到基因调控和表达的疾病,滋阴泻火中药合剂可从分子水平,在多个层次调整异常的HPGA功能。(本文来源于《复旦大学》期刊2003-05-01)
滋阴泻火中药合剂论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的:观察GABAA受体α亚基在性早熟模型大鼠下丘脑中的表达规律,并初步探讨GABAA受体α亚基在性早熟发病机制的作用;通过观察滋阴泻火中药合剂对性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α亚基表达的影响,探讨滋阴泻火中药合剂的作用机制,为该药治疗性早熟提供新的科学实验依据。方法:实验共分为两部分,我们首先观察了达那唑诱导的性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α1-3亚基mRNA的表达。将雌性SD大鼠随机分为正常组,对照组和模型组。模型组大鼠在出生后第5天给与皮下注射达那唑300μg(溶于250μ1乙醇乙二醇等体积溶液);对照组则注射等体积的乙醇乙二醇混合液;正常组不作任何处理。在前一部分的基础上,我们观察了滋阴泻火中药合剂对性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α亚基表达的影响:5日龄雌性SD大鼠分为正常组,模型组,生理盐水组,滋阴泻火中药合剂组(以下简称“中药组”)。后叁组在出生后第5天皮下注射达那唑进行造模,正常组不作任何处理;从第15天开始中药组给予滋阴泻火中药合剂灌胃,生理盐水组给予等量生理盐水灌胃,模型组不作其他处理。滋阴泻火中药合剂每毫升含3.3克生药,每天灌胃量为1.29ml/100g体重,至取材时为止。各组实验动物均于生后22天开始观察阴门开启情况;记录每只动物阴门开启的时间。取材时断头处死,迅速取下丘脑-80℃保存,取子宫和卵巢称重,计算子宫和卵巢系数;取血检测雌激素、促性腺激素水平,应用RT-PCR和realtimePCR以及Western Blot观察下丘脑GnRH、GABAA受体α亚基、雌激素α受体以及谷氨酸脱羧酶mRNA的表达变化。结果:实验一1.模型组大鼠阴门开启时间显着早于正常组和对照组(P<0.01),在出生后25天模型组大鼠子宫和卵巢的发育比正常组和对照组显着提前(P<0.05);但在生后32天和44天,叁组之间子宫和卵巢的器官系数无显着差异。2.模型组大鼠下丘脑GABAA受体α1和α3亚基mRNA表达水平显着下调,与正常组和对照组相比,有显着差异(P<0.05),而叁组动物下丘脑GABAA受体α2亚基mnRNA的表达则无显着差异(P>0.05)。实验二1.生后第22天,模型组大鼠子宫和卵巢的器官系数显着高于正常组(P<0.05),而中药组大鼠子宫和卵巢的器官系数显着低于模型组(P<0.05);模型组和生理盐水组大鼠子宫和卵巢的器官系数无显着差异(P>0.05)。2.模型组大鼠血清E2, LH和FSH水平明显高于正常组和对照组(P<0.01),中药组叁种激素水平比模型组和生理盐水组有下降,FSH水平有差异(P<0.05),E2和LH水平差异尤为明显(P<0.01)。3.模型组性早熟大鼠下丘脑GnRH mRNA的表达显着上调,与正常组相比有显着差异(P<0.01);中药组大鼠下丘脑GnRH mRNA表达水平显着下降,与模型组相比有显着差异(P<0.01)。4.模型组大鼠下丘脑GABAA受体α1和α3mRNA表达水平显着下调,与正常组相比有显着差异(P<0.01);中药组大鼠下丘脑GABAA受体α1l和α3mRNA表达水平显着升高,与模型组相比,有显着差异(P<0.01)。而其他四个亚基mRNA的表达在各组之间没有差异(P>0.05)。模型组大鼠下丘脑GABAA受体α1亚基蛋白表达下降,与正常组相比有显着差异(P<0.01);中药组大鼠下丘脑GABAA受体α1蛋白表达水平显着升高,与模型组相比有显着差异(P<0.01)。与此相似,模型组大鼠下丘脑GABAA受体α3亚基蛋白表达下降,与正常组相比有显着差异(P<0.01);中药组大鼠下丘脑GABAA受体03蛋白表达水平显着升高,与模型组相比有显着差异(P<0.01)。5.模型组性早熟大鼠下丘脑ERα mRNA水平显着升高,与正常组相比有显着差异(P<0.05);中药组ERα mRNA表达水平显着降低,与模型组相比,有显着差异(P<0.05)。6.下丘脑GAD65和GAD67mRNA的表达在各组之间无统计学差异(P>0.05)。结论:滋阴泻火中药合剂可以显着缓解雌性性早熟大鼠的性早熟症状;性早熟大鼠下丘脑GnRH mRNA表达显着升高,滋阴泻火中药合剂可以显着下调GnRH mRNA的表达;性早熟大鼠下丘脑ERα受体mRNA表达显着升高,滋阴泻火中药合剂可以显着下调ERα受体mRNA的表达;性早熟大鼠下丘脑GABAA受体α1和α3mRNA和蛋白表达水平显着降低,滋阴泻火中药合剂可以上调GABAA受体α1和α3亚基mRNA和蛋白的表达,进而抑制GnRH的合成释放,延缓性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴的启动。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
滋阴泻火中药合剂论文参考文献
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