双链抗体论文_黄燕华,王伟佳,温冬梅,陈康,谢晋烨

导读:本文包含了双链抗体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:抗体,免疫,系统性红斑狼疮,小体,史密斯,飞蝗,可溶性。

双链抗体论文文献综述

黄燕华,王伟佳,温冬梅,陈康,谢晋烨[1](2019)在《抗细胞膜DNA抗体、抗核抗体及抗双链DNA抗体联合检测在系统性红斑狼疮诊断中的应用价值》一文中研究指出目的评价抗细胞膜DNA抗体(anti-cmDNA)、抗核抗体(ANA)、抗双链DNA抗体(anti-dsDNA)单指标及多指标联合方案在SLE诊断中的应用价值。方法选取2017年9月至12月中山大学附属中山医院门诊和住院的101例SLE患者,94例非SLE自身免疫病患者,78名健康人,检测血清anti-cmDNA、ANA及anti-dsDNA水平。其中anti-cmDNA和anti-dsDNA检测采用ELISA法,ANA检测采用间接免疫荧光法。检测方案分为单指标以及双指标、叁指标检测,共18种方案。检测结果组间比较采用四格表配对卡方(χ~2)检验。结果 SLE患者组anti-cmDNA阳性率(68.3%)明显高于非SLE自身免疫病组和健康人对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。在单指标检测方案中,anti-cmDNA检测的准确率(81.7%)、约登指数(0.58)均最高。在多指标联合检测方案中,anti-dsDNA/anti-cmDNA、ANA+(anti-dsDNA/anti-cmDNA)、anti-dsDNA/(ANA+anti-cmDNA)、anti-cmDNA/(ANA+anti-dsDNA)和(ANA+anti-cmDNA)/(anti-dsDNA+anti-cmDNA)/(ANA+anti-dsDNA)这5种方案的准确率(84.2%)、约登指数(0.65)最高。结论 Anti-cmDNA无论单指标还是以其为基础的多指标联合检测方案对SLE诊断均有较高价值。(本文来源于《临床检验杂志》期刊2019年07期)

王之青,郑冰,李恩灵[2](2019)在《酶联免疫吸附试验检测系统性红斑狼疮抗双链DNA抗体的应用价值》一文中研究指出目的·探讨酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测抗双链DNA(double-stranded DNA,ds DNA)抗体的特点及临床应用价值。方法·采用放射免疫测定(radioimmunoassay,RIA)法和ELISA法同时检测186例系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者、183例非SLE自身免疫疾病患者、78例非自身免疫病对照和50例健康体检者血清中抗ds DNA抗体,评价其诊断效能。结果·RIA法和ELISA法对于SLE诊断的敏感度分别为47.31%和62.90%、特异度分别为85.85%和81.67%,阳性预测值分别为66.67%和67.24%,阴性预测值分别为73.15%和78.14%。2种方法检测值均随疾病的活动度升高而增高。结论·ELISA法对SLE的诊断特异度与RIA法接近,但其敏感度更高,可有效筛查SLE患者。同时,2种方法均有助于监测SLE病情的活动状态。(本文来源于《上海交通大学学报(医学版)》期刊2019年05期)

李宁[3](2019)在《抗双链DNA抗体、ANuA及抗Sm抗体检测在SLE诊断中的应用价值》一文中研究指出目的探讨抗双链DNA(double stranded DNA)抗体、抗核小体抗体(antinucleosome antibody,ANuA)及抗史密斯(Smith,Sm)抗体检测在系统性红斑狼(SLE)诊断中的应用价值。方法选择某院2017年1月至2018年3月收治的SLE患者125例(观察组),其中活动期SLE患者63例,非活动期SLE患者62例,另选择2017年1月至2018年3月某院收治的皮肌炎和类风湿性关节炎患者70例(对照组),所有患者均进行抗双链DNA抗体、ANuA及抗Sm抗体检测,分析结果。结果观察组抗双链DNA抗体、ANuA及抗Sm抗体阳性率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);活动期SLE患者抗双链DNA抗体、ANuA阳性率明显高于非活动期患者,差异有统计学意义(P<0.05);抗双链DNA抗体表达与ANuA及抗Sm抗体检测水平呈正相关,P<0.01。结论抗双链DNA抗体、ANuA与SLE病情活动度密切相关,可以用来评估病情的严重程度,有利于准确诊断疾病。(本文来源于《中国疗养医学》期刊2019年05期)

