导读:本文包含了乳铁蛋白基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:传染性法氏囊病病毒(IBDV),VP2基因,幽门螺杆菌,铁蛋白
乳铁蛋白基因论文文献综述
朱艳平,何勇,刘佳,邢瑞林,常乐凯[1]（2019）在《鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白与幽门螺杆菌铁蛋白基因融合PCR扩增及其真核表达载体的构建》一文中研究指出为获得高活性的鸡传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)VP2蛋白的重组蛋白,本试验对IBDV VP2蛋白基因与能进行自我组装的幽门螺杆菌(Hp)铁蛋白基因进行融合PCR扩增,获得其融合基因。根据成熟VP2蛋白基因cDNA序列和Hp铁蛋白基因的碱基序列,设计合成2对引物,应用融合PCR技术扩增获得融合基因片段VP2-Fe。将目的基因克隆至pMD18-T载体筛选阳性重组克隆质粒,然后将目的基因亚克隆至真核表达载体pPICZaC后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选获得阳性表达质粒。结果显示,通过两轮PCR扩增出长度为1 824 bp的融合基因VP2-Fe,亚克隆至pMD18-T载体,测序结果显示,融合基因无任何碱基的突变,筛选的阳性质粒命名为pMD-VP2-Fe。双酶切回收目的基因大小为1 824 bp,亚克隆至pPICZaC,PCR和双酶切鉴定出现预期大小的片段,将获得的阳性表达质粒命名为pPICZaC-VP2-Fe。本研究为后期利用真核表达载体获得其融合重组蛋白奠定基础。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2019年10期）
杨会娜,陆靖,谭文彬[2]（2019）在《致倦库蚊抗性种群和敏感品系中转铁蛋白基因表达量的分析》一文中研究指出目的分析转铁蛋白基因在致倦库蚊敏感品系、抗性种群体内的表达量。方法设计引物、提取RNA、扩增目的基因部分基因片段、纯化测序、序列比对、荧光定量PCR。采用t检验对敏感品系和抗性种群致倦库蚊体内转铁蛋白的基因表达量进行统计分析。结果扩增致倦库蚊转铁蛋白部分基因片段,测序后序列比对,荧光定量PCR分析显示,致倦库蚊敏感品系转铁蛋白荧光定量(T_(f敏))和抗性种群转铁蛋白荧光定量(T_(f抗))平均值分别为15.21和18.41,内参基因荧光定量(β_敏和β_抗)平均值分别为20.53和19.10,转铁蛋白基因在致倦库蚊抗性种群中的表达量降低,2个样本体内转铁蛋白基因表达差异有统计学意义(t=10.390,P<0.001)。结论致倦库蚊转铁蛋白基因可作为蚊虫抗性检测及治理的靶标基因。(本文来源于《中国媒介生物学及控制杂志》期刊2019年01期）
臧彧伟,王全禾,杨龙,李伟[3]（2018）在《黄鳝肠道假单胞杆菌铁蛋白基因的克隆及融合表达》一文中研究指出细菌铁蛋白(bacterioferritin,Bfr)在细菌铁代谢过程中具重要作用。为分析黄鳝肠道假单胞杆菌铁蛋白基因Bfr的功能,以该菌基因组DNA为模板,PCR扩增Bfr基因后将其克隆到pGEX-4T-1表达载体中。序列测定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导、GST-resin纯化柱分离纯化获得Bfr蛋白。用SDS-PAGE电泳及Western blot检测融合蛋白;用比色法检测融合蛋白的铁离子螯合能力,用液体培养法分析重组蛋白对假单胞杆菌生长的影响。实验结果表明:成功获得黄鳝肠道假单胞杆菌Bfr基因,并实现了Bfr基因的融合表达;带有融合标签的GST-Bfr蛋白与Fe~(3+)和Fe~(2+)均不能结合,而Bfr蛋白则可以结合Fe~(3+)但不能结合Fe~(2+);在外源添加Fe~(3+)情况下,重组Bfr蛋白可促进假单胞杆菌的营养生长。该研究为进一步深入了解假单胞杆菌铁蛋白基因的功能提供了参考资料。(本文来源于《浙江农业学报》期刊2018年11期）
