MAPKs对磷酸酶MKP1-CD催化的激活作用研究

论文摘要

目的:丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen-activated Protein Kinases, MAPKs）是细胞内重要的信号传导通路,双位点特异性磷酸酶（Mitogen-activated Protein Kinase Phosphatases, MKPs）去磷酸化MAPKs,负调控MAPKs的信号传递。在MKPs去磷酸化MAPKs的过程中,MAPKs同时会激活部分MKPs的催化能力,MKP1便是其中之一。本文旨在比较三种经典MAPKs底物,ERK2、JNK1和p38α对MKP1磷酸酶催化能力的激活效果,进一步理解MAPKs与MKP1的底物特异性机制。方法:以p NPP为底物,检测在不同浓度的非磷酸化ERK2、JNK1和p38α存在下,MKP1-CD催化结构域片段蛋白质去磷反应速度的变化,对比所得的动力学参数以确定MAPKs对MKP1激活程度的差异。结果:ERK2和JNK1能够激活MKP1的催化活力,将催化速率提升1.5～2倍,而ERK2与MKP1的结合力比JNK1弱约6倍;p38α则没有观察到对MKP1去磷酸化能力的激活效果。结论:三种经典MAPKs中,ERK2和JNK1能够激活MKP1催化活力,而p38α则无法激活MKP1,进一步揭示了MAPKs和MKPs间的特异性相互作用,以及底物对MKPs活力的影响。

论文目录

• 前言
• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 分子克隆
•     1.2.2 蛋白质表达
•     1.2.3 蛋白质纯化
•     1.2.4 蛋白磷酸酶活力测定
•   1.3 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 MKP1-CD具有催化p NPP的活力
•   2.2 ERK2对MKP1-CD的催化能力有激活作用
•   2.3 JNK1能够激活MKP1-CD的催化活力
•   2.4 p38α对MKP1-CD的催化活力没有激活效果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘文桐,郭国光,何倩倩,徐荣,何青霞

关键词: 丝裂原活化蛋白激酶,双位点特异性磷酸酶,催化结构域,激活

来源: 现代生物医学进展 2019年18期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 清华大学生命科学学院,苏州大学医学院

基金: 国家自然科学基金项目（31770841）

分类号: Q55

DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2019.18.001

页码: 3401-3404+3416

总页数: 5

文件大小: 470K

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