导读:本文包含了富含甘氨酸蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:甘氨酸,蛋白,基因,定量,柽柳,实时,刚毛。
富含甘氨酸蛋白论文文献综述
汪影,张昌伟,侯喜林[1]（2018）在《不结球白菜富含甘氨酸RNA结合蛋白基因(BcGRP1)的克隆与分析》一文中研究指出本研究通过分子生物技术从不结球白菜(Brassica campestris ssp. chinensis)中克隆了BcGRP1,引物根据已报导的拟南芥(Arabidopsis thaliana)和大白菜(Brassica campestris ssp. pekinensis)中的同源基因序列设计。生物信息学方法分析显示BcGRP1基因编码168个氨基酸,其分子式为C1414H_2323N507O612S94,分子量39 231.67 Da,等电点5.23;无跨膜结构和信号肽。BcGRP1蛋白质的N端第9～82个氨基酸之间包含有一个保守的RNA识别基序(RNA recognition motif, RRM),RRM结构域中包含两段保守的核糖核蛋白结构,被命名为RNP1和RNP2,它们是RRM的活性位点。BcGRP1基因与与拟南芥以及大白菜中同源基因所编码的氨基酸的相似性在90%以上。以不结球白菜‘49菜心’为材料,通过荧光定量PCR分析不结球白菜中BcGRP1在不同处理过程中的表达量变化,本研究结果表明BcGRP1基因的表达量在TuMV以及NaCl处理下的变化不大,该基因对霜霉病以及高温的响应较明显,在这两种处理下,BcGRP1基因都被明显上调,因此,推测BcGRP1基因在这两种胁迫处理下能够起到调控作用。(本文来源于《分子植物育种》期刊2018年23期）
李真真[2]（2018）在《大白菜富含甘氨酸蛋白BrGRPl的功能初探》一文中研究指出GRPs(Glycine-rich proteins,富含甘氨酸蛋白),一类结构简单,且富含甘氨酸的高度重复序列组成的一个大家族蛋白,其在植物生长发育、生物防御、非生物胁迫响应等过程中起着重要作用。课题组前期发现一个在pol型细胞质雄性不育和可育植株花蕾中存在表达差异的基因BrGRP1,且在不育花蕾中表达量较高。本试验主要通过cDNA文库构建和筛选、BrGRP1过表达载体构建及遗传转化、转基因植株抗逆性鉴定等研究,初步揭示该基因的生物学功能。主要研究结果如下:(1)以大白菜不育系16C14花蕾为试验材料,采用SMART(switching mechanism at 5' end of RNA transcript)技术合成 cDNA,利用 DSN(duplex-specific nuclease)对所得cDNA进行均一化处理,之后与pDONRTM/Zeo载体重组并转化DH10B大肠杆菌菌株,构建了大白菜pol型雄性不育花蕾均一化cDNA文库。经检测,文库滴度为3.2×106 cfu/mL,库容量约为1.28×10 cfu,重组率97%,插入片段平均大小1.2kb左右。随机挑选100个阳性菌斑进行测序,冗余度仅为3.7%。(2)以文库质粒为模板,利用特异引物GRP-F/R成功克隆到BrGRP1基因cDNA序列。序列分析表明BrGRP1基因完整的ORF(Open Reading Frame,开放阅读框)为804 bp,编码267个氨基酸,分子量为29.7 kDa,等电点为7.3;其编码的BrGRP1蛋白为非跨膜蛋白,也不是分泌蛋白。与白菜基因组预测基因Bra004066序列相似性为93%,拟南芥At1G6787 基因的相似性为65%。(3)利用无缝克隆技术成功构建过表达载体Cam35S-BrGRP1,进一步进行拟南芥遗传转化。通过抗生素抗性筛选和PCR鉴定共获得7个拟南芥转基因纯系,从中随机选取了叁个转基因T3代纯系(GRP1,GRP4和GRP5)进行后续试验。与野生型相比,转基因拟南芥在表型上没有发生变化;qRT-PCR分析表明BrGRP1在转基因拟南芥中高效表达。逆境响应研究表明:0.3μmmol/LABA、100 mmol/LNaCl处理可抑制转基因拟南芥种子萌发和幼苗生长。以上结果表明该BrGRP1基因可能参与ABA信号转导过程及NaCl胁迫响应过程。(本文来源于《山西农业大学》期刊2018-06-01）