葛建华,龚文,施新明,巩惠芸,马龙新[4](2018)在《ELISA法联合CLIFT法检测抗双链DNA-IgG抗体应用于系统性红斑狼疮的诊断价值》一文中研究指出目的:采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA),观察抗双链DNA (doublestranded DNA, dsDNA)IgG抗体在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)患者和非SLE患者中的分布特点,并评估ELISA法联合绿蝇短膜虫间接免疫荧光试验(crithidia luciliae immunofluorescence test, CLIFT)检测抗dsDNA-IgG抗体用于SLE诊断的效能。方法:收集上海交通大学医学院附属瑞金医院检测抗dsDNA-IgG抗体的住院患者的临床资料,共4 726例采用ELISA法,其中830例同时采用CLIFT检测,用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve, ROC)分析2种检测方法辅助诊断SLE的效能。结果 :采用ELISA法检测的4 726例住院患者中,dsDNA抗体阳性者398例,其中SLE 183例,占dsDNA阳性者46.0%,非SLE疾病依次为肝脏疾病(28.4%)、其他结缔组织病(7.5%)、血液系统疾病(5.3%)及呼吸系统疾病(3.8%);830例采用CLIFT检测ds DNA,134例结果显示为dsDNA抗体阳性的患者中,其中SLE者占94.0%,另有非SLE诊断病例包括自身免疫性肝病3例,肝硬化、肾炎、银屑病和抗磷脂综合征各1例。830例完成ELISA法与CLIFT双检测的患者中,SLE患者共197例,非SLE患者633例,ELISA法检测灵敏度为74.6%,特异度仅为92.9%;而CLIFT法测dsDNA抗体具有较高的特异度,为98.7%,灵敏度为64.0%。联合2种方法平行检测dsDNA抗体可明显提高SLE的诊断效能,ROC曲线下面积最高(0.869 0)。结论:单独应用ELISA法时,应警惕假阳性较高,需排除其他非SLE疾病的诊断;联合使用ELISA法和CLIFT法检测抗dsDNA抗体可较单独应用CLIFT法明显提高SLE的诊断效能,二者联合平行检测结果为阴性,用于排除SLE更有意义。(本文来源于《诊断学理论与实践》期刊2018年06期)

