导读:本文包含了植物病毒表达载体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:载体,病毒,植物,基因,花叶,抗原,安全性。
植物病毒表达载体论文文献综述
高丁梅,马婷,丁向真,李志英,王盛[1](2015)在《利用Ⅱ型启动子转录的U6 RNA提高植物病毒表达载体在植物中表达外源基因的水平》一文中研究指出Ⅱ型启动子转录的外源短链RNA可以竞争性抑制细胞内源mRNA的核质转运,因而可能会提高植物RNA病毒载体表达的外源基因在植物中的积累.为了验证这一假说,利用OE-PCR技术合成拟南芥U6-1核内小RNA序列,并构建其Ⅱ型启动子转录的植物表达载体.以农杆菌渗滤技术,与烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)表达载体共接种寄主植物本氏烟,通过对报告基因绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的荧光观察,并以Western印迹和ELISA测定GFP在烟草中的表达情况,分析共表达Ⅱ型启动子转录的U6 RNA对外源基因在植物中表达的作用效果.结果表明,共接种Ⅱ型启动子转录的U6 RNA对TMV病毒表达载体表达外源基因的水平有明显的增效作用,推测RNA核质转运干扰是提高外源基因表达的可能机制.(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2015年08期)
王振东,王晓华,孟鹏,秦会权,郑新伟[2](2009)在《植物病毒表达载体pClYVV/CP/W的构建及GFP表达(摘要)(英文)》一文中研究指出[目的]研究了植物病毒表达载体pClYVV/CP/W的构建及用pClYVV/CP/W表达绿色荧光蛋白(GFP),为植物反应器生产有用蛋白、开发有效的植物病毒载体提供参考。[方法]用叁叶草黄脉病毒侵染性全长cDNA克隆pClYVV基因组的NIb/CP基因之间的一段多克隆位点和两侧含有病毒蛋白酶NIa切割识别序列的多聚脱氧核糖核苷酸接头,构建pClYVV/CP/W载体,并将绿色荧光蛋白基因插入pClYVV/CP/W中构建pClYVV/CP/W/GFP载体,用反转录PCR对重组病毒克隆转录情况进行检测,并用Western杂交对重组病毒克隆表达的目的基因产物进行测定。[结果]pClYVV/CP/W/GFP接种的蚕豆幼苗表现出与野生型ClYVV相同的症状,发病率达100%,表明重组病毒克隆pClYVV/CP/W/GFP有侵染性,外源基因的插入没有破坏载体pClYVV/CP/W的开放阅读框;以感染叶总RNA为模板,对pClYVV/CP/W/GFP表达GFP外源基因的稳定性进行了检测,从F0(重组病毒质粒最初转录出的病毒)一直检测到F4子代病毒。检测结果表明,外源基因在F4子代病毒基因组中稳定存在;以从感染叶中提取的总蛋白为抗原,以GFP抗体为第1抗体,以碱性磷酸酶标记抗体为第2抗体,用Western杂交对重组病毒克隆pCVYVV/CP/W/GFP表达外源蛋白进行了定性检测。从F0一直检测到F4子代病毒。检测结果表明,重组病毒克隆pClYVV/CP/W/GFP至少到F4子代病毒能稳定表达GFP。[结论]该研究结果为用植物表达有用蛋白提供了有用的植物病毒载体。(本文来源于《Agricultural Science & Technology》期刊2009年05期)
王振东,王晓华,孟鹏,秦会权,郑新伟[3](2009)在《植物病毒表达载体pClYVV/CP/W的构建及GFP表达的研究》一文中研究指出[目的]研究植物病毒表达载体pC1YVV/CP/W的构建及用pC1YVV/CP/W表达绿色荧光蛋白(GFP),为植物反应器生产有用蛋白、开发有效的植物病毒载体提供参考。[方法]用叁叶草黄脉病毒侵染性全长cDNA克隆pC1YVV基因组的Mb/CP基因之间的一段多克隆位点和两侧含有病毒蛋白酶NIa切割识别序列的多聚脱氧核糖核苷酸接头,构建pC1YVV/CP/W载体,并将绿色荧光蛋白基因插入pC1YVV/CP/W中构建pC1YVV/CP/W/GFP载体,用反转录PCR对重组病毒克隆转录情况进行检测,并用Western杂交对重组病毒克隆表达的目的基因产物进行测定。[结果]pC1YVV/CP/W/GFP接种的蚕豆幼苗表现出与野生型C1YVV相同的症状,发病率达100%,表明重组病毒克隆pClYVV/CP/W/GFP有侵染性,外源基因的插入没有破坏载体pClYVV/CP/W的开放阅读框;外源基因在F_4子代病毒基因组中稳定存在;重组病毒克隆pC1YVV/CP/W/GFP至少到F_4子代病毒能稳定表达GFP。[结论]该研究结果为用植物表达有用蛋白提供了有用的植物病毒载体。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2009年28期)