徐瑞[3]（2018）在《中国樱桃富含甘氨酸RNA结合蛋白基因克隆与功能初鉴》一文中研究指出富含甘氨酸 RNA 结合蛋白(Glycine-rich RNA-binding Protein,GRPs)是一种N端具有一个或者多个RNA识别基序和C末端富含甘氨酸区域的结合蛋白,可以响应外界刺激,参与植物应激反应,调控植物的生长发育和提高植物的抗逆能力。本研究从中国樱桃(Prunus pseudocerasus)转录组数据库中筛选得到3个GRP编码基因,对其进行生物信息学分析,根据同源性比对结果,分别命名为PpcGRP4、PpcGRP6、PpcGRP7。利用实时定量 PCR 技术(Real-time PCR)分析PpcGRP4、PpcGRP6、PpcGRP7基因在低温胁迫下中国樱桃花芽和叶片中的表达特性。利用PCR技术分离了樱桃PpcGRP4、PpcGRP6、PpcGRP7的cDNA基因全长序列,并构建了植物表达载体。利用农杆菌介导花序浸染法将3个基因分别转入拟南芥中,初步研究该基因的功能,主要取得以下研究结果:1.根据测序结果,获得注释为富含甘氨酸RNA结合蛋白基因序列,利用NCBI在线分析软件Open Read Frame Finder分析了基因开放阅读框,PpcGRP4、PpcGRP6、PpcGRP7分别编码141、140和179个氨基酸。从其氨基酸数量、蛋白质二级结构等生物信息学分析可知,PpcGRP6、PpcGRP7其等电点均大于7,均为碱性蛋白质。PpcGRP4、PpcGRP6、PpcGRP7不稳定指数分别为39.3、55.07、62.92。氨基酸分子量之间存在差异,而原子组成、脂肪指数和总平均疏水性等性质差异不大,均为疏水性蛋白。对其蛋白质二级结构分析发现,这3个富含甘氨酸RNA结合蛋白都具有α螺旋、β转角、无规卷曲、延伸链等结构。而PpcGRP4和PpcGRP6以α螺旋所占比例较大。从TMHMM的跨膜区预测结果看,PpcGRP4、PpcGRP6和PpcGRP7的蛋白均无跨膜区域,蛋白基本都在膜外。蛋白的亚细胞定位预测结果表明:PpcGRP4主要定位在细胞核中,PpcGRP6主要定位在线粒体中,PpcGRP7在细胞质中,且在细胞核、线粒体、细胞质中的分布占有不同比例。通过与其它植物相关基因进行同源性比对发现,它们与梅(Prunus mume)和碧桃(Prunus persica)的GRPs具有较高的亲缘关系。2.利用 Real-time PCR 技术分别对 PpcGRP4、PpcGRPRP7基因在低温胁迫下的中国樱桃花芽和叶片中表达特性进行分析。结果表明,在低温胁迫条件下,花芽和叶片中PpcGRP4、PpcGRP6和PpcGRP7基因的表达量均呈先上升后下降的趋势,最高可上调34倍。由此认为PpcGRP4和PpcGRP6GRP7基因对低温具有明显响应,但响应程度存在明显差异。PpcGRP7对低温的相应程度最高,PpcGRP6次之,最后是PpcGRP4。3.利用PCR技术分离了 PpcGRP4、PpcGRP6和PpcGRP7全长cDNA,并分别构建了植物表达载体,利用花序浸染法遗传转化拟南芥,获得了稳定遗传的转基因株系T1代。以野生型拟南芥和转基因拟南芥种子为实验材料,进行种子萌发试验。结果表明,种子萌发48 h时,超表达PpcGRP6和超表达PpcGRP7种子萌发率分别为38.9%和25.1%,而野生型种子萌发率为9.3%,超表达PpcGRP6和超表达PpcGRP7显着促进种子萌发。但超表达PpcGRP4拟南芥种子的萌发率为14.8%与野生型拟南芥种子差异不显着。4.为更加深入研究中国樱桃PpcGRP4、PpcGRP6和PpcGRP7基因的功能,分别测定低温处理不同时间下转基因拟南芥和野生型拟南芥中电解质外渗率和丙二醛含量(Malondialdehyde,MDA)。结果表明,在低温胁迫下,T1代转基因植株叶片的电解质外渗率和MDA都随着时间的延长呈先上升后下降的趋势,根据拟南芥叶片电解质外渗率的变化率和拟南芥叶片8 h时MDA含量的积累量,推测中国樱桃富含甘氨酸RNA结合蛋白基因PpcGRP4、PpcGRP6、PpcGRP7基因在转基因拟南芥中表达可以增强细胞膜氧化能力,进而提高抗寒能力。通过以上研究结果,明确了部分中国樱桃富含甘氨酸RNA结合蛋白基因的结构特征、表达特性及功能,为植物抗逆研究提供一定的理论依据。(本文来源于《浙江师范大学》期刊2018-03-15）