马荣琴,王林玲,衡惠,周泽扬,李治[4]（2018）在《意大利蜜蜂铁蛋白基因AmFer3HCH的克隆及其在温度胁迫下的应答》一文中研究指出【目的】本研究旨在克隆鉴定意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica铁蛋白基因Am Fer3HCH,分析其在意大利蜜蜂应对温度胁迫时的组织表达变化,探讨铁蛋白Am Fer3HCH在蜜蜂应对环境温度胁迫中的作用。【方法】PCR扩增意大利蜜蜂铁蛋白基因Am Fer3HCH的cDNA序列,并对其编码氨基酸序列进行生物信息学鉴定;实时定量PCR分析该基因在不同温度(40℃和5℃)胁迫下的意大利蜜蜂工蜂成虫胸、中肠和脂肪体中的表达变化。【结果】PCR扩增获得意大利蜜蜂铁蛋白基因Am Fer3HCH,cDNA片段大小为507 bp,其核苷酸序列与GenBank意大利蜜蜂基因组数据库中的铁蛋白基因Fer3HCH(GenBank登录号:GB55416)的完全一致,确认为Am Fer3HCH基因序列。Am Fer3HCH鉴定为重链型铁蛋白,在系统进化上聚类于重链型铁蛋白分支,其氨基酸序列具有重链型铁蛋白特有的Fe2+氧化酶活性中心,含有铁蛋白家族成员所共有的水合氧化铁成核中心和铁离子通道。实时定量PCR分析显示,与对照组相比在短时高温(40℃,0~48 h)胁迫过程中,Am Fer3HCH在意大利蜜蜂工蜂成虫胸、中肠和脂肪体中的表达水平整体呈先上升、后下降再上升的趋势;在低温(5℃,0~6 h)胁迫处理过程中,中肠和脂肪体中Am Fer3HCH基因的表达量呈先上升后下降趋势,而在胸中表达量逐渐下降。【结论】意大利蜜蜂铁蛋白Am Fer3HCH为重链型铁蛋白,在意大利蜜蜂对极端温度胁迫的应答中扮演了重要的角色。(本文来源于《昆虫学报》期刊2018年09期）
王建珏[5]（2018）在《奶山羊乳铁蛋白（LF）基因克隆及启动子区转录活性研究》一文中研究指出乳蛋白是山羊乳的主要营养成分,具有含多种活性成分、营养价值高、易消化吸收等特点,其种类及其在乳中的浓度都影响乳品质。乳铁蛋白(lactoferrin,LF)是乳蛋白的主要组分,是一种重要的生理活性物质,具有广泛而独特的理化特性和生物活性,在食品、乳品、生化、医药、饲料、化妆品等领域应用前景广阔。因此,通过克隆奶山羊LF基因及研究其启动子功能解析乳腺上皮细胞乳铁蛋白的转录调控机制,获得的试验材料及研究理论对奶山羊育种及羊乳成分调控具有实际应用价值和重要理论意义。本研究以山羊的基因组序列为模板,在PCR技术扩增得到奶山羊LF基因CDS区、启动子全长序列的基础上,使用软件和在线网站进行生物信息学分析;通过5'端缺失,构建8个包含LF启动子不同缺失片段的荧光素酶报告基因载体,利用萤火虫荧光素酶活性报告系统检测不同片段启动子活性,以期确定启动子最小活性中心;并通过定点突变ERE,分析了对山羊LF启动子活性的影响。得到主要结果如下:1.克隆得到奶山羊LF基因CDS区全长。LF基因CDS全长2 127 bp,编码708个氨基酸,LF基因蛋白二级结构主要由α-螺旋和不规则卷曲组成,并预测得到了LF基因叁级结构3D模型图。