宋慧芳,张建琴,范云鹤,李涛,马恩波[5](2018)在《飞蝗双链RNA降解酶的抗体制备及组织定位》一文中研究指出【目的】双链RNA降解酶(dsRNA degrading enzyme, dsRNase)是制约RNA干扰(RNAi)技术在害虫防治中应用的关键因素之一。本研究旨在利用原核表达系统获得飞蝗LmdsRNase2和LmdsRNase3的特异抗原,进而制备抗体,对其进行组织定位和蛋白表达量检测,为进一步解析飞蝗中肠dsRNA降解酶基因的功能分化提供蛋白水平的证据。【方法】通过对LmdsRNase2和LmdsRNase3的氨基酸序列(GenBank:ARW74135.1和ARW74134.1)进行比对,分别选取特异的LmdsRNase2和LmdsRNase3抗原序列(R2'、R3')进行后续的研究。根据LmdsRNase2和LmdsRNase3的cDNA全长序列,设计包含酶切位点BamH I、Hind Ⅲ的引物,采用PCR技术扩增目标片段,双酶切后连接至pET-32a载体。将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,加入IPTG至终浓度为0.5mmol·L~(-1),37℃下诱导4 h后提取蛋白,采用SDS-PAGE电泳方法检测蛋白表达。大量培养带重组质粒的大肠杆菌,诱导目的蛋白大量表达,用镍柱亲和层析法分离R2'和R3'蛋白,Bradford法检测蛋白浓度。经两次免疫新西兰大白兔后,最终获得LmdsRNase2和LmdsRNase3的多克隆抗体。利用ELISA法测定多克隆抗体的效价,通过Western blot检测抗体的特异性。提取飞蝗5龄第3天的中肠组织蛋白和中肠液,分别用LmdsRNase2和LmdsRNase3的抗体检测其表达量。最后制备飞蝗5龄第3天的中肠石蜡切片,通过免疫组化对LmdsRNase2和LmdsRNase3蛋白进行亚细胞定位。【结果】通过氨基酸序列比对发现,LmdsRNase2和LmdsRNase3具有37%的序列一致度,选取特异的序列R2'和R3'设计引物,分别包含157和153个氨基酸残基,理论分子量分别为17.0和16.8 kD。在IPTG浓度为0.5 mmol·L~(-1)条件下,37℃诱导4 h后,目的蛋白在包涵体中大量表达。扩大培养重组菌株后提取蛋白,用镍亲和层析柱分离得到纯度为85%的R2'蛋白,可直接用于免疫;而R3'蛋白的纯度低于85%,利用电泳切胶纯化后免疫新西兰大白兔,36 d后取抗血清进行检测,效价均达到1:102 400,表明抗体效果良好。用多克隆抗体杂交实验室保存的His-LmdsRNase2和His-LmdsRNase3融合蛋白,对抗体进行特异性检测,结果表明R2和R3的抗体分别特异性识别LmdsRNase2和LmdsRNase3,无交叉杂交现象,且条带与His抗体杂交到的条带大小一致。采用Western blot方法检测,发现LmdsRNase2蛋白在中肠组织中高表达,但在中肠液中未检测到可见表达,LmdsRNase3蛋白在中肠组织和中肠液中均未检测到表达。进一步采用免疫组化方法对两个蛋白进行组织定位,发现LmdsRNase2和LmdsRNase3均在中肠细胞质中表达,但LmdsRNae3的表达量较低。【结论】成功制备了特异性良好的飞蝗LmdsRNase2和LmdsRNase3抗体,Western blot和免疫组化分析表明LmdsRNase2在中肠细胞质中高表达,而LmdsRNase3的表达量很低。研究结果为飞蝗中肠两个dsRNA降解酶LmdsRNase2和LmdsRNase3的功能分化提供了蛋白水平的证据。(本文来源于《中国农业科学》期刊2018年19期)

孙佳莹,代思明,张志毅[6](2018)在《不同方法检测抗双链DNA抗体性能评估及临床应用》一文中研究指出系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)为自身免疫性疾病,以青年妇女多见,临床表现为多器官、多系统受累,早期诊断有助于控制病情和改善预后~([1])。患者血清中可出现多种自身抗体,抗双链DNA(ds DNA)抗体是SLE的特征性血清标志物,被列为美国风湿病学会修订的SLE分类标准之一。临床用于病情活动程度、肾脏受累和治疗监测的指(本文来源于《中国实用内科杂志》期刊2018年09期)

李娜,孔宁,邹和建,万伟国[7](2018)在《抗双链DNA抗体和抗核小体抗体定性检测对系统性红斑狼疮的诊断价值》一文中研究指出目的:评价免疫印迹法抗双链DNA(ds-DNA)抗体、抗核小体抗体(ANuA)及绿蝇短膜虫间接免疫荧光法抗dsDNA抗体检测在系统性红斑狼疮(SLE)中的诊断价值。方法:分别运用免疫印迹法、绿蝇短膜虫间接免疫荧光法及ELISA法检测166例SLE疾病活动期(包括初发和复发)患者血清中抗ds-DNA抗体、ANuA的水平。以酶联免疫吸附法(ELISA)检测结果为标准,评价抗ds-DNA抗体和ANuA定性检测对SLE的诊断价值。结果:免疫印迹法检测抗ds-DNA抗体及ANuA诊断SLE的阳性符合率分别为73.33%、66.28%,绿蝇短膜虫间接免疫荧光法检测抗ds-DNA抗体诊断SLE的阳性符合率为68.57%;随着抗ds-DNA抗体和ANuA滴度的减小,其免疫印迹法或间接免疫荧光法检测阳性符合率均降低(P<0.05)。结论:抗ds-DNA抗体、ANuA定性检测诊断SLE的阳性率均不理想,建议在ELISA检测抗ds-DNA抗体和ANuA诊断SLE的基础上采用。(本文来源于《中国临床医学》期刊2018年01期)