徐景升,阙友雄,颜克伟,唐唯其,许莉萍[4]（2011）在《甘蔗富含甘氨酸蛋白基因(Sc-GRP)的克隆及其表达分析》一文中研究指出本研究在对甘蔗(Saccharum officinarum)叶片全长cDNA文库测序的基础上,通过EST(expressed sequencetag)序列测定和生物信息学分析,获得了1个编码富含甘氨酸蛋白(glycine-richprotein,GRP)基因的全长cDNA序列,命名为Sc-GRP。生物信息学分析表明,该基因全长518bp,包含一个273bp的完整开放阅读框(open reading frame,ORF),5'端非编码区(untranslated region,UTR)长58bp,3'端UTR长187bp,且在3'端UTR中有典型的加尾信号AATAAA和polyA结构。该基因编码长度为90个氨基酸的蛋白,其理论分子量为10.12kD,等电点为5.86。Sc-GRP中甘氨酸含量最高,达到13%,且包含明显的GGX和GX重复结构单元。Sc-GRP没有信号肽和RNA结合位点。定量PCR分析结果表明,该基因在成熟叶片中的表达量远高于其在心叶中的表达量。在甘蔗茎中,随着节间成熟度的增加,其表达量逐渐升高,但在成熟根中几乎没有表达。在铝盐胁迫下,该基因在甘蔗初生根中的表达先是升高,然后随胁迫时间的增加而下降。研究结果提示该基因定位于细胞质,参与细胞的渗透调节,本研究结果为该基因的功能解析及其在甘蔗分子育种上的应用积累了基础资料。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2011年04期）
姜波,高彩球,王玉成,于丽丽,杨传平[5]（2011）在《刚毛柽柳富含甘氨酸RNA结合蛋白ThGRP1基因克隆与表达分析》一文中研究指出在有机体的生长和发育过程中,基因表达在转录、转录后和翻译水平都受到严格地调控。转录调控是基因表达调控的第一步,曾被认为是基因表达的主要调控机制,但是随着对转录后调控机制越来(本文来源于《林业科学研究》期刊2011年02期）
卢秀萍,陈学军,刘勇,唐启慧,陈禹保[6]（2010）在《烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出目的:克隆烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白基因(glycine-rich RNA-binding protein,GRRBPs)并进行原核表达,为制备抗体和研究烟草抗逆性分子机理打下基础。方法:从总RNA中反转录扩增并克隆烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白NtRGP-1a和NtRGP-3全长cDNA,将cDNA序列克隆到表达载体pGEX4T-1上,构建了重组表达质粒pGEX4T-1/NtRGP-1a、pGEX4T-1/NtRGP-3,转化大肠杆菌rosetta,IPTG诱导表达,GSTrap 4B亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果:重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致,蛋白纯度占总蛋白的95%以上。结论:成功克隆和表达了烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白NtRGP-1a和NtRGP-3基因序列,为制备抗体和烟草抗逆性分子机理等进一步的研究奠定了基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2010年08期）