ELISA检测奶山羊不同泌乳时期(泌乳初期、泌乳盛期、泌乳中期、泌乳末期)乳中LF蛋白浓度,发现随着泌乳时期延长,LF蛋白浓度呈现出下降趋势,泌乳初期最高,为222.6±41.57μg/mL;之后下降并保持一个稳定的范围,为34.61~51.94μg/mL。2.成功克隆得到山羊LF启动子区大小为2 070 bp的片段,与GenBank公布的牛(AY319306.2)、人(AF508798.1)、小鼠(M74778.1)的同源性分别为89.2%、55.25%、39.85%。生物信息学分析发现,克隆得到的LF启动子区片段包括转录起始位点(+1)上游1 935 bp、第Ⅰ内含子(+1~+36)、第Ⅰ外显子(+37~+119)和第Ⅱ内含子的部分序列(+120~+135),ATG位于第Ⅰ外显子上。LF启动子片段序列G/C含量为52.39%,并且该区域上有非典型的真核生物元件TATA-box。生物信息学分析表明,LF启动子上存在PPAR-γ、PPAR-α、LXR-α、C/EBP-α、Sp1和NF-Y等转录因子的结合位点。3.启动子缺失片段的荧光素酶活性分析表明,LF启动子的核心区域位于-84~-46 bp,并且在启动子上游存在正调控元件。同时序列分析发现,在启动子的上游区域含有ERE位点。定点突变分析发现,突变ERE叁个位点均能显着下调启动子的活性,因此,LF启动子上存在叁个功能性ERE元件(-1 038 bp、-1 144 bp和-1 777 bp)。综上所述,山羊LF基因CDS区全长为2 127 bp,LF在泌乳初期乳中浓度较高。克隆得到山羊LF启动子区2 070 bp片段,山羊LF启动子5'侧翼序列与牛的同源性较高,启动子核心区域定位在-84~-46 bp之间,功能性ERE元件对维持启动子转录基础活性具有重要作用,初步研究并揭示了LF基因转录调控机制。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2018-04-11）
嵇雅茹,王雅楠,张宏波,张学明[6]（2018）在《人乳铁蛋白cDNA基因的克隆》一文中研究指出目的:克隆人乳铁蛋白c DNA基因,进而为重组人乳铁蛋白的制备奠定基础。方法:从人静脉血中性粒细胞中提取得总RNA,RT-PCR法扩增人乳铁蛋白c DNA基因后,将其插入到克隆载体p JET1.2,DNA测序法鉴定基因序列。结果:从人静脉血中性粒细胞中分离获得了总RNA,RT-PCR法克隆了人乳铁蛋白c DNA基因,经过DNA测序分析鉴定,其结果与Gene Bank中序列完全一致。结论:成功从人静脉血中性粒细胞中克隆扩增了人乳铁蛋白c DNA基因,为重组人乳铁蛋白的制备奠定基础。(本文来源于《包头医学院学报》期刊2018年03期）
陆靖,史琦琪,程鹏,公茂庆,崔文[7]（2018）在《淡色库蚊抗性种群和敏感品系中铁蛋白基因表达量的分析》一文中研究指出目的对淡色库蚊抗性种群和敏感品系中的铁蛋白基因表达量进行分析。方法设计引物,扩增目的基因全长、纯化测序、序列分析,荧光定量PCR检测铁蛋白基因的表达水平;采用假设检验中的t检验方法,对2种不同处理的淡色库蚊样本体内铁蛋白基因表达量进行统计分析。结果成功扩增淡色库蚊铁蛋白基因片段,经荧光定量PCR测定,淡色库蚊敏感品系铁蛋白荧光定量(F敏)和抗性种群铁蛋白荧光定量(F抗)平均值分别为11.41和15.73,内参基因荧光定量(β敏和β抗)平均值分别为10.03和18.27,铁蛋白基因在淡色库蚊抗性种群中的表达量是敏感品系的15.08倍,t检验结果显示,两样本体内铁蛋白基因表达差异有统计学意义(t=26.100,P<0.001)。结论淡色库蚊铁蛋白基因可作为蚊虫抗性检测及治理的靶标基因。(本文来源于《中国媒介生物学及控制杂志》期刊2018年02期）
