论文摘要
为了探究5’-nucleotidase基因的功能及其在鼠伤寒沙门菌感染中的作用,本研究首先构建缺失1 112 bp的5’-nucleotidase基因的重组自杀性质粒pR E 112Δ5’-nucleotidase,利用重组自杀性质粒介导的等位基因交换技术,两步法筛选出SL1344Δ5’-nucleotidase缺失株,并对其生物学特性进行初步研究。PCR及测序结果表明,SL1344Δ5’-nucleotidase构建成功,且回复株SL1344CΔ5’-nucleotidase构建成功。进一步研究表明,缺失株SL1344Δ5’-nucleotidase保留了亲本菌株SL1344的血清型1,4,5,12∶i∶1,2,且能够稳定遗传缺失1 112 bp的5’-nucleotidase基因,生长速度没有发生明显改变。但是,缺失株SL1344Δ5’-nucleotidase口服感染6周龄BALB/c小鼠的LD50为4.30×107CF U,毒力降低至亲本株SL1344的1.96%。免疫保护率试验结果显示,对6周龄BALB/c小鼠免疫后第17天,鼠伤寒沙门菌野生株攻毒有50%的保护率。缺失株免疫小鼠后第21天,血清抗体IgG水平达到最高。回复菌株与亲本亲株之间生物学特性无显著性差异,基本恢复到野生型水平。上述结果表明,SL1344Δ5’-nucleotidase基因缺失株构建成功,遗传稳定,毒力明显降低,且具有较好的免疫原性,为研究鼠伤寒沙门菌5’-nucleotidase基因与其致病力之间的关系提供了依据,并为研究它在鼠伤寒沙门菌感染中的作用奠定了基础。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 张梦珂,廖成水,毛福超,王晓利,张春杰,李银聚,吴庭才,程相朝
关键词: 鼠伤寒沙门菌,基因,缺失株,回复株,生物学特性
来源: 中国兽医科学 2019年05期
年度: 2019
分类: 农业科技,基础科学
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 河南科技大学动物科技学院洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室,河南科技大学医学院,洛阳职业技术学院
基金: 国家自然科学基金面上项目(31572489),河南省科技攻关项目(182102110061),河南科技大学博士启动基金项目(13480071)
分类号: S852.61
DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0042
页码: 589-597
总页数: 9
文件大小: 452K
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