张水军,曾千春,卢秀萍,李文正[7]（2010）在《植物富含甘氨酸蛋白的研究进展》一文中研究指出植物富含甘氨酸蛋白(Glycine-rich proteins,GRPs)是由富含甘氨酸的高度重复序列组成的蛋白质。文章综述了近年来国内外对植物富含甘氨酸蛋白及其基因的研究进展,系统地介绍了GRPs的结构特点、GRP基因表达特性及GRP基因功能,旨在为今后的进一步研究提供参考。(本文来源于《中国农学通报》期刊2010年14期）
富含甘氨酸蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
GRPs(Glycine-rich proteins,富含甘氨酸蛋白),一类结构简单,且富含甘氨酸的高度重复序列组成的一个大家族蛋白,其在植物生长发育、生物防御、非生物胁迫响应等过程中起着重要作用。课题组前期发现一个在pol型细胞质雄性不育和可育植株花蕾中存在表达差异的基因BrGRP1,且在不育花蕾中表达量较高。本试验主要通过cDNA文库构建和筛选、BrGRP1过表达载体构建及遗传转化、转基因植株抗逆性鉴定等研究,初步揭示该基因的生物学功能。主要研究结果如下:(1)以大白菜不育系16C14花蕾为试验材料,采用SMART(switching mechanism at 5' end of RNA transcript)技术合成 cDNA,利用 DSN(duplex-specific nuclease)对所得cDNA进行均一化处理,之后与pDONRTM/Zeo载体重组并转化DH10B大肠杆菌菌株,构建了大白菜pol型雄性不育花蕾均一化cDNA文库。经检测,文库滴度为3.2×106 cfu/mL,库容量约为1.28×10 cfu,重组率97%,插入片段平均大小1.2kb左右。随机挑选100个阳性菌斑进行测序,冗余度仅为3.7%。(2)以文库质粒为模板,利用特异引物GRP-F/R成功克隆到BrGRP1基因cDNA序列。序列分析表明BrGRP1基因完整的ORF(Open Reading Frame,开放阅读框)为804 bp,编码267个氨基酸,分子量为29.7 kDa,等电点为7.3;其编码的BrGRP1蛋白为非跨膜蛋白,也不是分泌蛋白。与白菜基因组预测基因Bra004066序列相似性为93%,拟南芥At1G6787 基因的相似性为65%。(3)利用无缝克隆技术成功构建过表达载体Cam35S-BrGRP1,进一步进行拟南芥遗传转化。通过抗生素抗性筛选和PCR鉴定共获得7个拟南芥转基因纯系,从中随机选取了叁个转基因T3代纯系(GRP1,GRP4和GRP5)进行后续试验。与野生型相比,转基因拟南芥在表型上没有发生变化;qRT-PCR分析表明BrGRP1在转基因拟南芥中高效表达。逆境响应研究表明:0.3μmmol/LABA、100 mmol/LNaCl处理可抑制转基因拟南芥种子萌发和幼苗生长。以上结果表明该BrGRP1基因可能参与ABA信号转导过程及NaCl胁迫响应过程。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
富含甘氨酸蛋白论文参考文献
[1].汪影,张昌伟,侯喜林.不结球白菜富含甘氨酸RNA结合蛋白基因(BcGRP1)的克隆与分析[J].分子植物育种.2018
[2].李真真.大白菜富含甘氨酸蛋白BrGRPl的功能初探[D].山西农业大学.2018
[3].徐瑞.中国樱桃富含甘氨酸RNA结合蛋白基因克隆与功能初鉴[D].浙江师范大学.2018
[4].徐景升,阙友雄,颜克伟,唐唯其,许莉萍.甘蔗富含甘氨酸蛋白基因(Sc-GRP)的克隆及其表达分析[J].农业生物技术学报.2011
[5].姜波,高彩球,王玉成,于丽丽,杨传平.刚毛柽柳富含甘氨酸RNA结合蛋白ThGRP1基因克隆与表达分析[J].林业科学研究.2011
[6].卢秀萍,陈学军,刘勇,唐启慧,陈禹保.烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白在大肠杆菌中的表达[J].中国生物工程杂志.2010
[7].张水军,曾千春,卢秀萍,李文正.植物富含甘氨酸蛋白的研究进展[J].中国农学通报.2010
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