田秀艳,王振东[4](2009)在《植物病毒表达载体的研究现状及其应用前景》一文中研究指出就国内外植物病毒载体构建的现状、开发应用前景及存在的问题进行了简要的综述。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2009年01期)
年洪娟,杨淑慎,张锡梅[5](2002)在《外源基因在植物病毒表达载体中表达策略的研究进展》一文中研究指出利用植物病毒表达载体表达外源蛋白是近年来发展起来的具有表达量大、速度快和廉价等优势的生产系统 ,其有 4种构建策略 :基因取代、基因插入、融合抗原和基因互补。此外还从病毒表达载体的基础性研究和商业应用方面进行了详细讨论。(本文来源于《西北植物学报》期刊2002年05期)
彭燕,崔晓峰,周雪平[6](2002)在《植物病毒—新型的外源基因表达载体》一文中研究指出与利用转基因植物表达外源基因相比 ,植物病毒载体具有表达水平高、速度快、宿主广等优点 ,是一类新型的外源基因表达载体。本文就植物病毒表达载体的构建策略、应用状况和存在的问题进行了综述。(本文来源于《浙江大学学报(农业与生命科学版)》期刊2002年04期)
杨培龙,刘德虎[7](2000)在《植物病毒表达载体研究进展》一文中研究指出利用DNA或RNA植物病毒作载体表达外源蛋白是近几年发展较快的一种新的遗传转化方式 ,它具有以下几个优点 :表达量大 ,表达速度快 ,易于进行基因操作和接种以及适用对象广泛。已发展的四种载体构建策略包括 :基因取代 ,基因插入 ,融合抗原和基因互补。植物病毒表达载体可以用于基因的重组、病毒的移动和基因功能的检测等基础性研究 ,也可用于商业上表达多种药用蛋白或疫苗。植物病毒表达载体的稳定性主要取决于存在同源序列而引起的基因重组。本文还对病毒载体的生物安全性进行了讨论。(本文来源于《生物工程进展》期刊2000年03期)
植物病毒表达载体论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
[目的]研究了植物病毒表达载体pClYVV/CP/W的构建及用pClYVV/CP/W表达绿色荧光蛋白(GFP),为植物反应器生产有用蛋白、开发有效的植物病毒载体提供参考。[方法]用叁叶草黄脉病毒侵染性全长cDNA克隆pClYVV基因组的NIb/CP基因之间的一段多克隆位点和两侧含有病毒蛋白酶NIa切割识别序列的多聚脱氧核糖核苷酸接头,构建pClYVV/CP/W载体,并将绿色荧光蛋白基因插入pClYVV/CP/W中构建pClYVV/CP/W/GFP载体,用反转录PCR对重组病毒克隆转录情况进行检测,并用Western杂交对重组病毒克隆表达的目的基因产物进行测定。[结果]pClYVV/CP/W/GFP接种的蚕豆幼苗表现出与野生型ClYVV相同的症状,发病率达100%,表明重组病毒克隆pClYVV/CP/W/GFP有侵染性,外源基因的插入没有破坏载体pClYVV/CP/W的开放阅读框;以感染叶总RNA为模板,对pClYVV/CP/W/GFP表达GFP外源基因的稳定性进行了检测,从F0(重组病毒质粒最初转录出的病毒)一直检测到F4子代病毒。检测结果表明,外源基因在F4子代病毒基因组中稳定存在;以从感染叶中提取的总蛋白为抗原,以GFP抗体为第1抗体,以碱性磷酸酶标记抗体为第2抗体,用Western杂交对重组病毒克隆pCVYVV/CP/W/GFP表达外源蛋白进行了定性检测。从F0一直检测到F4子代病毒。检测结果表明,重组病毒克隆pClYVV/CP/W/GFP至少到F4子代病毒能稳定表达GFP。[结论]该研究结果为用植物表达有用蛋白提供了有用的植物病毒载体。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
植物病毒表达载体论文参考文献
[1].高丁梅,马婷,丁向真,李志英,王盛.利用Ⅱ型启动子转录的U6RNA提高植物病毒表达载体在植物中表达外源基因的水平[J].中国生物化学与分子生物学报.2015
[2].王振东,王晓华,孟鹏,秦会权,郑新伟.植物病毒表达载体pClYVV/CP/W的构建及GFP表达(摘要)(英文)[J].AgriculturalScience&Technology.2009
[3].王振东,王晓华,孟鹏,秦会权,郑新伟.植物病毒表达载体pClYVV/CP/W的构建及GFP表达的研究[J].安徽农业科学.2009
[4].田秀艳,王振东.植物病毒表达载体的研究现状及其应用前景[J].安徽农业科学.2009
[5].年洪娟,杨淑慎,张锡梅.外源基因在植物病毒表达载体中表达策略的研究进展[J].西北植物学报.2002
[6].彭燕,崔晓峰,周雪平.植物病毒—新型的外源基因表达载体[J].浙江大学学报(农业与生命科学版).2002
[7].杨培龙,刘德虎.植物病毒表达载体研究进展[J].生物工程进展.2000