秦毅,吕国英,张作法[8]（2018）在《转基因水稻中转人乳铁蛋白的抗氧化及免疫作用》一文中研究指出以转人乳铁蛋白为研究对象,研究其抗氧化和免疫活性。采用DPPH法、ABTS法和羟基自由基清除能力的方法来研究转人乳铁蛋白(rh LF)的抗氧化功能,通过小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞增殖和吞噬活性的检测来测定转人乳铁蛋白的免疫活性。结果表明,转人乳铁蛋白对DPPH、ABTS和羟基自由基具有一定的清除能力,并能促进免疫细胞的增殖和增强免疫细胞的吞噬活性。转人乳铁蛋白具有较好的免疫活性和抗氧化活性,是开发相关保健食品的重要资源。(本文来源于《浙江农业学报》期刊2018年01期）
陆杨,李静,何英,黄志刚,晏青[9]（2018）在《转铁蛋白基因多态性对毛细管电泳法检测血清糖缺失性转铁蛋白的影响》一文中研究指出目的研究转铁蛋白(Tf)基因多态性对毛细管电泳检测血清糖缺失性转铁蛋白(CDT)的影响,探讨其临床应用价值。方法选择51例健康体检者,17例非酒精性肝病者,65例酗酒者作为研究对象,均为汉族成年男性。首先采用毛细管电泳(CE)获取样本的CDT电泳图,选取会影响毛细管电泳对血清中CDT含量检测并且在中国人群中较为常见的Tf基因变异体:Tf-Dchi(A>G)、Tf-D1(A>G)与Tf-B2(G>A),应用高分辨熔解曲线(HRM)初步检测所有标本的基因型,对HRM筛选出的样本进行测序验证。结果 133例标本经毛细管电泳后显示:127例峰分离良好,6例未能完全分离(健康组2例,非酒精性肝病3例,酗酒组1例),导致所得CDT结果不可信。133例样本经HRM分析,可疑突变样本经测序确认后,分别检出3例Tf-Dchi(A>G)杂合突变型,0例TfD1(A>G)突变型,0例Tf-B2(G>A)突变型,其余3例均为C型。Tf-Dchi、Tf-D1、Tf-B2突变型在被检测人群中出现概率分别为2.3%(3/133),0,0。结论 Tf基因多态性中Tf-Dchi型变异体会导致毛细管电泳中Tf异构体分离不佳,影响检测准确性。(本文来源于《四川大学学报(医学版)》期刊2018年01期）
周文君,郭日红,邓明田,王锋,张艳丽[10]（2017）在《RS-1提高CRISPR-Cas9系统介导的人乳铁蛋白基因敲入效率》一文中研究指出尝试利用CRISPR-Cas9系统敲除山羊基因组中β-乳球蛋白(BLG)基因,以实现在BLG基因座敲入人乳铁蛋白(h LF)基因,并进一步探讨了不同浓度RAD51蛋白激活剂(RS-1)对同源重组效率的影响。首先针对山羊BLG的第一外显子设计并构建了sg RNA和Cas9共表达载体p Cas9-sg BLG,将该载体转染至山羊耳成纤维细胞,利用PCR和T7EN1法验证了其基因组编辑活性;然后进一步构建了BLG基因打靶载体p BHA-h LF-NIE(包含NEO/EGFP);将该打靶载体与p Cas9-sg BLG载体共转染至山羊耳成纤维细胞,分别用0、5、10和20μmol/L RS-1处理细胞,分析了绿色荧光蛋白的表达效率;同时用800μg/m L G418对不同浓度RS-1处理后的细胞进行筛选,挑取EGFP阳性细胞克隆,进一步通过PCR和测序鉴定h LF定点敲入的阳性细胞克隆。