田野,张云聪,冯珍如,闫惠平,张岩[8](2018)在《抗双链DNA抗体水平和抗体亲和力与SLE患者疾病状态的关系以及对两种方法检测能力的影响》一文中研究指出目的探讨抗双链DNA(dsDNA)抗体水平和抗体亲和力与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动性的关系,分析两种抗dsDNA抗体检测方法检出能力差异的原因。方法使用酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光法(IIF)同时测定300例SLE患者(SLE组)和495例非SLE自身免疫疾病患者(非SLE疾病组),以及300例健康人(健康对照组)血清中的抗dsDNA抗体,然后进一步测定ELISA检测为阳性标本的抗dsDNA抗体亲和力指数。结果 (1)SLE组抗dsDNA抗体水平[285.8(164.5~463.3)IU/mL]明显高于非SLE疾病组[172.9(135.3~200.1)IU/mL],差异有统计学意义(P=0.038);SLE组抗体亲和力指数[32.3(19.2~50.7)]与非SLE疾病组[15.5(9.5~49.8)]差异无统计学意义(P=0.169);SLE组抗dsDNA抗体水平和抗体亲和力指数分别与SLEDAI评分呈显着正相关(P=0.000、0.002)。(2)ELISA和IIF同时检测为阳性的标本,其抗dsDNA抗体水平和亲和力指数均明显高于单独ELISA检测为阳性标本的抗体水平和抗体亲和力指数,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抗dsDNA抗体水平及抗体亲和力指数与SLE疾病活动性密切相关,表明较高的抗体水平和抗体亲和力可能影响疾病进程,可作为病程监测的指标。IIF相对于ELISA,更倾向于检测出相对较高亲和力的抗dsDNA抗体。(本文来源于《检验医学与临床》期刊2018年02期)

吴蔼林,陈静瑶,李飞,余小平[9](2017)在《抗dsDNA(双链DNA)抗体诊断试剂盒的研发》一文中研究指出目的:开发具有自主知识产权的dsDNA抗体诊断试剂盒。方法:通过构建高灵敏度的dsDNA的抗原质粒,选择合适的宿主菌及发酵方法,研究开发适合工业化规模的高纯度质粒纯化工艺,建立适合ELISA检测的质粒耦联技术,从而开发具有自主知识产权的dsDNA抗体诊断试剂盒。结果:成功构建了重组质粒GST-2MPO,开发了一种适合工业化,大规模提取质粒的方法,并成功提取了高纯度和高浓度的非甲基化GST-2MPO质粒,克服了空间位阻等问题,将质粒成功耦联在酶标板上。结论:本研究用以碱裂解法为基础,研发了一种适合工业化生产的大规模高纯度高浓度的质粒大量提取方法,以质粒DNA作为靶抗原,建立检测抗dsDNA抗体的ELISA方法,研发制备出具有自主知识产权的dsDNA抗体诊断试剂盒,检测结果表明,该方法具有良好的精密度和准确性。(本文来源于《2017第八届国际DNA和基因组活动周——2017第七届国际分子与细胞生物学大会会刊》期刊2017-04-25)

