过量表达purC基因对Lactococcus lactis NZ9000酸胁迫抗性的影响

论文摘要

通过在乳酸乳球菌Lactococcus lactis NZ9000中过量表达嘌呤代谢途径中编码磷酸核糖基氨基咪唑-琥珀酰胺合酶的pur C基因,测定了重组菌株在酸胁迫条件下的存活率,经p H 4. 0胁迫培养4 h后,重组菌株的存活率为对照菌株的83. 2倍。采用ATP测定试剂盒和高效液相色谱分别考察菌株胞内ATP和氨基酸含量。结果表明,重组菌株在酸胁迫条件下维持了更高的胞内ATP和氨基酸（天冬氨酸、苏氨酸、谷氨酸和γ-氨基丁酸）含量,分别通过为细胞提供能量和消耗胞内质子的方式,帮助乳酸乳球菌抵御酸胁迫。研究发现,在乳酸乳球菌中过表达pur C基因能够明显提高菌株的酸胁迫抗性,同时为进一步通过改造嘌呤代谢途径提高乳酸菌酸胁迫耐受性提供了新的思路。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•     1.1.1 菌株及培养条件
•     1.1.2 试剂
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 方法
•     1.3.1 目的片段的扩增及纯化
•     1.3.2 表达载体的构建
•     1.3.3 重组菌株生长曲线的测定和乳酸发酵实验
•     1.3.4 胁迫条件下重组菌株酸胁迫抗性的分析
•     1.3.5 胁迫条件下重组菌株胞内ATP和氨基酸含量的测定
•     1.3.6 蛋白浓度的测定
• 2 结果与分析
•   2.1 重组菌株的构建
•   2.2 重组菌株的生长曲线和乳酸发酵性能测定
•   2.3 胁迫条件下重组菌株的存活率测定
•   2.4 胁迫条件下重组菌株胞内ATP含量的测定
•   2.5 胁迫条件下重组菌株胞内氨基酸含量的测定
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨佩珊,张娟,刘为佳,朱政明,堵国成

关键词: 过表达,酸胁迫耐受性

来源: 食品与发酵工业 2019年08期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学,轻工业手工业

单位: 工业生物技术教育部重点实验室(江南大学),江南大学生物工程学院,糖化学与生物技术教育部重点实验室(江南大学)

基金: 国家自然科学基金(31470160),江苏省产学研前瞻性联合研究项目(BY2016022-39)

分类号: TS201.3

DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019478

页码: 8-14

总页数: 7

文件大小: 1803K

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