苜蓿次生胚遗传转化系统优化

论文摘要

稳定高效的遗传转化系统是对苜蓿进行基因改良的重要前提条件。本实验以吉林省适产苜蓿品种为实验材料,对农杆菌介导的次生胚遗传转化系统中的各种关键影响因素进行了优化:胚性愈伤诱导培养基中2,4-D和KT的最适浓度分别为2 mg/L和0.5 mg/L;体胚分化培养基中6-BA和NAA的最适浓度均为0.5 mg/L;该法最适受体基因型为公农系列苜蓿品种;遗传转化过程中,胚性愈伤诱导培养基及体胚分化培养基中添加的卡那霉素浓度分别为75 mg/L和50 mg/L。通过GUS基因表达检测和定量RT-PCR分析表明,外源基因已经顺利整合进苜蓿基因组染色体中,遗传转化效率为20%左右。本实验为培育吉林省转基因苜蓿新品种工作提供了科学依据。

论文目录

• 1 结果与分析
•   1.1 不同激素对比对次生胚发生频率的影响
•   1.2 不同基因型次生胚发生频率
•   1.3 苜蓿次生胚法遗传转化及GUS基因表达检测
•   1.4 转基因苜蓿的分子检测
• 2 讨论
• 3 材料与方法
•   3.1 植物材料及表达载体
•   3.2 优化后的培养基
•   3.3 苜蓿无菌苗的培养
•   3.4 培养基激素配比的确定
•   3.5 不同苜蓿基因型体胚发生频率分析
•   3.6 苜蓿外源基因的遗传转化
•   3.7 GUS基因表达检测
•   3.8 转化再生植物的GUS基因半定量RT-PCR检测
• 作者贡献

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 金太成,王悦,吴艳菊,孟大伟,杨丽萍

关键词: 苜蓿,遗传转化,次生胚

来源: 分子植物育种 2019年20期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 吉林师范大学生命科学学院吉林省植物资源科学与绿色生产重点实验室

基金: 吉林省教育厅“十三五”科研规划项目(JJKH20180794KJ)资助

分类号: Q943

DOI: 10.13271/j.mpb.017.006685

页码: 6685-6690

总页数: 6

文件大小: 1718K

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