李琦,王玲玲,赵立铭,郭慧娟,陈丽丽[10](2016)在《抗核抗体、抗双链DNA抗体和抗可溶性抗原抗体检测项目的方法学性能验证》一文中研究指出目的建立抗核抗体(ANA)、抗双链DNA抗体(ds-DNA)和抗可溶性抗原抗体(ENA)检测项目方法学性能验证的方案,确保检测方法的性能满足实验室及临床诊疗的质量要求。方法按照ISO15189相关文件的要求,对其符合率、检出限、重复性、人员比对、设备与环境等5个方面进行验证。结果 5个方面的性能验证符合相应的标准要求。结论抗核抗体、抗双链DNA抗体和抗可溶性抗原抗体检测项目方法学性能验证的方案能够满足ISO15189的要求,同时满足临床实验室的要求,能够为临床实验室更合理的评价和应用检测方法提供参考。(本文来源于《检验医学与临床》期刊2016年21期)

双链抗体论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的·探讨酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测抗双链DNA(double-stranded DNA,ds DNA)抗体的特点及临床应用价值。方法·采用放射免疫测定(radioimmunoassay,RIA)法和ELISA法同时检测186例系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者、183例非SLE自身免疫疾病患者、78例非自身免疫病对照和50例健康体检者血清中抗ds DNA抗体,评价其诊断效能。结果·RIA法和ELISA法对于SLE诊断的敏感度分别为47.31%和62.90%、特异度分别为85.85%和81.67%,阳性预测值分别为66.67%和67.24%,阴性预测值分别为73.15%和78.14%。2种方法检测值均随疾病的活动度升高而增高。结论·ELISA法对SLE的诊断特异度与RIA法接近,但其敏感度更高,可有效筛查SLE患者。同时,2种方法均有助于监测SLE病情的活动状态。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

双链抗体论文参考文献

[1].黄燕华,王伟佳,温冬梅,陈康,谢晋烨.抗细胞膜DNA抗体、抗核抗体及抗双链DNA抗体联合检测在系统性红斑狼疮诊断中的应用价值[J].临床检验杂志.2019

[2].王之青,郑冰,李恩灵.酶联免疫吸附试验检测系统性红斑狼疮抗双链DNA抗体的应用价值[J].上海交通大学学报(医学版).2019

[3].李宁.抗双链DNA抗体、ANuA及抗Sm抗体检测在SLE诊断中的应用价值[J].中国疗养医学.2019

[4].葛建华,龚文,施新明,巩惠芸,马龙新.ELISA法联合CLIFT法检测抗双链DNA-IgG抗体应用于系统性红斑狼疮的诊断价值[J].诊断学理论与实践.2018

[5].宋慧芳,张建琴,范云鹤,李涛,马恩波.飞蝗双链RNA降解酶的抗体制备及组织定位[J].中国农业科学.2018

[6].孙佳莹,代思明,张志毅.不同方法检测抗双链DNA抗体性能评估及临床应用[J].中国实用内科杂志.2018

[7].李娜,孔宁,邹和建,万伟国.抗双链DNA抗体和抗核小体抗体定性检测对系统性红斑狼疮的诊断价值[J].中国临床医学.2018

[8].田野,张云聪,冯珍如,闫惠平,张岩.抗双链DNA抗体水平和抗体亲和力与SLE患者疾病状态的关系以及对两种方法检测能力的影响[J].检验医学与临床.2018

[9].吴蔼林,陈静瑶,李飞,余小平.抗dsDNA(双链DNA)抗体诊断试剂盒的研发[C].2017第八届国际DNA和基因组活动周——2017第七届国际分子与细胞生物学大会会刊.2017

[10].李琦,王玲玲,赵立铭,郭慧娟,陈丽丽.抗核抗体、抗双链DNA抗体和抗可溶性抗原抗体检测项目的方法学性能验证[J].检验医学与临床.2016

论文知识图

双链抗体的分子模式图%琼脂糖凝胶电泳双链抗体基因(...双链抗体及其表达质粒结构示意...1 双特异性双链抗体构建模式双链抗体基因琼脂糖凝胶电泳结果纯化双链抗体SDS-PAGE结果

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