结果显示:设计的sg RNA编辑山羊BLG位点的效率为25%-31%;报告基因的表达效率提示RS-1可以促进基因敲入效率的提高,其效率与RS-1浓度呈正相关,20μmol/L RS-1处理组的效率是对照组的3.5倍;利用G418筛选h LF敲入阳性细胞克隆后,当RS-1浓度为0-10μmol/L时,h LF敲入效率随着RS-1浓度增加而升高,在10μmol/L时阳性克隆率最高为32.61%,然而在20μmol/L时敲入阳性克隆率下降至22.22%,且衰老细胞克隆增多。以上结果表明,利用CRISPR-Cas9系统可以实现在山羊耳成纤维细胞中敲除BLG基因和敲入h LF基因,且适宜浓度的RS-1可以显着提升基因敲入效率,本试验为高效利用CRISPR-Cas9系统获得基因敲入的细胞提供了参考依据。(本文来源于《生物工程学报》期刊2017年08期）
乳铁蛋白基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的分析转铁蛋白基因在致倦库蚊敏感品系、抗性种群体内的表达量。方法设计引物、提取RNA、扩增目的基因部分基因片段、纯化测序、序列比对、荧光定量PCR。采用t检验对敏感品系和抗性种群致倦库蚊体内转铁蛋白的基因表达量进行统计分析。结果扩增致倦库蚊转铁蛋白部分基因片段,测序后序列比对,荧光定量PCR分析显示,致倦库蚊敏感品系转铁蛋白荧光定量(T_(f敏))和抗性种群转铁蛋白荧光定量(T_(f抗))平均值分别为15.21和18.41,内参基因荧光定量(β_敏和β_抗)平均值分别为20.53和19.10,转铁蛋白基因在致倦库蚊抗性种群中的表达量降低,2个样本体内转铁蛋白基因表达差异有统计学意义(t=10.390,P<0.001)。结论致倦库蚊转铁蛋白基因可作为蚊虫抗性检测及治理的靶标基因。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
乳铁蛋白基因论文参考文献
[1].朱艳平,何勇,刘佳,邢瑞林,常乐凯.鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白与幽门螺杆菌铁蛋白基因融合PCR扩增及其真核表达载体的构建[J].中国畜牧兽医.2019
[2].杨会娜,陆靖,谭文彬.致倦库蚊抗性种群和敏感品系中转铁蛋白基因表达量的分析[J].中国媒介生物学及控制杂志.2019
[3].臧彧伟,王全禾,杨龙,李伟.黄鳝肠道假单胞杆菌铁蛋白基因的克隆及融合表达[J].浙江农业学报.2018
[4].马荣琴,王林玲,衡惠,周泽扬,李治.意大利蜜蜂铁蛋白基因AmFer3HCH的克隆及其在温度胁迫下的应答[J].昆虫学报.2018
[5].王建珏.奶山羊乳铁蛋白（LF）基因克隆及启动子区转录活性研究[D].西北农林科技大学.2018
[6].嵇雅茹,王雅楠,张宏波,张学明.人乳铁蛋白cDNA基因的克隆[J].包头医学院学报.2018
[7].陆靖,史琦琪,程鹏,公茂庆,崔文.淡色库蚊抗性种群和敏感品系中铁蛋白基因表达量的分析[J].中国媒介生物学及控制杂志.2018
[8].秦毅,吕国英,张作法.转基因水稻中转人乳铁蛋白的抗氧化及免疫作用[J].浙江农业学报.2018
[9].陆杨,李静,何英,黄志刚,晏青.转铁蛋白基因多态性对毛细管电泳法检测血清糖缺失性转铁蛋白的影响[J].四川大学学报(医学版).2018
[10].周文君,郭日红,邓明田,王锋,张艳丽.RS-1提高CRISPR-Cas9系统介导的人乳铁蛋白基因敲入效率[J].生物工程学报.2017
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